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公开(公告)号：CN103146660A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310072023.9
申请日：2013-03-07
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 应激条件提高茂原链霉菌生产谷氨酰胺转氨酶产量的方法，涉及链霉菌发酵生产谷氨酰胺转氨酶技术领域。本发明采用茂原链霉菌为发酵菌株，经斜面培养和种子培养后，接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转氨酶，在发酵过程中分别通过热处理培养物、在发酵培养基中添加甲醇或NaCl，实现了提高谷氨酰胺转氨酶产量的目标，并添加保护剂制成低温喷雾干燥或冷冻干燥干粉。本发明得到的酶经纯化后热稳定性和pH稳定性均高于吸水链霉菌合成的谷氨酰胺转氨酶，在食品加工、纺织行业和组织支架制备行业中具有很大的潜力。所用添加剂价格低廉，实施方法简便，可显著提高谷氨酰胺转氨酶产量，产量分别提高60%，160%和140%。
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公开(公告)号：CN102277348A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110233375.9
申请日：2011-08-16
Applicant: 哈尔滨工业大学
IPC: C12N11/12
Abstract: 本发明是针对自然酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，而且酶的制取一般较困难，且成本高昂，难以反复或连续使用等问题，而提出的用高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的方法，包括高碘酸钠的氧化活化和磷脂酶A1的固定化步骤。本发明中，高碘酸钠具有将表面具有大量羟基的滤纸表面羟基氧化成醛基的作用，根据醛基含量越高，与酶的交联率越大的特性固定化磷脂酶A1，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收，最终得到的固定化酶活为4.8U/cm2，所得到的固定化酶的活力较常规固定化方法有所提高。
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公开(公告)号：CN113621597B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202111131230.8
申请日：2021-09-26
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进乳源假单胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，所述方法包括如下步骤：步骤一、将乳源添加剂加入到培养基中进行均质处理，然后灭菌；步骤二、将具有分泌蛋白酶AprX的乳源嗜冷假单胞菌按照0.5～1.5％(v/v)的接种量接种到培养基中活化2～4次，将活化好的乳源嗜冷假单胞菌接种到添加乳源添加剂的培养基中进行培养。该方法通过添加0.5～5％(w/v)的乳源添加剂能够使得假单胞菌分泌的蛋白酶活力提高3～5倍。
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公开(公告)号：CN104342482A
公开(公告)日：2015-02-11
申请号：CN201410530104.3
申请日：2014-10-10
Applicant: 哈尔滨工业大学
IPC: C12Q1/34
Abstract: 本发明公开了一种益生菌中黑芥子酶活性检测方法。针对黑芥子酶可能是诱导酶的情况，使用黑芥子酶的反应底物黑芥子硫苷酸钾对菌体进行诱导，然后再测定黑芥子酶的活力。首先使用黑芥子硫苷酸钾代替葡萄糖进行初筛，初步判断菌株有无分解黑芥子硫苷酸钾的能力。再使用黑芥子硫苷酸钾诱导菌体产生黑芥子酶，使菌体产生黑芥子酶的代谢通路激活，然后将完整菌体加入到一定浓度黑芥子硫苷酸钾溶液中进行代谢，一定时间后离心去除菌体，测定上清液在340nm处的吸光度值，发现此时的吸光度值与不加入菌体的相同浓度的黑芥子硫苷酸钾溶液的吸光度值相比变化显著。因此，诱导菌体法测定益生菌中黑芥子酶活性的方法可行。该方法操作简单，检测周期短。
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公开(公告)号：CN102978143B
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201210560900.2
申请日：2012-12-21
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 本发明涉及嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌的冻干粉制剂的制备方法，提供了一种在制备嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌冻干产品过程中使用的培养基；发明人将影响细菌发酵的两个关键因素相结合，创造性地在高密度发酵过程中采用两段式pH、三段式变温相结合的方式进行发酵，最大细胞生物量和最高发酵活力较单一方式得到明显提高，同时得到的冻干制剂中活菌数高、稳定性好；同时还提供了一种优良的冻干保护剂。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103146661A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310072024.3
申请日：2013-03-07
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: MgCl2胁迫提高茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶产量的方法，涉及链霉菌发酵生产谷氨酰胺转氨酶技术领域。本发明采用茂原链霉菌为发酵菌株，经斜面培养和种子培养后，接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转氨酶，通过在发酵培养基中添加MgCl2，最终实现了提高谷氨酰胺转氨酶产量的目标，并添加保护剂制成低温喷雾干燥或冷冻干燥干粉。本发明所用的MgCl2价格低廉，能显著提高了谷氨酰胺转氨酶的产量，在其它培养条件相同的情况下，本发明比不添加MgCl2的对照例产量提高约100%，并且缩短了发酵周期。
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公开(公告)号：CN102978143A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210560900.2
申请日：2012-12-21
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 本发明涉及嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌的冻干粉制剂的制备方法，提供了一种在制备嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌冻干产品过程中使用的培养基；发明人将影响细菌发酵的两个关键因素相结合，创造性地在高密度发酵过程中采用两段式pH、三段式变温相结合的方式进行发酵，最大细胞生物量和最高发酵活力较单一方式得到明显提高，同时得到的冻干制剂中活菌数高、稳定性好；同时还提供了一种优良的冻干保护剂。
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公开(公告)号：CN102277348B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201110233375.9
申请日：2011-08-16
Applicant: 哈尔滨工业大学
IPC: C12N11/12
Abstract: 本发明是针对自然酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，而且酶的制取一般较困难，且成本高昂，难以反复或连续使用等问题，而提出的用高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的方法，包括高碘酸钠的氧化活化和磷脂酶A1的固定化步骤。本发明中，高碘酸钠具有将表面具有大量羟基的滤纸表面羟基氧化成醛基的作用，根据醛基含量越高，与酶的交联率越大的特性固定化磷脂酶A1，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收，最终得到的固定化酶活为4.8U/cm2，所得到的固定化酶的活力较常规固定化方法有所提高。
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公开(公告)号：CN101948777A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010266379.2
申请日：2010-08-30
Abstract: 功能性双歧杆菌高密度培养及其深冻产品的制备方法，它涉及双歧杆菌培养及其深冻产品的制备方法。它解决了现有双歧杆菌生产存在产品中活菌含量小、用量大、发酵效果差，而且其冻干制剂的制造和使用成本均较高的问题。培养：一、耐氧驯化的功能性双歧杆菌接种到增菌培养基中，得发酵液；二、洗脱和絮凝；三、膜浓缩处理后即完成。制备：一、膜浓缩产物与冷冻保护剂混合预冷，得混合物；二、将混合物预冻后粉碎、包装并贮藏即完成。本发明中双歧杆菌的活菌数为5.4×1010CFU/g，用量减少，且发酵效果好，深冻产品的生产成本低、工艺简单且活性高，可达到直接使用目的。
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公开(公告)号：CN113621597A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202111131230.8
申请日：2021-09-26
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进乳源假单胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，所述方法包括如下步骤：步骤一、将乳源添加剂加入到培养基中进行均质处理，然后灭菌；步骤二、将具有分泌蛋白酶AprX的乳源嗜冷假单胞菌按照0.5～1.5％(v/v)的接种量接种到培养基中活化2～4次，将活化好的乳源嗜冷假单胞菌接种到添加乳源添加剂的培养基中进行培养。该方法通过添加0.5～5％(w/v)的乳源添加剂能够使得假单胞菌分泌的蛋白酶活力提高3～5倍。
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