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公开(公告)号：CN119688847A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202311203093.3
申请日：2023-09-18
Applicant: 粤港澳大湾区精准医学研究院(广州) , 复旦大学
Abstract: 本发明属生物分析技术领域，涉及N‑糖肽高通量靶向质谱分析方法，具体涉及一种位点特异性完整N‑糖肽高通量靶向质谱分析的方法,所述方法其包括通过对位点特异性完整N‑糖肽进行等重同位素标签TMT试剂和轻重同位素异丙胺两步衍生后，采用靶向质谱分析方法进行数据采集。本发明方法可实现每次质谱进样同时分析20个样本中位点特异性完整N‑糖肽相对含量的变化。本发明的分析方法，通过引入同位素标记的化学衍生步骤，实现对完整N‑糖肽样品的快速处理和准确分析。
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公开(公告)号：CN109142506B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN201710460611.8
申请日：2017-06-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析技术领域，涉及一种基于质谱的N‑糖链相对定量的方法，本方法利用苯胺功能化的大环化合物标记N‑糖链再螯合稀土金属离子相对定量，其中采用苯胺功能化的DOTA对N‑糖链衍生，在螯合稀土金属离子Ho3+/Lu3+，两步反应均具有较高的衍生效率；测试结果显示，通过衍生上螯合了稀土金属离子的DOTA后，能提高糖链在MALDI‑MS负离子反射模式下的离子化效率，并改善糖链在质谱中的碎裂，有助于糖链结构解析。本发明用于大肠癌病人与正常人血清中N‑糖链表达水平的差异分析结果显示，本方法通过螯合不同的稀土金属离子，能实现多标标记定量，并具有很好的定量准确性及重复性。
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公开(公告)号：CN105300783B
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201410331835.5
申请日：2014-07-13
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属蛋白质分析领域，涉及一种利用氨氧基修饰的磁性纳米材料富集糖基化肽的新方法，其包括：首先对糖肽上的羟基进行高碘酸纳NaIO4氧化使得羟基变为醛基，再将氨氧基修饰的磁性纳米材料Fe3O4@ONH2置于氧化后的糖肽溶液中，通过氨氧基基团和糖肽中糖链氧化后得到的醛基之间反应，将糖肽固定在磁性纳米材料上，随后将未和纳米材料反应的非糖肽清洗除去,最后再利用去糖链酶将捕获的糖肽从材料上解离下来，送入质谱分析糖基化肽。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效，可以实现糖基化肽的高灵敏、高选择性质谱分析。
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公开(公告)号：CN103969321B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201310031923.9
申请日：2013-01-24
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析领域，涉及一种固定化酶原位酶解组织切片实现蛋白鉴定并应用于质谱成像的新方法。本发明利用表面具有羟基羧基等亲水基团的氧化石墨烯固定胰蛋白酶，通过提高酶解效率，实现组织切片上蛋白质的原位高效酶解及鉴定，并将其应用于质谱成像技术，确定了切片中蛋白质的分布。本发明所选用的载体材料氧化石墨烯具有极强的吸附能力，可在短时间内吸附胰蛋白酶，利用限域效应极大提高了胰蛋白酶的酶解效率，有效促进了组织切片原位酶解及蛋白的鉴定。本发明具有步骤简单、操作方便、快速高效等特点，可广泛用于蛋白质组学相关领域。
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公开(公告)号：CN103940894B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201310025887.5
申请日：2013-01-23
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属蛋白质分析领域，涉及富集磷酸化肽和糖基化肽的方法,具体涉及一种利用氨基修饰的磁性纳米材料同时选择性富集磷酸化肽和糖基化肽的新方法。本发明通过一锅法合成了氨基修饰的磁性纳米材料Fe3O4@NH2，利用磁性材料Fe3O4和磷酸化肽之间的螯合作用以及材料表面带正电的氨基和带负电的磷酸肽之间的静电作用，实现磷酸化肽段的选择性富集；利用磁性纳米材料表面氨基的亲水性实现糖肽的选择性富集；进一步实现磷酸化肽段和糖基化肽段的同时富集和质谱分析。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效，可以实现磷酸化肽和糖基化肽的同时高灵敏质谱分析。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102614818B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201210084029.3
