公开(公告)号：CN1108096C

公开(公告)日：2003-05-14

申请号：CN99114127.X

申请日：1999-03-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 侯喜林 ,  曹寿椿 ,  佘建明 ,  蔡小宁 ,  陆维忠

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明属于植物原生质体培养及植株再生方法，专用于不结球白菜原生质体培养再生植株。所提供的不结球白菜原生质体培养及植株再生方法具体步骤如下：取5天苗龄的不结球白菜萝卜细胞质雄性不育材料下胚轴或14～18天苗龄子叶，在1.0～2.0%(M/V)纤维素酶+0.1～1.0%(M/V)果胶酶+10mMCaCl2·2H2O+0.7mMKH2PO4+0.5M甘露醇的酶液中游离25～60hr，500rpm下离心收集原生质体；原生质体在KM8P1+2，4-D0.5mg/L+6-BA0.25mg/L+NAA0.5～1.0mg/L的培养基上，培养3周形成愈伤组织；经MS+2，4-D1.0mg/L增殖愈伤组织；在培养基为MS+6-BA10.0mg/L+NAA0.3mg/L上芽分化。将上述分化芽在MS培养基上生根，2周后即可获得完整的再生植株。使用该方法，植株再生率为1.8%。

公开(公告)号：CN1231115A

公开(公告)日：1999-10-13

申请号：CN99114126.1

申请日：1999-03-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 侯喜林 ,  曹寿椿 ,  何玉科

IPC: A01H1/04 ,  A01G1/00

Abstract: 本发明属于一种不结球白菜胞质雄性不育新种质的鉴定方法,包括:田间鉴定、细胞染色体鉴定、酯酶、过氧化物同工酶电泳分析、分子生物学鉴定。本发明对融合再生植株后代进行了花器形态学、雄性不育性及结实率鉴定,细胞染色体鉴定,同工酶分析和分子生物学鉴定,结果准确可靠。鉴定的98H秋－45为新种质,其不育率、不育度均为100%,低温下苗期叶片不黄化,结实率与保持系相同,极显著高于原不育材料;经PCR扩增cpDNA和mtDNA的电泳证实为体细胞杂种。