公开(公告)号：CN116444621A

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202310549596.X

申请日：2023-05-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张瑞福 ,  付严松 ,  缪有志 ,  张楠 ,  郑文君 ,  徐志辉 ,  邵佳慧

IPC: C07K7/08 ,  C07K1/16 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  A01N43/36 ,  A01P21/00

Abstract: 本发明公开了一种促进植物根系发育的小肽及其应用，该小肽的氨基酸序列为Glu‑Pro‑Asp‑Ser‑Glu‑Glu‑Glu‑Pro‑Lys‑Glu‑Pro‑Glu‑Ala‑IlE。该小肽是一种来自芽孢杆菌的新型植物根系发育促生肽RDPP。本申请从短小芽孢杆菌中分离并纯化出一种分子量大小为1598Da的植物根系发育促肽RDPP，摸索了RDPP发酵最适培养基，发酵条件及分离方法，鉴定出RDPP的氨基酸序列；通过对模式植物拟南芥生长发育的促生试验，验证了RDPP的活性。通过水培、盆栽和田间试验明确，RDPP对大豆、玉米和水稻等粮食作物，番茄等叶菜类作物具有广谱的促生长效果，显著提高农作物的产量。

公开(公告)号：CN114958672A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210628964.5

申请日：2022-06-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张瑞福 ,  杨明珠 ,  缪有志 ,  张楠 ,  沈其荣 ,  邵佳慧 ,  李森

IPC: C12N1/20 ,  C12N11/12 ,  C05F17/20 ,  C12R1/38 ,  C12R1/06

Abstract: 本发明提供了一种低温堆肥快速起爆复合微生物菌剂及其制备方法和应用，该复合微生物菌剂中包含边缘假单胞菌MP‑1、硬结节杆菌AS‑3和水稻节杆菌AO‑4三株适冷型细菌。本发明制备的低温堆肥复合发酵菌剂可促进冬季低温堆肥快速起爆，解决冬季低温环境下堆肥启动困难，农业固体废弃物大量堆积所造成的环境污染问题。在3～11℃的环境建立堆肥试验，接种IM复合菌剂的堆体升温快，在堆肥第2d达到高温期57.3℃，0～5d平均升温速度为14.4℃/d，堆肥第35d时接菌处理的GI值已经达到93.4％。

公开(公告)号：CN109666690B

公开(公告)日：2020-05-26

申请号：CN201910045672.7

申请日：2018-02-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  缪有志 ,  黄启为 ,  梅慧玲 ,  夏燕维

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/90 ,  C12N15/60 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明涉及一种无痕迹木霉真菌基因过表达方法。首先，通过两次同源重组事件并结合潮霉素B抗性筛选策略和5‑FOA致死策略获得贵州木霉ura3基因无痕敲除突变体。基于该突变体，通过同源重组方式将包含ura3基因表达框的敲除片段插入目的基因位置，并利用ura3无痕突变体的营养缺陷特征筛选出发生第一次同源重组的突变体。第二次同源重组发生后，ura3基因和目的基因均被重组去除，此时利用5‑FOA的致死特性进行反向筛选，得到目的基因被完全删除的无痕突变体。该系统得到足够优化，同源重组比例在15％以上，单基因无痕操作周期缩短在15天以内，同时还能够实现目的基因的无痕过表达，过程中不引入任何外源片段。

公开(公告)号：CN108384797B

公开(公告)日：2019-02-26

申请号：CN201810130104.2

申请日：2018-02-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  缪有志 ,  黄启为 ,  梅慧玲 ,  夏燕维

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90 ,  C12N1/15 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明涉及一种无痕迹木霉真菌基因编辑方法。首先，通过两次同源重组事件并结合潮霉素B抗性筛选策略和5‑FOA致死策略获得贵州木霉ura3基因无痕敲除突变体。基于该突变体，通过同源重组方式将包含ura3基因表达框的敲除片段插入目的基因位置，并利用ura3无痕突变体的营养缺陷特征筛选出发生第一次同源重组的突变体。第二次同源重组发生后，ura3基因和目的基因均被重组去除，此时利用5‑FOA的致死特性进行反向筛选，得到目的基因被完全删除的无痕突变体。该系统得到足够优化，同源重组比例在15％以上，单基因无痕操作周期缩短在15天以内，同时还能够实现目的基因的无痕过表达，过程中不引入任何外源片段。

公开(公告)号：CN108410903B

公开(公告)日：2019-02-15

申请号：CN201810128686.0

申请日：2018-02-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  缪有志 ,  黄启为

IPC: C12N15/81 ,  C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/02 ,  C12P19/00

Abstract: 本发明公开了耐低pH值的内切木聚糖水解酶基因、含有该基因的工程菌及其应用。内切木聚糖水解酶基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。其所编码的内切木聚糖水解酶蛋白质氨基酸序列为SEQ ID NO.2。将该内切木聚糖水解酶基因构建重组质粒并导入Pichia pastoris X33即获得含有该基因的基因工程菌P.pastoris X33‑x10c。该耐低pH值的内切木聚糖水解酶能够高效降解作物秸秆中大量存在的木聚糖，在pH值2.0条件下能够稳定存在，能够满足微生物有机肥生产工艺中对耐低pH值秸秆降解酶的特殊需求；同时，其耐低pH值的特性能够有效避免动物胃酸对功能酶的失活作用，适合应用于动物饲料行业。

公开(公告)号：CN108586589A

公开(公告)日：2018-09-28

申请号：CN201810041390.5

申请日：2018-01-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  孟晓慧 ,  刘东阳 ,  缪有志 ,  冉炜

IPC: C07K14/37 ,  C07K1/113 ,  C07K1/22 ,  C12N15/70 ,  C05G3/00 ,  A01N63/04 ,  A01P21/00

Abstract: 本发明公开了一种来自贵州木霉的Swollenin蛋白的制备方法及其应用。该Swollenin蛋白可以在大肠杆菌中高效表达，利用Ni柱亲和层析后获得电泳纯目的蛋白。本发明提供的Swollenin蛋白，可以显著地提高木霉在黄瓜根际的定殖能力，解决目前木霉肥料大田施用中木霉根际定殖效果差的问题，并可通过大肠杆菌发酵方式进一步提高其产量，从而为实现大规模工业化应用提供理论基础。