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公开(公告)号:CN103792372A
公开(公告)日:2014-05-14
申请号:CN201410058187.0
申请日:2014-02-20
CPC classification number: G01N33/6803 , G01N27/3276
Abstract: 本发明涉及一种基于双核酸标记的比率电化学免疫传感器。在金电极表面组装两端分别标记巯基与二茂铁的DNA3,与亚甲基蓝标记的互补DNA1-抗体1杂交,构成比率电化学免疫传感界面。目标蛋白质存在时,DNA2-抗体2、目标蛋白质与DNA1-抗体1形成夹心免疫复合物,产生邻位效应,使DNA2与DNA1杂交,导致DNA1-抗体1脱离传感界面、自由的DNA3在表面形成发夹结构。在该过程中,电化学活性的亚甲基蓝和二茂铁分别远离和靠近电极表面,其氧化电流分别减小和增加。通过检测这两个电流的比值,实现溶液中目标蛋白质的浓度测定。该传感器灵敏度高,检测浓度范围宽,实现了蛋白质的快速、一步化检测,具有临床应用价值。
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公开(公告)号:CN104165999B
公开(公告)日:2018-08-07
申请号:CN201410190726.6
申请日:2014-05-07
Abstract: 本发明涉及种基于邻位触击效应的均相化学发光免疫分析方法。该方法的检测溶液包括DNA1‑抗体1偶联物、DNA2‑抗体2偶联物、辅助DNA3、辅助DNA4、分子信标DNA5和限制性内切酶。目标蛋白质存在时,DNA1‑抗体1与DNA2‑抗体2形成夹心免疫复合物,使得分别与DNA1、DNA2杂交的DNA3、DNA4相互靠近,形成邻位触击复合物,与DNA5杂交打开其发卡结构,染料Cy5远离猝灭剂产生化学发光。复合物与DNA5形成的双链还能被内切酶识别,将DNA5剪切后打开新的DNA5,如此循环可在位放大发光,实现对目标蛋白质的高灵敏定量分析。该发明实现了蛋白质快速、步化检测,操作简单、普适性高。
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公开(公告)号:CN103575896B
公开(公告)日:2015-09-23
申请号:CN201210249219.6
申请日:2012-07-19
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器。利用丝网印刷技术,在硅烷化载玻片上构建4×12阵列,通过在阵列点上包被不同捕获抗体,构建可抛式多组分免疫传感阵列。通过在金纳米粒子表面同时固定生物素化的捕捉DNA和多重G-四链体序列重复的信号DNA,利用G-四链体信号DNA与血红素结合形成DNA酶,制备多层DNA酶功能化金纳米粒子探针。基于夹心免疫分析,在传感阵列上形成夹心免疫复合物,通过生物素-亲和素反应,多层DNA酶功能化的金纳米粒子探针标记至不同免疫复合物上。利用DNA酶的过氧化物酶特性,催化化学发光底物H2O2-鲁米诺间的反应,获得灵敏化学发光信号,实现多种蛋白质的高灵敏图像免疫分析。该免疫传感器具有设计简单、成本低、灵敏度高、通量高、重现性好等优点,具有一定的临床应用价值。
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公开(公告)号:CN101545902B
公开(公告)日:2014-01-08
申请号:CN200810024426.5
申请日:2008-03-24
IPC: G01N33/546 , G01N21/76
Abstract: 一种自动化进样分辨的化学发光多组分免疫检测系统及分析方法。该检测系统的温育体系由试管(1)、搅拌子(2)、磁珠(3)和恒温磁力搅拌器(11)组成;多通道进样体系由进样通道(4)、磁铁(12)和玻璃管(13)组成;溶液传输体系由蠕动泵(14)、连接管(10)、多功能注射阀(15)和多位阀(16)组成;信号采集体系由检测通道(9)、平面镜(17)和光电倍增管(18)组成;该方法是在功能化的磁珠表面固定多种捕获抗体,和待测物以及示踪抗体特异性地反应,形成夹心复合物;用磁铁收集并洗去过量的酶标抗体后通入化学发光底物液,再将其顺序注射进检测通道进行检测。该方法具有简便、快速、重现性好灵敏度高和成本低等特点,可应用于临床诊断、环境监测、食品安全等领域。
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公开(公告)号:CN100357727C
公开(公告)日:2007-12-26
申请号:CN200410041175.3
申请日:2004-07-05
IPC: G01N27/403 , G01N27/327 , G01N33/53
Abstract: 肿瘤标志物的芯片电化学免疫测定方法:(1)通过化学修饰将电子传递媒介体固定在环形碳电极内表面,将该媒介体修饰的环形电极的内腔直接作为微反应池。参比电极和对电极置于反应池上方,反应池底部固定的抗原分子功能化膜;(2)当溶液中只存在适量辣根过氧化酶标记肿瘤标志物抗体时,温育后酶标抗体与反应池底部固定的抗原分子功能化膜上的抗原分子发生免疫反应使其连接在反应池底部。(3)当待测抗原溶液中含有HRP标记抗体和时,游离的免疫结合物可接触到反应室内壁固定的电子媒介体,从而可以在工作电极上获得催化H2O2氧化的催化电流,该催化电流与溶液中待测抗原含量成正比。本发明公开了相配合的微体积免疫测定芯片。
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公开(公告)号:CN1323296C
公开(公告)日:2007-06-27
申请号:CN200410041176.8
申请日:2004-07-05
IPC: G01N33/552 , G01N33/52 , G01N21/76
