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公开(公告)号:CN105063187A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510450026.0
申请日:2015-07-28
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种基于环介导恒温扩增技术快速检测灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的方法及引物组合物。用于检测灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的引物组合物,由SEQ ID NO.2所示的正向内引物FIP、SEQ ID NO.3所示的反向内引物BIP、SEQ ID NO.4所示的正向外引物F3、SEQ ID NO.5所示的反向外引物B3和SEQ ID NO.6所示的环引物LF组成。本发明的检测方法简便易行、实用性好、灵敏度高、特异性强、准确性高、实现了恒温扩增,为灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的检测提供了新的技术平台,能够对灰葡萄孢菌的SDHI类杀菌剂抗性群体进行监测,及时了解抗性群体发展动态。本发明对作物灰霉病的抗药性治理和科学指导用药,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN103131780A
公开(公告)日:2013-06-05
申请号:CN201310060384.1
申请日:2013-02-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定核盘菌的分子检测方法,可用于引起菌核病的核盘菌的早期预警和流行监测。该方法利用所述的两对引物在63℃进行恒温扩增,观察扩增产物其颜色变化,进行是否是核盘菌菌株的鉴定;如果扩增颜色显示天蓝色(有产物扩增)为核盘菌菌株,如果显示紫色(无产物扩增)为非核盘菌菌株。本发明实现了恒温扩增,不需要昂贵的仪器设备、繁琐的电泳过程,使检测时间和成本大大降低。与普通PCR相比,本发明还具有灵敏度高、特异性强、检测准确性高等特点。
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公开(公告)号:CN105063187B
公开(公告)日:2017-12-05
申请号:CN201510450026.0
申请日:2015-07-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于环介导恒温扩增技术快速检测灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的方法及引物组合物。用于检测灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的引物组合物,由SEQ ID NO.2所示的正向内引物FIP、SEQ ID NO.3所示的反向内引物BIP、SEQ ID NO.4所示的正向外引物F3、SEQ ID NO.5所示的反向外引物B3和SEQ ID NO.6所示的环引物LF组成。本发明的检测方法简便易行、实用性好、灵敏度高、特异性强、准确性高、实现了恒温扩增,为灰葡萄孢菌对SDHI类杀菌剂抗性的检测提供了新的技术平台,能够对灰葡萄孢菌的SDHI类杀菌剂抗性群体进行监测,及时了解抗性群体发展动态。本发明对作物灰霉病的抗药性治理和科学指导用药,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN103820563B
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201410089651.2
申请日:2014-03-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速检测多菌灵高抗核盘菌菌株的方法,可用于田间核盘菌对多菌灵抗性群体的动态监测及流行预警。本发明是以环介导恒温扩增技术(LAMP)为基础建立起来的一种快速检测核盘菌对多菌灵高抗菌株的分子技术。该检测方法通过在多菌灵高抗核盘菌菌株的β-微管蛋白上(包括198位氨基酸突变位点)设计2对LAMP特异性引物,进行LAMP扩增;根据反应产物颜色判定是否为多菌灵高抗核盘菌菌株;如果颜色为天蓝色(有扩增产物)为多菌灵高抗核盘菌菌株;如果颜色为紫色(无扩增产物)则为多菌灵敏感核盘菌菌株。本发明简便、快速、成本低,对菌核病抗性监测及合理用药具有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN104293971A
公开(公告)日:2015-01-21
申请号:CN201410619316.9
申请日:2014-11-04
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种对多菌灵高抗灰葡萄孢菌株的快速检测方法,可用于引起作物灰霉病的灰葡萄孢菌对多菌灵的抗性群体的动态监测及流行预警。本发明是以环介导恒温扩增技术(LAMP)为基础建立起来的一种快速、便捷、特异性强、灵敏度高和成本低廉的分子检测技术。该检测方法通过在灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株的β微管蛋白上设计2对特异性引物,进行LAMP扩增,根据反应产物颜色判定是否为灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株。LAMP扩增产物显示为天蓝色,电泳图谱呈梯状条带,有产物扩增,鉴定为灰葡萄孢菌对多菌灵的高抗菌株;LAMP扩增产物显示为紫色,电泳图谱无条带,无产物扩增,鉴定为灰葡萄孢菌对多菌灵的非高抗菌株。本发明简便、快速、成本低,对作物灰霉病的抗性风险评估及合理用药具有重要的现实意义。
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公开(公告)号:CN103276057B
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201310112983.3
申请日:2013-04-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速检测灰葡萄孢的方法,可用于灰霉病的快速诊断及病原的发展动态监测,对灰霉病流行的早期预警及合理用药指导具有重要的现实意义。本发明是以环介导恒温扩增技术(LAMP)为基础建立起来的一种快速简便的灰葡萄孢分子检测技术。该检测方法共分3个主要步骤,(1)分别提取待测样品的基因组DNA;(2)进行LAMP反应;(3)根据反应产物颜色判定是否为灰葡萄孢;如果颜色为天蓝色(有扩增产物)为灰葡萄孢;如果颜色为紫色(无扩增产物)则不是灰葡萄孢。本发明为科学研究和生产实践提供了一种简便、快速、成本低廉的灰葡萄孢检测技术,对增加生态、社会和经济效益都具有现实而深远的意义。
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公开(公告)号:CN103276057A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310112983.3
申请日:2013-04-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速检测灰葡萄孢的方法,可用于灰霉病的快速诊断及病原的发展动态监测,对灰霉病流行的早期预警及合理用药指导具有重要的现实意义。本发明是以环介导恒温扩增技术(LAMP)为基础建立起来的一种快速简便的灰葡萄孢分子检测技术。该检测方法共分3个主要步骤,(1)分别提取待测样品的基因组DNA;(2)进行LAMP反应;(3)根据反应产物颜色判定是否为灰葡萄孢;如果颜色为天蓝色(有扩增产物)为灰葡萄孢;如果颜色为紫色(无扩增产物)则不是灰葡萄孢。本发明为科学研究和生产实践提供了一种简便、快速、成本低廉的灰葡萄孢检测技术,对增加生态、社会和经济效益都具有现实而深远的意义。
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