公开(公告)号：CN114457113B

公开(公告)日：2023-11-17

申请号：CN202210216902.3

申请日：2022-03-07

Applicant: 南开大学

Inventor： 帅领 ,  孙圣怡 ,  张文豪 ,  赵芹

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/54

Abstract: 本发明一种抑制单倍体胚胎干细胞二倍化的方法公开了步骤一、构建Has2基因的表达载体；步骤二、将Has2基因的表达载体转染到单倍体胚胎干细胞中，得到待流式分选的细胞；步骤三、自待流式分选的细胞中分选得到HAS2基因的表达载体转染成功的单倍体胚胎干细胞进行培养。本发明通过在单倍体胚胎干细胞中转染外源性的Has2基因，实现Has2基因的高表达，以达到显著提高单倍体胚胎干细胞的单倍体维持能力的目的。从而在血清培养条件下长时间维持单倍体比例且不需要分选，以便于更好推进单倍体胚胎干细胞的应用。

公开(公告)号：CN108048400A

公开(公告)日：2018-05-18

申请号：CN201711435471.5

申请日：2017-12-26

Applicant: 南开大学

Inventor： 帅领 ,  王海松 ,  张文豪

IPC: C12N5/0797

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种猴子单倍体神经干细胞的获得方法，在原有普通猴子干细胞培养基的基础上进行优化培养，用0.05％的胰蛋白酶/EDTA处理单倍体胚胎干细胞克隆，成为单细胞状态，用EB培养基进行悬浮培养，形成拟胚体球；从分化第一天开始，培养基中要加ROCK抑制剂Y‑27632来抑制细胞凋亡；在第五天EB培养基换为神经诱导培养基；将初步形成神经外胚层的EB球种在基底胶铺底的培养皿中，加入神经诱导培养基进行分化；挑取神经花环，种在30μg/ml多鸟氨酸和3μg/ml层粘连蛋白铺底的培养皿中；培养14天后，进行流式细胞术，分选单倍体细胞。本发明第一次实现了在体外获得猴子单倍体神经干细胞，并具有向神经下游方向分化的能力。