申请日：2012-03-27
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于功能材料技术领域，具体为一种磁性介孔二氧化钛核壳式复合微球及其制备方法和应用。本发明的核壳式复合微球的核为磁性四氧化三铁纳米粒子团簇，壳为具有高结晶性的介孔二氧化钛。制备方法如下：首先制备柠檬酸稳定的磁性纳米粒子团簇，接着采用溶胶凝胶法，在磁簇表面包覆一层无定型的二氧化钛壳层，最后通过水热处理制备得到磁性介孔二氧化钛核壳式复合微球。该复合微球中具有高结晶性的介孔二氧化钛壳层使得微球对于磷酸肽具有高选择性、高富集容量、高灵敏度以及高回收率的特点；磁性核的存在使得富集了磷酸肽的微球可以很方便和快速地被磁分离出来。本发明方法操作简单、过程可控，制备的复合微球可用于分析和鉴定生物样品中极低浓度的磷酸肽。
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公开(公告)号：CN101368890A
公开(公告)日：2009-02-18
申请号：CN200710045047.X
申请日：2007-08-17
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析领域，涉及一种利用具有微观相分离结构的嵌段聚合物涂层，对多肽和蛋白质样品进行靶上无需洗脱的原位除盐和同步富集，能避免样品损失，并对所富集的样品直接进行基质辅助激光解析离子化质谱的分析和鉴定的方法。本发明无需额外的洗脱除盐步骤也无需点覆过量体积的基质溶液就可实现除盐，并可直接进行MALDI质谱分析；本发明不仅首次成功实现了样品靶上原位免洗除盐与富集的特性，而且具有灵敏度高、重现性高、通量高、耐盐能力强、经济和省时等特点。可广泛用于蛋白质组学领域，同时也大大拓展了聚合物涂层技术的应用范围。
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公开(公告)号：CN111089969B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN201811243022.5
申请日：2018-10-24
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属糖蛋白质组学和糖组学分析领域，涉及一种N‑糖链快速酶解释放和固相富集并质谱分析的方法，其包括：使用脱脂棉材料吸取含糖蛋白样品的溶液，并在棉上进行高温快速PNGase F酶解释放N‑糖链；在酶解结束后调节溶液环境，利用脱脂棉材料表面高密度的羟基与糖链的氢键等作用，将游离糖链吸附在脱脂棉材料上，随后将未和脱脂棉材料结合的非糖链分子，如蛋白质、多肽等清洗除去，最后使用水溶液将吸附的糖链洗脱，送入质谱分析。本发明方法使用材料廉价易得，易于制备，操作简便，可以实现N‑糖蛋白的高速酶解及N‑糖链的高选择性富集、高灵敏度质谱分析。
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公开(公告)号：CN108344871B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201710051523.2
申请日：2017-01-23
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属分析化学及蛋白质分析领域，涉及氟固相萃取新方法,具体涉及一种利用氟化石墨为固相吸附剂分离富集含半胱氨酸肽段的方法。本发明使用氟化石墨作为氟固相萃取的固相吸附剂，利用氟化石墨表面与目标分析物氟标签的氟‑氟作用，有效地分离目标分析物和杂质。本发明中所使用的氟化石墨相比于传统的氟固相萃取吸附剂，避免了高纯度二氧化硅基质及高氟化硅烷偶联剂的使用，具有成本低、选择性好、检出限低、回收率高、普及度高等特点，可以实现含半胱氨酸肽段的分离富集和质谱鉴定。
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公开(公告)号：CN108344871A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201710051523.2
申请日：2017-01-23
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属分析化学及蛋白质分析领域，涉及氟固相萃取新方法,具体涉及一种利用氟化石墨为固相吸附剂分离富集含半胱氨酸肽段的方法。本发明使用氟化石墨作为氟固相萃取的固相吸附剂，利用氟化石墨表面与目标分析物氟标签的氟-氟作用，有效地分离目标分析物和杂质。本发明中所使用的氟化石墨相比于传统的氟固相萃取吸附剂，避免了高纯度二氧化硅基质及高氟化硅烷偶联剂的使用，具有成本低、选择性好、检出限低、回收率高、普及度高等特点，可以实现含半胱氨酸肽段的分离富集和质谱鉴定。
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