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公开(公告)号：CN120041313A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202311586296.5
申请日：2023-11-24
Applicant: 厦门大学
Inventor： 袁吉锋
Abstract: 本发明涉及一种基于GPCR感知外泌蛋白或多肽的方法及其应用，该方法包括：敲除酿酒酵母中丝氨酸/苏氨酸细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Far1、信息素响应启动子控制报告基因，获得重组酵母菌株；利用α信息素标记表达菌株的外泌蛋白或多肽；将所述重组酵母菌株和所述表达菌株共培养，当所述表达菌株分泌α信息素标记的外泌蛋白或多肽，所述表达菌株分泌的α信息素激动剂被所述重组酵母菌株感知并触发报告基因的表达。由此将酿酒酵母菌株GPCR信号通路用于感知被α信息素标记的外泌蛋白或多肽，可实现外泌蛋白分子或多肽分子的高灵敏度检测，从而可以借助生物传感器方法直观地显示高性能蛋白或多肽外泌。
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公开(公告)号：CN118086357A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410175150.X
申请日：2024-02-07
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种光刺激诱导表达系统的重组菌株及其构建方法。该重组菌株敲除了酿酒酵母中丝氨酸/苏氨酸细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Far1、半乳糖诱导系统的负调节因子Gal80，并将半乳糖诱导系统转录激活因子Gal4的启动子序列替换为信息素系统转录激活因子Ste12的非依赖性基因Prm2的启动子序列，在Aro10和Adh6位点分别整合光刺激模块，之后在细胞周质间隙分泌天冬氨酰蛋白酶Bar1整合自响应信息素合成模块，最后半乳糖代谢基因Gal7‑10‑1串联位点整合信号输出模块，制得的重组菌株可自主性动态调控目的基因的表达，具有表达时间可控、表达丰度可控和信号记忆等特点，具有良好的生物工程发酵应用前景。
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公开(公告)号：CN116254286A
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202211663787.0
申请日：2022-12-23
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种氰胺诱导的酿酒酵母工程菌及其构建方法，其构建方法包括：将酿酒酵母菌中的半乳糖调控系统的转录抑制因子Gal80敲除，将酿酒酵母菌中的转录激活因子Gal4的启动子替换为氰胺诱导型DDI2/3启动子，所获的酿酒酵母工程菌可以使氰胺诱导系统偶联半乳糖(GAL)表达系统，实现氰胺剂量响应的GAL表达系统信号输出。当氰胺诱导系统用于调控酿酒酵母菌中内源ARO1突变体(N端降解子融合于AroD组份)的活性时，该表达系统表现出良好的低渗漏特征。因此，采用上述方法构建可得到严谨可控且高效的酿酒酵母蛋白表达系统，未来可应用于高效表达蛋白。
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公开(公告)号：CN115820708A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211085163.5
申请日：2022-09-06
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/81 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12N15/55 , C12N15/31 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/865
Abstract: 本发明涉及一种感知真菌信息素的重组酿酒酵母菌的构建方法及生物传感器，该重组酿酒酵母菌株敲除了丝氨酸/苏氨酸细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Far1、半乳糖诱导系统的负调节因子Gal80、内源GPCR受体Ste2，并将半乳糖诱导系统转录激活因子Gal4的启动子替换为酵母信息素响应基因Prm2的启动子；再采用持续性TEF2启动子驱动异源表达病原体真菌信息素GPCR受体和半乳糖启动子GAL1驱动的绿色荧光蛋白eGFP，该重组菌株可在感知低浓度信息素后产生强烈的绿色荧光蛋白信号，具有低渗漏、较高的信噪比等特点，可作为检测病原体真菌的生物传感器。
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公开(公告)号：CN111748508B
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202010582557.6
申请日：2020-06-23
