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公开(公告)号：CN110184258A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910501002.1
申请日：2019-06-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507-13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507-11的Kcat/Km可达617.85s-1·mg-1·mL，是野生型的1.2倍。
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公开(公告)号：CN108998431A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810825284.6
申请日：2018-07-25
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高4-α-糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4-α-糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4-α-糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4-α-糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4-α-糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。
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公开(公告)号：CN108865962B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201810745221.X
申请日：2018-07-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。
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公开(公告)号：CN109825489A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910249596.1
申请日：2019-03-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β-淀粉酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β-淀粉酶具有高分泌能力，将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达434.65U/mL，将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h，可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达13063.8U/mL，因此，本发明的β-淀粉酶适用于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN108865962A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810745221.X
申请日：2018-07-09
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12N9/1048 , C12N15/70 , C12P19/04 , C12Y204/00
Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116283613A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310151767.3
申请日：2023-02-22
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07C213/00 , C07C215/52
Abstract: 本发明属于多巴胺制备技术领域，具体涉及一种以木质素为底物高得率制备多巴胺的方法。本发明包括以下步骤：首先，在氧气氛围下，木质素与碱性氧化剂发生氧化反应，过滤得到含产物A的混合液；用催化剂a选择性得到产物A；然后将产物A与氯化试剂混合进行取代反应，过滤，得到含有产物B的混合液；其次，向含有产物B的混合液中加入催化剂b和氰化试剂，进行氰基取代，得到含有产物C的混合液；最后，向含有产物C的混合液中加入催化剂c和酸，并通入氢气进行加氢反应，过滤、干燥即得到多巴胺。本发明以价廉易得的木质素为主要原料来合成多巴胺，不仅提高了木质素的利用率，降低多巴胺的生产成本，而且制得的多巴胺具有较高的产率。
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公开(公告)号：CN110343687B
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN201910650235.8
申请日：2019-07-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL‑1，是野生型的2.3倍；将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL‑1，是野生型的2.9倍。
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公开(公告)号：CN110343687A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201910650235.8
申请日：2019-07-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL-1，是野生型的2.3倍；将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL-1，是野生型的2.9倍。
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公开(公告)号：CN108642125A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810441370.7
申请日：2018-05-10
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于微孔板的肌醇定量检测方法，属于微生物检测领域。本发明包括以下步骤：A.将检测用菌复苏复苏菌种；B.将复苏斜面菌种利用0.9％的无菌生理盐水洗下，离心收集细胞再用0.9％的无菌盐水悬浮细胞，震荡混匀制备成菌基液；C.选取适量的菌基液利用0.9％的无菌盐水进行稀释，控制菌悬液浓度的吸光值在0.1～0.3之间，即为接种菌悬液；D.将肌醇标准溶液或待检测的样品溶液和无菌水按照一定比例加入微孔板中，再补充肌醇测定培养基；E.将接种菌悬液接种至微孔板中，并置于高速震荡摇床中，震荡培养14～17h；F.培养结束后利用酶标仪测定微孔板中菌液吸光值，绘制肌醇标准曲线并计算样品中的肌醇含量。本发明具有成本低、操作简单、检测时间短和通量大等特点。
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公开(公告)号：CN214546143U
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202120347174.0
申请日：2021-02-07
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01G17/14
Abstract: 本实用新型公开了一种园林绿化的树木保护支架，涉及园林景观技术领域，解决了支架底部的固定锥在搬运过程中容易划伤工作人员，不够安全的问题。一种园林绿化的树木保护支架，包括固定管；所述固定管包括上固定柱和下连接柱，所述固定管中心嵌套啮合连接有一处上固定柱；所述上固定柱顶部转动连接有一处上固定块；所述上固定块包括侧固定环，所述上固定块中部转动连接有一处侧固定环；所述固定管底部转动连接有一处下连接柱；所述下连接柱转动连接有一处主固定座。本实用摆动摆条能够使固定柱转至水平，固定柱贴合在侧固定座底部，避免在运输过程固定柱挂伤四周，提升支架运输和搬运时的安全性。
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