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公开(公告)号：CN101423868A
公开(公告)日：2009-05-06
申请号：CN200810154013.9
申请日：2008-12-12
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一个对花椰菜抗黑腐病新品种进行早期筛查的试剂盒和使用该试剂盒的检测方法。试剂盒由dNTP、Taq聚合酶、PCR缓冲液、DNA模板、无菌去离子水、6×上样缓冲液及标准阳性Marker组成。检测方法包括以下步骤：(1)花椰菜基因组DNA的一步法提取；(2)基因组DNA提取结果的琼脂糖凝胶电泳检测；(3)PCR扩增；(4)PCR扩增产物凝胶电泳检测；(5)结果判读：依照标准阳性Marker带在凝胶上的迁移位置和PCR产物的迁移位置判断未知花椰菜抗、感黑腐病情况。利用该试剂盒筛查鉴定抗黑腐病花椰菜新品种或株系的结果与田间抗病性状吻和率达96％以上。该试剂盒检测具有简便、快速、准确，不受生长季节、环境条件等因素的影响，且可在苗期就能完成筛查、鉴定，节省了大量土地、人力、物力，并大大缩短了选种时间，在花椰菜抗黑腐病育种上具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112322635B
公开(公告)日：2022-10-28
申请号：CN202011283621.7
申请日：2020-11-17
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一个落叶松生长发育调控基因的编码序列，及利用上述基因编码序列培育速生、高产转基因植物的方法，它包括如下步骤：落叶松总RNA提取；落叶松RNA反转录合成cDNA；落叶松生长发育调控基因带酶切位点扩增引物的设计、合成；过表达载体构建；遗传转化；转基因阳性苗筛选；转基因植物生长发育性状观察等步骤。观察结果显示：转基因植物与野生型相比具有明显的速生、高产特性，在相同生长条件下，转基因植物地上部分生物量比野生型高20%以上。本发明公开的采用落叶松生长发育调控基因的编码序列培育速生、高产转基因植物的方法，对于高效、低成本的采用基因工程手段培育速生、高产作物或林木等经济植物具有重要价值。
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公开(公告)号：CN107488669B
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN201710872471.5
申请日：2017-09-25
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一个花椰菜BoTLP1基因的编码序列，及利用上述基因编码序列培育耐盐抗旱转基因植物的方法，它包括如下步骤：（1）花椰菜总RNA提取及cDNA合成；（2）带酶切位点引物设计、合成；（3）过表达转化载体构建；（4）遗传转化；（5）转基因阳性苗筛选；（6）转基因植物抗逆生物学性状观察。观察结果显示转基因植物与野生型相比具有明显的抗旱耐盐特性，在持续干旱条件下比野生型可以多存活10天以上；在200 mmol/L盐处理下可正常生长。本发明公开的采用基因编码序列培育耐盐抗旱转基因植物的方法，对于揭示花椰菜的耐盐抗旱分子基础及采用基因工程手段培育高耐盐抗旱作物或经济植物具有重要价值。
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公开(公告)号：CN103409524B
公开(公告)日：2015-02-11
申请号：CN201310346495.9
申请日：2013-08-12
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种45S rDNA在植物染色体上的荧光原位杂交方法，它主要包括染色体标本制备、45S rDNA探针制备、染色体荧光原位杂交、杂交信号检测等步骤，重点解决了现有荧光原位杂交探针的标记复杂繁琐的方法，提供一种简便、快速、准确的探针标记和杂交方法。本发明的探针为寡核苷酸探针在合成时可加入荧光基团修饰，不用再进行标记，与现有技术相比方法简单、成本低廉。利用这种技术能够在三小时内完成45S rDNA在染色体上的FISH定位。
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公开(公告)号：CN103421842A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310397368.1
申请日：2013-09-05
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种简单、高效大规模获得具有不同表型花椰菜材料的方法及应用。使用上述方法获得具有不同表型花椰菜材料包括：（1）花椰菜无菌苗的培养；（2）农杆菌GV3101的培养；（3）农杆菌的遗传转化；（4）Basta筛选；（5）阳性苗的炼苗与移栽；（6）不同表型花椰菜材料的生物学性状观察：根据获得的不同花椰菜材料的性状表现判断其是否符合育种目标。采用该种方法可以短时间、大规模获得具有不同表型花椰菜材料，其对于获得符合不同育种目标花椰菜亲本材料具有重要应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101124888B
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200710061225.8
申请日：2007-09-28
