公开(公告)号：CN105886519B

公开(公告)日：2019-06-14

申请号：CN201610368731.0

申请日：2016-05-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  冀凯 ,  黄彦

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/44 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04 ,  A23L29/30 ,  A23K20/189 ,  A23K10/14 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明属于应用工业微生物领域，公开了一种异淀粉酶及其基因、含有该基因的工程菌及其应用。本发明提供了淀粉水解酶系中关键酶之一的异淀粉酶基因，该基因全长为2436bp，G+C含量为66％，编码811个氨基酸，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1所编码的内切酶蛋白质氨基酸序列为：SEQ ID NO.2。利用该基因构建的工程菌株能高效表达异淀粉酶，该酶以土豆淀粉为测活底物，通过碘液检测异淀粉酶的活性，其比活力高达70600U/mg。利用基因生产的酶制剂可用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织工业和医药等工业，在解决实际问题的同时还可以取得可观的经济效益。

公开(公告)号：CN103103206B

公开(公告)日：2014-11-12

申请号：CN201310043628.5

申请日：2013-02-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  黄彦

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/26 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P19/20 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12P19/14 ,  C12N9/2417 ,  C12Y302/01001

Abstract: 本发明属于应用工业微生物领域，公开了一种α-淀粉酶及其基因、含有该基因的工程菌及其应用。本发明提供了淀粉水解酶系中关键酶之一的α-1,4淀粉糖内切酶基因，该基因全长为1569bp，G+C含量为67％，编码522个氨基酸，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1所编码的内切酶蛋白质氨基酸序列为：SEQ ID NO.2。利用该基因构建的工程菌株能高效表达α-1,4淀粉糖内切酶，该酶在以可溶性淀粉为底物时比活力高达10013u/mg。利用基因生产的酶制剂可用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织工业和医药等工业，在解决实际问题的同时还可以取得可观的经济效益。

公开(公告)号：CN117844696A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202410010781.6

申请日：2024-01-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  张蕾 ,  陈雪 ,  黄彦 ,  叶现丰

IPC: C12N1/20 ,  C05G3/60 ,  C08J11/10 ,  C08L75/04 ,  A01N63/20 ,  A01P1/00 ,  A01P3/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株孢囊杆菌及其应用。一株可降解聚氨酯塑料和捕食病原菌的黏细菌孢囊杆菌CC21，其保藏号为GDMCC No：62206。本发明所述的孢囊杆菌CC21能够降解Impranil DLN和PBA‑PU出现透明圈，并在液体条件下培养14天对聚氨酯泡沫的减重率达到31％，在固体条件下培养30天对聚氨酯泡沫的减重率达到69.7％，泡沫塑料经菌株降解后体积明显减少，塑料结构被分解。本发明为聚氨酯类废弃塑料的生物降解以及植物病害控制提供了重要的生物资源，可应用植物病害生物防控和废弃物资源化利用。

公开(公告)号：CN114634942B

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202210125774.1

申请日：2022-02-10

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  李旭 ,  钟玲丽

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N15/81 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12P19/14 ,  C12P19/00 ,  A23L29/00 ,  A23K10/14 ,  A21D8/04 ,  A21D15/00 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种具有耐冷特性的新型木聚糖酶及其编码基因和应用。本发明提供了属于糖苷水解酶第8家族的新型木聚糖酶基因，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1，所编码的木聚糖酶蛋白质氨基酸序列为：SEQ ID NO.2。利用该基因构建的工程菌株获得的重组木聚糖酶以玉米芯木聚糖为底物，通过DNS还原糖活性测定的方法测定其比活力为5546.9U/mg。该木聚糖酶能够在低温条件表现出较高的底物亲和力和催化效率，低温下比活力为1521.1U/mg。利用基因生产的木聚糖酶可用于木聚糖转化和木聚寡糖的制备以及食品烘焙中提高面包的品质和延长面包的货架期。

公开(公告)号：CN115896140A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211656418.9

申请日：2022-12-22

Applicant: 湖北省农业科学院粮食作物研究所 ,  华中农业大学 ,  南京农业大学

Inventor： 李昌焱 ,  申恩龙 ,  林拥军 ,  游艾青 ,  崔中利 ,  李周坤

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  A01H6/46 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，特别涉及一种β‑1，6‑葡聚糖酶基因及检测引物、应用。本发明提供了一种β‑1，6‑葡聚糖酶基因，所述β‑1，6‑葡聚糖酶基因包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；或，在严格条件下可以与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列进行杂交的核苷酸序列。所述β‑1，6‑葡聚糖酶基因经密码子优化，能导入水稻受体，在水稻中实现高表达，进而提高水稻对真菌性病害的抗性。

