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公开(公告)号：CN110387318B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201910706048.7
申请日：2019-08-01
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于空气微生物分析的大体积富集液气溶胶液体采样器，主要用于空气微生物的相关分析，此采样器可单级或者多级串联富集瓶，每级富集瓶均可盛装大体积富集液，其特征在于富集更多微生物，底端设置气体喷射柱，进气口连接流量计，气溶胶首先进入单级或者多级富集瓶的第一级，如设置多级串联富集瓶，未在第一级富集瓶中洗脱的空气微生物会再次进入第二级或者之后的更多级富集液进一步充分洗脱，单级或者多级的最后一级富集瓶后连接隔膜真空泵，富集微生物的富集液从富集瓶下方出口收集。本发明的气溶胶液体采样器，可实现长时间无明显微生物二次增殖采样；其样品可保证微生物活性及可培养性，并能保证高质量DNA提取；不限采样地点微生物浓度限制，适应采样类型广泛，简洁高效，造价便宜。
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公开(公告)号：CN103993007A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410249559.8
申请日：2014-06-09
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种从土壤样品中高效提取DNA的简易方法，本发明方法针对不同的土壤样品利用玻璃珠研磨、液氮反复冻融、SDS和溶菌酶、蛋白酶K法等方法组合，使环境样品中的DNA充分释放暴露，通过多次酚仿抽提过程进行DNA的纯化，并且通过加入内标菌株Xcc8004的方式进行DNA提取效率的测定。本发明所述方法对于样品的预处理要求简单、所需的环境样品量较少，得到的DNA浓度和纯度较高，而且提取效率较高，能够满足复杂环境样本中抗生素抗性基因污染的分析检测，方法简单可靠，具有实际应用价值。
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公开(公告)号：CN102229926A
公开(公告)日：2011-11-02
申请号：CN201110136379.5
申请日：2011-05-24
Applicant: 南开大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种河流环境样品中微生物DNA的简易提取。本发明方法将河流环境样品分为水样和底泥样品两部分，分别对其中的微生物DNA进行提取，同时该方法也可以作为其中任何一种环境样品的单独提取方法。利用液氮反复冻融法、SDS法、溶菌酶法等方法组合，能够使环境样品中微生物细胞充分裂解，DNA完全释放，经PCR-DGGE技术进行细菌多样性分析后表明，该提取方法能够有效地反映河流环境样品中微生物的完整性和多样性。
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公开(公告)号：CN118291654A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410443329.9
申请日：2024-04-12
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N33/58 , C12R1/19 , C12R1/42 , C12R1/22 , C12R1/445 , C12R1/36
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a的MCR‑1耐药基因快速检测方法，属于生物技术领域。本发明基于“DNA提取‑恒温扩增‑快速检测”的检测模式，提取环境样本中的DNA，设计MCR‑1耐药基因的CDS保守区域的扩增引物并进行恒温扩增，将crRNA、Cas12a蛋白、单链DNA分子探针加入到上述扩增产物中，激发Cas12a的反向切割单链DNA分子探针释放信号报告分子。本发明建立的MCR‑1耐药基因实时检测体系操作简单、灵敏度高、可实现即时、原位检测，检测MCR‑1耐药基因的最低检测限为100copies/ml。
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公开(公告)号：CN112255054B
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202010991116.1
申请日：2020-09-20
Applicant: 南开大学
IPC: G01N1/24
Abstract: 一种空气气溶胶循环吸附液体采样器，属于微生物气溶胶采样领域，包括采样瓶、空气进气口、空气出气口、采样液收集口，空气通过空气进气口进入采样瓶，从空气出气口排出，采样瓶内设有从顶部向下延伸的隔板，底部悬空，以每个隔间为单位，用通气管和空气分散头串联各个隔间，空气沿着通气管到达分散头，分散头以洒花形式将空气均匀散布于采样瓶内的采集液中，再从顶部通气管进入下一个隔间，从而实现空气气溶胶在采样液中的循环吸附。其效果是，既具有较高的空气气溶胶吸附效率，又保持了采样液体积较小，从而保证高质量的核酸提取，保证了进一步检测的空气微生物的活性和可培养性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116559434A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202211024860.X
申请日：2022-08-25