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种高产羟基酪醇的大肠杆菌构建方法及应用，该方法包括：PCR扩增获取HpaBC、LAAD、ARO10和PAR四种基因；构建质粒pACYC‑HpaBC、质粒pET‑LAAD‑ARO10和质粒pRSF‑PAR；将质粒pACYC‑HpaBC、质粒pET‑LAAD‑ARO10和质粒pRSF‑PAR共同转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，得到重组大肠杆菌。根据本发明实施例，该方法获得的重组大肠杆菌可高产羟基酪醇，催化过程简单、环保，具有广阔的工业化应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114150009A
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202010937243.3
申请日：2020-09-08
Applicant: 厦门大学
Inventor： 袁吉锋
Abstract: 本发明涉及一种用于制备麻黄碱的工程菌的构建及麻黄碱的制备方法，其构建方法包括：向大肠杆菌或酿酒酵母中转化含有羟基扁桃酸合成酶基因HmaS和乙酰羟酸合成酶基因AHAS的重组质粒以及含有扁桃酸脱氢酶基因SMDH和苯甲酰甲酸脱羧酶基因BFD的重组质粒。采用上述方法构建得到的基于质粒的表达工程菌被证实可实现生物合成与制备麻黄碱，具有可规模化的生产、产量高、环境友好等工业应用前景，未来可通过基因组整合相应的基因模块而获得更为稳定的表达菌株，以及可以通过投苯丙氨酸、苯甲醛等补料方式进一步提高产量。
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公开(公告)号：CN119286744A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411395391.1
申请日：2024-10-08
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种利用生物传感器辅助转座子工程筛选高产菌株的方法及其应用，该方法包括：在目标宿主中构建响应生物传感器控制表达报告基因和抗性基因的质粒；将目标产物的合成模块通过转座系统随机整合至所述目标宿主的基因组；将所述目标宿主在对应抗性的平板上筛选具有耐受性的菌落，挑选报告基因输出强度高的菌落，以指向性的筛选高产目标产物的宿主菌株。该方法采用生物传感器实时动态的响应目标产物的实际产量，可快速高效地筛选出高产菌株。
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公开(公告)号：CN115820708B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202211085163.5
申请日：2022-09-06
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/81 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12N15/55 , C12N15/31 , C12N1/19 , G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/58 , G01N33/68 , C12R1/865
Abstract: 本发明涉及一种感知真菌信息素的重组酿酒酵母菌的构建方法及生物传感器，该重组酿酒酵母菌株敲除了丝氨酸/苏氨酸细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Far1、半乳糖诱导系统的负调节因子Gal80、内源GPCR受体Ste2，并将半乳糖诱导系统转录激活因子Gal4的启动子替换为酵母信息素响应基因Prm2的启动子；再采用持续性TEF2启动子驱动异源表达病原体真菌信息素GPCR受体和半乳糖启动子GAL1驱动的绿色荧光蛋白eGFP，该重组菌株可在感知低浓度信息素后产生强烈的绿色荧光蛋白信号，具有低渗漏、较高的信噪比等特点，可作为检测病原体真菌的生物传感器。
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公开(公告)号：CN117683820A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311460871.7
申请日：2023-11-03
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明涉及一种利用乙酰羟酸合酶制备芳香族α‑羟基酮的方法，该方法包括制备表达乙酰羟酸合酶的全细胞乙酰羟酸合酶MR‑BsAlsS生物催化剂；以芳香取代醛和丙酮酸作为底物，在全细胞乙酰羟酸合酶MR‑BsAlsS生物催化剂的催化下，获得芳香族α‑羟基酮。该方法提供的全细胞乙酰羟酸合酶MR‑BsAlsS生物催化剂可催化16种芳香取代醛与丙酮酸的碳‑碳缩合反应合成α‑羟基酮。相较于常规使用的合成代谢类乙酰羟酸合酶催化剂，该全细胞乙酰羟酸合酶MR‑BsAlsS生物催化剂介导的反应底物范围广，单次底物负载量高，转化效率高，α‑羟基酮产品得率高，减少了催化剂的使用成本。
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