公开(公告)号：CN115044512A

公开(公告)日：2022-09-13

申请号：CN202210755118.X

申请日：2022-06-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  张蕾 ,  叶现丰

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/20 ,  A01P1/00 ,  A01P3/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株捕食性原囊菌及其在植物病害生物防治中的应用。一株拮抗植物病原菌的粘细菌AC19,其保藏号为GDMCC No：62205。本发明所述的原囊菌AC19通过捕食的方式抑制软腐果胶杆菌，青枯雷尔氏菌，黑胫病原菌，解淀粉欧文氏菌，丁香假单胞菌，水稻黄单胞杆菌以及稻瘟病菌，尖孢镰刀菌，禾谷镰刀菌，立枯丝核菌，大丽轮枝菌和大豆疫霉菌等多种植物病原菌的生长，且能够分泌细胞壁裂解酶类分解真菌和疫霉菌细胞壁，显示出粘细菌AC19广谱的抗病原菌能力。盆栽实验显示粘细菌AC19能够有效的抑制黄瓜枯萎病菌和大豆疫霉对黄瓜和大豆的侵染，降低枯萎病和根腐病的发病率，可用于植物病原菌所引起的植物病害的生物防治。

公开(公告)号：CN114317565A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202111177948.0

申请日：2021-10-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  叶现丰 ,  刘威 ,  黄彦 ,  李周坤

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种粘细菌来源的淀粉分支酶及其基因，含有该基因的工程菌及其应用。本发明提供了的淀粉分支酶基因，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1，所编码的蛋白质氨基酸序列为：SEQ ID NO.2。利用该基因构建的工程菌株获得的重组淀粉分支酶以木薯淀粉为测活底物，在最适反应条件下，通过碘液检测其比活力为19439.9±62.4U/mg。利用基因生产的淀粉分支酶可用于淀粉改性，包括慢消化淀粉或抗性淀粉的制备、具有抗老化特性的高分支度改性淀粉的制备以及冷水可溶性淀粉的制备等。所制备的改性淀粉可广泛的应用于食品、酿造、发酵、纺织工业和医药等工业，在解决实际问题的同时还可以取得可观的经济效益。

公开(公告)号：CN109912700A

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201910220003.9

申请日：2019-03-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  乔燕 ,  叶现丰 ,  李周坤 ,  曹慧

IPC: C07K14/395 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34 ,  C08B37/02 ,  C12N1/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开一种利用β-1,6葡聚糖酶联产酵母葡聚糖、甘露糖蛋白和酵母提取物的方法，该方法以酵母细胞为原料，通过对酵母细胞进行高温灭活处理，离心，干燥上清得到酵母提取物；利用β-1,6葡聚糖酶酶解酵母细胞壁，离心，离心分别得到的酶解液上清和酶解沉淀，酶解液上清经水提醇沉、离心分离、干燥得到甘露糖蛋白；乙醇经回收后，剩余液体部分经浓缩、喷雾干燥得到酵母提取物；酶解沉淀经脱脂、蛋白酶处理、喷雾干燥得到酵母葡聚糖。本发明制备的酵母葡聚糖和甘露糖蛋白纯度高、得率高，且制备过程成本低，不使用强酸、强碱试剂，对环境污染小。

公开(公告)号：CN108559718A

公开(公告)日：2018-09-21

申请号：CN201711363218.3

申请日：2017-12-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  王婷 ,  罗雪 ,  黄彦

IPC: C12N1/20 ,  C12P1/04 ,  A01N63/00 ,  A01N63/02 ,  A01P1/00 ,  C05G3/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株捕食植物病原细菌的叶柄粘球菌及其在细菌性病害生物防治中的应用。一株拮抗植物病原细菌的粘细菌BS,保藏号为CCTCCNO.M2017496。本发明所述的叶柄粘球菌BS通过捕食的方式抑制白菜软腐病菌、马蹄莲软腐病菌、番茄青枯病菌、马铃薯黑胫病菌以及梨火疫病菌等多种植物病原细菌的生长，显示出粘细菌BS广谱的抗病原细菌能力。盆栽实验显示粘细菌BS能够有效的抑制胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)对土豆和马蹄莲的侵染，降低软腐病的发病率，可用于植物病原细菌所引起的植物病害的生物防治。

公开(公告)号：CN118006646A

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202410149084.9

申请日：2024-02-02

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 崔中利 ,  李周坤 ,  江志通 ,  陈雪

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/18 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  B09B3/60 ,  C12R1/19 ,  C12R1/84 ,  B09B101/75 ,  B09B101/78

Abstract: 本发明公开了一种可降解聚酯塑料的角质酶及其应用。本发明提供了可降解聚氨酯塑料的角质酶编码基因，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1，所编码的角质酶蛋白质氨基酸序列为：SEQ ID NO.2。该角质酶能够破坏塑料完整结构，塑料表面出现孔洞和裂缝等侵蚀状。此外，该角质酶能够降解不同类型的聚酯类塑料，其中PUR泡沫和聚酯塑料PCL在2天内减重率分别达到33.88％和83.44％，农用可降解地膜PBAT和PU塑料合成寡聚物PBA‑PU在4天内的降解率分别达到66.70％和64.41％。利用该角质酶编码基因作为元件可广泛应用于废弃聚酯类塑料降解与资源化利用。