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/68
Abstract: 一种基于配对单域重链抗体的免疫层析试纸条及检测新型冠状病毒受体结合区蛋白的方法，属于免疫层析检测领域。本发明提供的免疫荧光试纸条包含PVC底板、样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫，供体微球‑单链重域抗体W点样于结合垫，受体微球‑单域重链抗体Q、抗His单克隆抗体分别划线于检测线与质控线；哺乳动物细胞制备RBD蛋白、原核表达制备单域重链抗体；将抗体分别偶联至供体/受体微球表面，0.01‑1000ng/mL新型冠状病毒RBD蛋白上样制备的试纸条，评估试纸条的灵敏度。本发明提供的免疫荧光试纸条可快速、灵敏检测新型冠状病毒受体结合区蛋白，与市售的胶体金试纸条检测新型冠状病毒抗原相比，有着更高的灵敏度、更好的检测精确性及稳定性、更低的检测成本。
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公开(公告)号：CN102229926B
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201110136379.5
申请日：2011-05-24
Applicant: 南开大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种河流环境样品中微生物DNA的简易提取。本发明方法将河流环境样品分为水样和底泥样品两部分，分别对其中的微生物DNA进行提取，同时该方法也可以作为其中任何一种环境样品的单独提取方法。利用液氮反复冻融法、SDS法、溶菌酶法等方法组合，能够使环境样品中微生物细胞充分裂解，DNA完全释放，经PCR-DGGE技术进行细菌多样性分析后表明，该提取方法能够有效地反映河流环境样品中微生物的完整性和多样性。
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公开(公告)号：CN101692073B
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN200910069925.0
申请日：2009-07-29
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明属于环境中痕量污染物分析领域，具体地说是一种测定畜牧粪便中抗生素的方法。该方法以EDTA-McIlvaine缓冲液和甲酸酸化的乙腈为提取液，用微波辅助萃取仪萃取，固相萃取小柱纯化浓缩，最后用液相色谱串联二级质谱(LC-MS/MS)分析测定，从而准确快捷地分析粪便中的抗生素。具体的分析测定方法为：取一定量冷冻干燥后的粪便，放到聚四氟乙烯萃取罐中，加入EDTA-McIlvaine缓冲液和甲酸酸化的乙腈，利用调试后的微波辅助萃取仪进行萃取，然后经过优化后固相萃取小柱浓缩纯化，氮气吹干，定容，最后用调试后的HPLC-MS/MS准确测定。本发明开发的测定方法简单，快捷，并具有高回收率、低检出限、高灵敏性、抗基质干扰等特点。
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公开(公告)号：CN118304442A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410568908.6
申请日：2024-05-09
IPC: A61K49/00 , C12Q1/06 , C12Q1/6851
Abstract: 本申请公开了一种评估环境耐药菌长期暴露的健康风险的方法及其应用，属于环境健康风险评估技术领域。该评估方法包括耐药菌准备、长期暴露实验、指标检测和健康风险评估，参考实际情景设定长期暴露实验时间，耐药菌根据实际暴露情景进行长期灌胃，可以提供真实的耐药菌的宿主机体水平的毒性效应；在耐药菌暴露期间，采取长期灌胃暴露，有效的评估了耐药菌对宿主机体的长期影响。此外，结合动物一系列真实的反应，包括是否可以肠道定殖、是否改变肠道菌群、是否影响肠道耐药水平和是否引起肠道炎症反应和屏障损伤，把耐药菌引起的宿主机体的健康风险分为5级，可以直接应用于耐药菌暴露引起的健康风险的评估，加深了耐药菌健康风险的认知。
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公开(公告)号：CN116577501A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202211023374.6
申请日：2022-08-25
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 一种基于纳米抗体‑单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法，涉及抗原检测领域，本发明制备了多种新型冠状病毒核衣壳蛋白纳米抗体做为固相抗体，核衣壳蛋白单克隆抗体作为检测抗体，新型冠状病毒N蛋白作为检测靶标，通过酶联免疫吸附实验筛选出一组检测性能优良的抗体对，最低检测线为0.8ng/mL。此外，一步活化法将纳米抗体、单克隆抗体分别偶联到量子点微球及磁性纳米微球的表面，成功制备两种靶向新型冠状病毒核衣壳蛋白的探针，并构建了一种快速检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的磁分离免疫均相方法，核衣壳蛋白的最低检测线为0.15ng/mL。本发明操作简单、成本低廉、反应速度快、可实现原位检测、配对抗体筛选效率高，在新型冠状病毒的快速检测中具有良好的应用前景。
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