一种携人分子佐剂的融合蛋白避孕疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101161287A

    公开(公告)日:2008-04-16

    申请号:CN200610117091.2

    申请日:2006-10-12

    Inventor: 李大金

    Abstract: 本发明属生物制药领域,涉及一种与人分子佐剂hC3d3交联的避孕疫苗,即hCGβ-hC3d3融合蛋白避孕疫苗。本发明选用真核表达载体pCI,构建带有纯化标签的hCGβ-hC3d3融合蛋白和hCGβ蛋白的真核表达质粒,通过动物宿主获得高效表达,经鉴定、纯化得高纯度目的蛋白,通过体外刺激人PBMC实验,证实人分子佐剂hC3d3增强hCGβ蛋白疫苗体液免疫效力和抗生育潜能。较现有技术,其抗生育效果及其作用机理将更为合理、安全。

    一种人绒毛膜促性腺激素β亚单位的制备方法

    公开(公告)号:CN1425769A

    公开(公告)日:2003-06-25

    申请号:CN02157797.8

    申请日:2002-12-26

    Inventor: 李大金

    Abstract: 本发明属生物药领域。涉及一种表达人绒毛膜促性腺激素β亚单位(hCGβ)的新方法,本发明将短小乳酸杆菌S-层蛋白信号肽基因与hCGβ基因连接,将其置于乳酸杆菌整合型表达质粒pIlac的lac启动子下游,电穿孔转化干酪氏乳酸杆菌,获得hCGβ分泌型稳定表达的乳酸杆菌。所述乳酸杆菌可作为疫苗载体,携带表达目的蛋白,可直接应用于人体,在全身粘膜部位诱导产生高滴度的抗体而发挥作用,减轻发热等副反应,为探索乳酸杆菌携带表达避孕疫苗的抗生育作用奠定基础。

    表达Tim-3的外周血NK细胞在制备自然流产生物标记物中的用途

    公开(公告)号:CN107287273B

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN201610202196.1

    申请日:2016-03-31

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及表达Tim‑3的外周血NK细胞在制备自然流产生物标记物中的用途。本发明所述的NK细胞具有耐受表型与低细胞杀伤毒性,经试验证明所述的表达Tim‑3的外周血NK细胞在正常妊娠外周血的高表达,而自然流产患者这种细胞数量下降、功能紊乱;拮抗NK细胞的Tim‑3导致妊娠失败,过继转输该NK细胞亚群可挽救免疫性自然流产模型以及NK敲除所致的妊娠失败;所述的表达Tim‑3的外周血NK细胞可用于制备自然流产生物标记物,进一步作为临床不明原因自然流产的新型预测与防治靶点。

    油酰基-L-α-溶血磷脂酸在制备自然流产保胎药物中的应用

    公开(公告)号:CN111686118A

    公开(公告)日:2020-09-22

    申请号:CN202010687222.0

    申请日:2020-07-16

    Abstract: 本发明涉及油酰基-L-α-溶血磷脂酸在用于制备治疗、预防自然流产药物中的用途。本发明的油酰基-L-α-溶血磷脂酸可显著促进巨噬细胞对蜕膜基质细胞的黏附。经油酰基-L-α-溶血磷脂酸处理后的巨噬细胞可促进滋养细胞的增殖和侵袭。构建流产孕鼠模型并经体内实验证实,应用油酰基-L-α-溶血磷脂酸可通过其富集不足所致的蜕膜巨噬细胞丢失,从而维持蜕膜免疫成分稳态,并显著降低孕鼠胚胎吸收率,从而改善不良妊娠结局。因此,油酰基-L-α-溶血磷脂酸有望作为自然流产的保胎药物。