Abstract: 硅烷交联壳聚糖膜基的流动注射化学发光免疫检测池:将该传感器与化学发光流动池结合,制备流动注射化学发光免疫检测池;化学发光流动池是由上层的塑料板、下层透明板和硅橡胶垫圈构成;在上层的塑料板开有二个通道,作为液体传输的进口和出口;在其内侧刻有一凹槽,用来嵌入免疫传感器;下层板为透光性较好玻璃或有机玻璃板,并直接放置在光电倍增管上方;中间采用硅橡胶垫圈形成反应池,免疫反应和发光检测均在此反应池中发生;免疫传感器的构造为在硅烷化载体表面制备壳聚糖膜,固定抗原分子,构造新型免疫传感器。本发明分析速度更快速,适用于临床在线快速检测;重现性好。
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公开(公告)号:CN1196932C
公开(公告)日:2005-04-13
申请号:CN03113053.4
申请日:2003-03-26
IPC: G01N27/26 , G01N33/53 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种无试剂安培免疫传感器的制备方法和在免疫分析中的应用,其制备步骤是将待测抗原溶解在缓冲溶液中,对载体表面进行预处理并在其表面滴涂上述溶液,悬于金属烷氧基化合物的液面上方,密闭此体系恒温水浴可获得免疫传感器。对待测抗原测定条件进行优化,然后进行一系列的处理可得到待测抗原的测定标准曲线,以及通过电化学信号的降低,在测定标准曲线上可查出相应浓度。此方法无需向待测样品溶液中加入媒介体或其它试剂,避免了媒介体等对电极的污染,简化了分析体系,分析反应也可一步完成,具有很好的精确性、重复复和稳定性。
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公开(公告)号:CN104165999A
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201410190726.6
申请日:2014-05-07
CPC classification number: C12Q1/6804 , C12Q2521/301 , C12Q2525/301 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及一种基于邻位触击效应的均相化学发光免疫分析方法。该方法的检测溶液包括DNA1-抗体1偶联物、DNA2-抗体2偶联物、辅助DNA3、辅助DNA4、分子信标DNA5和限制性内切酶。目标蛋白质存在时,DNA1-抗体1与DNA2-抗体2形成夹心免疫复合物,使得分别与DNA1、DNA2杂交的DNA3、DNA4相互靠近,形成邻位触击复合物,与DNA5杂交打开其发卡结构,染料Cy5远离猝灭剂产生化学发光。复合物与DNA5形成的双链还能被内切酶识别,将DNA5剪切后打开新的DNA5,如此循环可在位放大发光,实现对目标蛋白质的高灵敏定量分析。该发明实现了蛋白质快速、一步化检测,操作简单、普适性高。
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公开(公告)号:CN103575896A
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201210249219.6
申请日:2012-07-19
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/54346 , G01N21/763 , G01N33/6803
Abstract: 本发明涉及一种高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器。利用丝网印刷技术,在硅烷化载玻片上构建4×12阵列,通过在阵列点上包被不同捕获抗体,构建可抛式多组分免疫传感阵列。通过在金纳米粒子表面同时固定生物素化的捕捉DNA和多重G-四链体序列重复的信号DNA,利用G-四链体信号DNA与血红素结合形成DNA酶,制备多层DNA酶功能化金纳米粒子探针。基于夹心免疫分析,在传感阵列上形成夹心免疫复合物,通过生物素-亲和素反应,多层DNA酶功能化的金纳米粒子探针标记至不同免疫复合物上。利用DNA酶的过氧化物酶特性,催化化学发光底物H2O2-鲁米诺间的反应,获得灵敏化学发光信号,实现多种蛋白质的高灵敏图像免疫分析。该免疫传感器具有设计简单、成本低、灵敏度高、通量高、重现性好等优点,具有一定的临床应用价值。
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公开(公告)号:CN101545901A
公开(公告)日:2009-09-30
申请号:CN200810024425.0
申请日:2008-03-24
IPC: G01N33/546 , G01N21/76
Abstract: 一种微气泡加快免疫反应的化学发光免疫检测系统。该系统包括溶液传输系统、微气泡温育装置、免疫传感器、化学发光检测器和计算机。传输系统由蠕动泵(P1,P2)、微量注射泵(P3)、连接管和八通注射阀(V)组成;免疫传感器由充满抗体修饰的羧基活化树脂微珠的无色透明玻璃管制成,并置于化学发光检测器光窗上方。将待测样品和酶标抗体加入温育管后,通入氮气产生微气泡,加快免疫反应,减少预温育时间,并用微量注射泵将温育复合物注入免疫传感器,形成夹心免疫复合物。用蠕动泵(P1)通入冲洗液,洗净未结合的过量抗体后,由蠕动泵(P2)注入一体积的辣根过氧化物酶的化学发光底物,尔后蠕动泵(P1)通入载流将底物区带载入免疫传感器,产生化学发光信号,由信号强度检测样品浓度。检测完成后由蠕动泵(P1)通入再生液,可再生免疫传感器进行下一个分析流程。该检测系统成本低、快速、灵敏度高、重现性和精密度好,适合于环境监测、临床诊断、和食品安全等领域。
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