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种铁皮石斛四倍体的培育方法。常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在1/2MS液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有0.01％Oryzalin+0.01％秋水仙碱的1/2MS液体培养基中进行诱变处理，然后转入1/2MS固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为2n＝76的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。本发明大幅度地提高了铁皮石斛的药材产量。培育方法简单易行，诱变频率达到80％以上，一次就可以获得数百株四倍体铁皮石斛种苗，满足多倍体选种之用，使多倍体育种成为铁皮石斛遗传改良、新品种培育的重要方法。
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公开(公告)号：CN101124888A
公开(公告)日：2008-02-20
申请号：CN200710061225.8
申请日：2007-09-28
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种铁皮石斛四倍体的培育方法。常规铁皮石斛开花后采用人工方法授粉，将其种子接种在1/2MS液体培养基中非共生萌发培养时，再转入含有0.01％Oryzalin+0.01％秋水仙碱的1/2MS液体培养基中进行诱变处理，然后转入1/2MS固体培养基上，光照；取新生长的根尖固定，用压片法制备染色体标本，卡宝品红染色液染色，染色体数目为2n＝76的幼苗为四倍体铁皮石斛，按通常方法进行栽培管理。本发明大幅度地提高了铁皮石斛的药材产量。培育方法简单易行，诱变频率达到80％以上，一次就可以获得数百株四倍体铁皮石斛种苗，满足多倍体选种之用，使多倍体育种成为铁皮石斛遗传改良、新品种培育的重要方法。
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公开(公告)号：CN107488669A
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201710872471.5
申请日：2017-09-25
Applicant: 南开大学
CPC classification number: C07K14/43 , C12N15/66 , C12N15/8273
Abstract: 本发明公开了一个花椰菜BoTLP1基因的编码序列，及利用上述基因编码序列培育耐盐抗旱转基因植物的方法，它包括如下步骤：（1）花椰菜总RNA提取及cDNA合成；（2）带酶切位点引物设计、合成；（3）过表达转化载体构建；（4）遗传转化；（5）转基因阳性苗筛选；（6）转基因植物抗逆生物学性状观察。观察结果显示转基因植物与野生型相比具有明显的抗旱耐盐特性，在持续干旱条件下比野生型可以多存活10天以上；在200 mmol/L盐处理下可正常生长。本发明公开的采用基因编码序列培育耐盐抗旱转基因植物的方法，对于揭示花椰菜的耐盐抗旱分子基础及采用基因工程手段培育高耐盐抗旱作物或经济植物具有重要价值。
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公开(公告)号：CN107446928A
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201710872496.5
申请日：2017-09-25
Applicant: 南开大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一个花椰菜器官发育调控miRNA序列及利用上述序列培养高植株、少分支转基因植物的方法，它包括如下步骤：（1）花椰菜总DNA提取；（2）花椰菜miRNA-1前体的扩增；（3）花椰菜miRNA-1植物过表达载体的构建及鉴定；（4）遗传转化；(5)miRNA-1转基因拟南芥的抗性筛选及分子鉴定；（6）miRNA-1过表达转基因拟南芥表型分析。结果显示，转基因植物植株高度显著高于野生型；转基因植物植株茎分支数显著少于野生型；本发明公开的miRNA序列及其利用序列培育高植株、少分支转基因植物的方法对于揭示miRNA在花椰菜器官发育中的调控机制，进而采用基因工程手段干预植物器官发育进程，培育符合育种目标的高植株、少分支作物或经济植物具有重要价值。
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公开(公告)号：CN103451190B
公开(公告)日：2015-02-11
申请号：CN201310397370.9
申请日：2013-09-05
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一个在花椰菜器官发育中发挥关键调控作用的基因编码序列，及利用上述基因编码序列培养高生物量转基因植物的方法，它包括如下步骤：（1）花椰菜总RNA提取及第一链cDNA合成；（2）带酶切位点引物设计、合成；（3）过表达转化载体构建；（4）遗传转化；（5）转基因阳性苗筛选；（6）转基因植物生物学性状观察。对纯化后的转基因植株进行生物学性状观察，结果显示转基因植物叶片显著增多，数量显著增多，生物量约是野生型对照的200%。本发明公开的采用基因编码序列培养高生物量转基因植物的方法对于揭示花椰菜器官发育调控的分子基础及采用基因工程手段干预植物器官发育进程，培育符合育种目标的高产作物或经济植物具有重要价值。
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