    一种与人分子佐剂hC3d3同义突变体交联的疫苗读框

    公开(公告)号:CN101497881A

    公开(公告)日:2009-08-05

    申请号:CN200810033499.0

    申请日:2008-02-03

    Inventor: 李大金 李明清

    Abstract: 本发明属生物制药领域,涉及一种与人分子佐剂hC3d3同义突变体交联的疫苗读框。本发明采用MutanBEST Kit,分别对携野生型hC3d的重组质粒pMD18-T-hC3d的5’端和3’端进行定点突变,获得含序列1的同义突变体1和序列2的同义突变体2的重组质粒pMD18-T-V1hC3d和pMD18-T-V2hC3d,通过酶切连接获得质粒pMD18-T-hCGβ-VhC3d3和pCMV4-hCGβ-VhC3d3。所构建的人hC3d3同义突变体及构建的真核表达质粒,经试验证实,能实现在COS-7系统中获得融合蛋白hCGβ-hC3d3高效表达,经鉴定为较高纯度的目的蛋白,并无携2个拷贝和单个拷贝hC3d的hCGβ重组蛋白。本发明在转录水平上有效的防止3个拷贝hC3d的同源重组,为高效制备携人源分子佐剂的融合疫苗提供新方法。

    一种与分子佐剂交联的避孕疫苗

    公开(公告)号:CN1440811A

    公开(公告)日:2003-09-10

    申请号:CN03108565.2

    申请日:2003-03-28

    Inventor: 李大金

    Abstract: 本发明属分子免疫学领域,涉及一种与分子佐剂交联的避孕疫苗。本发明将起分子佐剂作用的3个拷贝C3d与hCGβ通过基因克隆构建入真核表达质粒pCMV4,该融合质粒可作为DNA避孕疫苗免疫动物或人产生抗生育效果。通过基因工程表达相应产物,形成蛋白避孕疫苗,免疫动物或人类同样具有抗生育效果。

    一种与人分子佐剂hC3d3同义突变体交联的疫苗读框

    公开(公告)号:CN101497881B

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN200810033499.0

    申请日:2008-02-03

    Inventor: 李大金 李明清

    Abstract: 本发明属生物制药领域,涉及一种与人分子佐剂hC3d3同义突变体交联的疫苗读框。本发明采用MutanBEST Kit,分别对携野生型hC3d的重组质粒pMD18-T-hC3d的5’端和3’端进行定点突变,获得含序列1的同义突变体1和序列2的同义突变体2的重组质粒pMD18-T-V1hC3d和pMD18-T-V2hC3d,通过酶切连接获得质粒pMD18-T-hCGβ-VhC3d3和pCMV4-hCGβ-VhC3d3。所构建的人hC3d3同义突变体及构建的真核表达质粒,经试验证实,能实现在COS-7系统中获得融合蛋白hCGβ-hC3d3高效表达,经鉴定为较高纯度的目的蛋白,并无携2个拷贝和单个拷贝hC3d的hCGβ重组蛋白。本发明在转录水平上有效的防止3个拷贝hC3d的同源重组,为高效制备携人源分子佐剂的融合疫苗提供新方法。

    一种携分子佐剂的融合蛋白避孕疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN1569227A

    公开(公告)日:2005-01-26

    申请号:CN200410018037.3

    申请日:2004-04-29

    Inventor: 李大金 王秀丽

    Abstract: 本发明属生物制药领域,涉及一种与分子佐剂交联的避孕疫苗,具体涉及一种与分子佐剂C3d3交联的hCGβ-C3d3融合蛋白避孕疫苗。本发明选用真核表达载体phCMV1,分别构建带有6个组氨酸纯化标签的hCGβ-C3d3融合蛋白和hCGβ蛋白的真核表达质粒phCMV1-6His-hCGβ-C3d3和phCMV1-6His-hCGβ。在体外表达、鉴定、纯化出hCGβ-C3d3融合蛋白和hCGβ蛋白。分别加用弗氏佐剂免疫不同品系小鼠。经检测抗体水平、抗血清中和hCG生物学活性的能力和脾细胞分泌细胞因子的水平,证实hCGβ-C3d3融合蛋白疫苗具有较强的抗生育潜能作用。

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