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公开(公告)号：CN106305428B
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201610780875.7
申请日：2016-08-30
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种翅果油树定芽增殖与植株再生的方法，该方法根据翅果油树腋芽处易萌发新芽的特点，采用成熟翅果油树种子无菌萌发获得实生苗，剪取带有腋芽或顶芽的幼嫩茎段为外植体，通过组织培养的方法促进腋芽萌发、伸长，获得具有一定木质化程度的健壮新枝，从而实现增殖的目的，然后经生根培养实现植株再生。本发明采用定芽增殖的方法，避开了传统的翅果油树组织培养方法中愈伤及不定芽诱导过程中易出现褐化的问题，操作简单、可行。
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公开(公告)号：CN106688895A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201710189443.3
申请日：2017-03-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用水杨酸进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，包括杂交鹅掌楸悬浮系的建立、液体单细胞的获得及过渡、诱导杂交鹅掌楸体胚的发生步骤，在诱导杂交鹅掌楸体胚的发生时，在培养基中同时添加水杨酸和ABA，或单独添加水杨酸。本发明的利用水杨酸进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，在杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生过程中，加入植物生长调节剂SA有效提高提高体胚诱导率、发育的同步性，提高杂交鹅掌楸体细胞工程种苗繁育的效益。
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公开(公告)号：CN106497968A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201610954180.6
申请日：2016-11-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8206 , C12N15/8212
Abstract: 本发明公开了一种以悬浮细胞原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法，包括：杂交鹅掌楸悬浮系细胞原生质体的制备、质粒的准备、转化和观察。本发明以杂交鹅掌楸悬浮系细胞的原生质体做为遗传转化的受体系统，通过PEI介导的方法，以绿色荧光蛋白GFP基因作为报告基因，通过荧光显微镜检测到GFP基因高效的瞬间表达。本发明采用杂交鹅掌楸悬浮系细胞作为原生质体的来源，材料丰富且状态一致，背景信号弱，取材方便，建立的瞬间表达体系可为鹅掌楸及木兰科植物基因功能的研究提供一个快速方便的操作平台。
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公开(公告)号：CN106480085A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610954179.3
申请日：2016-11-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8206 , C12N15/8212
Abstract: 本发明公开了一种以叶肉原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法，包括：杂交鹅掌楸叶肉原生质体的制备、质粒的准备、转化和观察。本发明以杂交鹅掌楸叶肉细胞的原生质体做为遗传转化的受体系统，通过PEG介导的方法，以绿色荧光蛋白GFP基因作为报告基因，通过荧光显微镜检测到GFP基因高效的瞬间表达。本发明采用杂交鹅掌楸叶片作为原生质体的来源，取材方便，活力强，建立的瞬间表达体系可为鹅掌楸及木兰科植物基因功能的研究提供一个快速方便的操作平台。
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公开(公告)号：CN117604018B
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202311501796.4
申请日：2023-11-10
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的杂交鹅掌楸转基因方法，属于遗传转化技术领域。本发明的发根农杆菌介导的杂交鹅掌楸转基因方法，将杂交鹅掌楸顶芽接种于发根农杆菌平板菌中，共培养并且筛选得到根部转化的嵌合体杂交鹅掌楸转基因植株。本发明构建的转基因植株根系的根尖处具有较强绿色荧光，而未转化根尖无绿色荧光；诱导获得的杂交鹅掌楸荧光毛状根中，rolB、NeoR、TIP和SBP基因均能扩增出条带，表明这些荧光毛状根均为发根农杆菌诱导的转基因毛状根，使用该体系将目的基因转入杂交鹅掌楸根系中是快速可行的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117770132B
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202311821621.1
申请日：2023-12-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导四倍体杂交鹅掌楸C136的方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸C136组培苗接种在继代培养基中进行继代培养；获得杂交鹅掌楸C136顶芽后接种到含有秋水仙素的液体诱导培养基中进行加倍诱导处理；将加倍诱导处理后的顶芽接种到生根培养基进行植株再生培养，筛选出染色体数为4n的生根苗；将生根苗再生植株的茎段接种到不定芽诱导培养基上，最终纯化培养筛选得到四倍体杂交鹅掌楸C136。结果表明，在含0.3％(w/v)秋水仙素的液体诱导培养基中处理72h，四倍体诱导率最高。该方法简单高效，为杂交鹅掌楸的四倍体育种提供了一种创新的技术手段。
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公开(公告)号：CN117551655A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311306968.2
申请日：2023-10-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了杂交鹅掌楸耐低温基因CBFs及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明杂交鹅掌楸耐低温基因CBFs，包括LhCBF6基因和/或LhCBF7基因和/或LhCBF9基因，其核苷酸序列分别对应SEQ ID NO.1‑3。本发明以杂交鹅掌楸的叶片组织为材料，通过克隆得到杂交鹅LhCBF6、LhCBF7、LhCBF9基因，在此基础上构建其过表达载体，转入拟南芥中，得到抗性转基因植株。结果表明转入鹅掌楸LhCBF6、LhCBF7、LhCBF9基因可以显著增强拟南芥对低温胁迫的耐性。
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公开(公告)号：CN112725356B
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202110183041.9
申请日：2021-02-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸转录因子LcbHLH16421基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过生物信息学工具对鹅掌楸bHLH家族序列进行分析，然后通过测序和同源比较，克隆得到LcbHLH16421转录因子基因。对LcbHLH16421基因构建过表达载体，转化拟南芥，获得T1代种子；将LcbHLH16421转基因拟南芥T2代植株和野生型植株同时放入4℃低温处理3d，表型观察发现转基因植株的生长受到低温胁迫的影响较小，而野生型植株生长受到抑制，且叶片有萎蔫现象。结果表明鹅掌楸LcbHLH16421基因可以增强拟南芥植株对低温胁迫的耐受能力，在提高植物低温胁迫的分子育种中具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN112746079A
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN202110174683.2
申请日：2021-02-08
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸转录因子LcbHLH52基因及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明通过生物信息学工具对鹅掌楸bHLH家族序列进行分析，然后通过测序和同源比较，成功克隆出了LcbHLH52转录因子基因。对克隆到的LcbHLH52转录因子基因构建过表达载体，转化拟南芥，获得T1代种子；将LcbHLH52转基因拟南芥T2代植株和野生型拟南芥植株同时放入4℃低温处理3d，表型观察发现转基因植株的生长受到低温胁迫的影响较小，而野生型植株生长受到抑制，叶片有萎蔫现象。结果表明鹅掌楸LcbHLH52基因可以增强拟南芥植株对低温胁迫的耐受能力，在提高植物低温胁迫的分子育种中具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN106962191B
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201710184581.2
申请日：2017-03-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法，包括种子灭菌、胚性愈伤组织的诱导、胚性悬浮细胞系的建立、液体单细胞的获得及过渡、诱导杂交鹅掌楸体胚的发生步骤，其特征在于，在诱导杂交鹅掌楸体胚的发生时，在培养基中添加茉莉酸甲酯和ABA，或单独添加茉莉酸甲酯。本发明的利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体快繁的方法，在杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生过程中，加入植物生长调节剂MeJa有效提高体胚诱导率、降低畸形率，进一步的提高杂交鹅掌楸体胚发生效率，具有很好的实用性，利于杂交鹅掌楸快繁体系的建立。
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