公开(公告)号：CN101724690A

公开(公告)日：2010-06-09

申请号：CN200910042287.3

申请日：2009-08-31

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  高利海 ,  张星 ,  朱雅楠 ,  罗剑飞

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种对虾养殖水体菌群多态性检测的方法，该方法包括以下步骤：(1)虾养殖水体样品中混合微生物总基因组DNA的提取；(2)设计特异性T-RFLP-PCR通用引物，PCR循环反应；(3)产物纯化，用特异限制性内切酶HaeIII酶切DNA；(4)1％琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段，荧光扫描；(5)微生物菌群多态性结构分析；(6)菌群优势菌荧光原位杂交技术定量检测。本发明改进T-RFLP-PCR结合FISH检测技术，并且用荧光标记特异性引物，与现代技术相比有重复性高、灵敏、快速、准确、稳定等特点，可以定性和定量分析虾养殖水体随着时间变化微生物生态多样性以及优势菌群组成结构的动态变化。

公开(公告)号：CN101186888B

公开(公告)日：2010-05-19

申请号：CN200710032494.1

申请日：2007-12-14

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  任杰

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种提高硝化菌氧化亚硝酸盐速率的培养基。该培养基组成为：每1000mL水中含有甘油2.1-3.1g、酵母抽提物1.3-1.9g、碳酸氢钠1.0-2.0g、亚硝酸钠1.9-3.2g、碳酸钠0.1-0.8g、氯化钠0.1-0.5g、磷酸二氢钾0.1-0.5g、硫酸镁0.1-0.5g和硫酸亚铁0.005-0.05g。其中，甘油和酵母抽提物在发酵后期补加更好。该培养基使硝化菌的生长代谢速度显著加快；对亚硝酸盐的降解速率显著提高，平均降解速率比常规培养基提高40％-127％，达到900-1320mgNO2-N/gMLSS·d。小水体和真实水体试验证明，本发明培养出的菌体可持续高效降解污染水体中的亚硝酸盐。

公开(公告)号：CN101508491A

公开(公告)日：2009-08-19

申请号：CN200910037692.6

申请日：2009-03-09

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  梁锏文 ,  罗剑飞 ,  袁慧明

IPC: C02F3/34 ,  C12N1/00

Abstract: 本发明公开了一种去除淡水中水华蓝藻的方法，适用于去除小型水库、养殖水体等水面面积小于5000m2的淡水水华蓝藻的去除。该方法将溶藻微生态制剂以体积比5％～10％接种至种子培养基，在温度为25～30℃培养3～5d，进行活化，再取种子液，按体积比5％～10％的接种量接种至发酵培养基进行放大发酵培养5～7d；采取新鲜麦秆并风干3～5d；将麦秆剪切成10～20cm长度的短秆；将溶藻微生态制剂和麦秆以质量比1∶1～1∶5充分混匀，形成混合物；将混和物按每平方米水域用量为0.2～1.0kg均匀投放水中。该方法不仅能在短期内去除养殖水体的蓝藻，而且在相对较长时间内，30～60天可防止上述蓝藻水华的再次爆发。

公开(公告)号：CN101348836A

公开(公告)日：2009-01-21

申请号：CN200810198303.3

申请日：2008-08-31

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  朱雅楠 ,  张星 ,  王周

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/06 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种硝化细菌16SrDNA的荧光原位杂交检测方法，该方法先对玻片进行处理，然后对样品采集及预处理，再进行杂交，最后在荧光显微镜观察，计数硝化细菌菌体个数。其杂交是将NIT3探针用HEX标记，将CNIT3探针与标记荧光的NIT3探针与杂交液混合于载玻片上在杂交盒内进行杂交反应，杂交温度控制在46℃－48℃，杂交时间为2－3h，杂交后用洗脱液清洗探针。该发明可直接应用于硝化系统中硝化细菌的数量分布和空间分布的检测，直接指导了自然界以及人工条件下硝化细菌群落多样性的测定；大大提高了硝化细菌群落分布监测的精确度和时效性，本发明尤其适用于硝化细菌的荧光原位杂交。

公开(公告)号：CN101348300A

公开(公告)日：2009-01-21

申请号：CN200810198304.8

申请日：2008-08-31

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  李兵 ,  梁锏文 ,  昝继清

IPC: C02F3/02 ,  C02F3/34

CPC classification number: Y02W10/15

Abstract: 本发明公开了一种好氧反硝化去除养殖水体亚硝氮的方法，该方法是将芽孢杆菌菌液投洒到养殖水体中，芽孢杆菌菌液浓度为108～1010个细菌/毫升，每亩投洒的量应不少于10kg，养殖水体溶氧能力为2～10mg/L，温度为13～42℃，pH为5.0～9.0。本方法以在好氧条件下仍具有高效反硝化能力的芽孢杆菌为出发菌株，每亩养殖水体只需投洒10kg该菌剂经过5天亚硝氮去除率即达到92.7％。亚硝氮被去除后的终产物为N2，不会生成对环境有污染的N2O气体。同时操作简便，用少量即可达到理想目的，成本低；并且该芽孢杆菌制剂也可以促进养殖生物体的生长，具有双重功效，值得水产养殖上推广使用。

公开(公告)号：CN118028180B

公开(公告)日：2024-08-16

申请号：CN202410433185.9

申请日：2024-04-11

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  李极寒 ,  罗剑飞 ,  戴晨明

IPC: C12N1/20 ,  C12P3/00 ,  C02F3/34 ,  C12R1/01 ,  C02F101/10

Abstract: 本发明公开了一株具有氢氧化活性的化能自养硫单胞菌及其应用。该菌株的名称为硫单胞菌（Thiomonas sp.）DCM‑2，保藏号为GDMCC No：64137，于2023年2月29日保藏于位于中国广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所的广东省微生物菌种保藏中心。该菌株能在常温条件下进行H2氧化，在5%氧气浓度下氢氧化速率最快，在H2存在时菌株硫氧化活性提升，可用于含还原性硫化物废水或土壤的处理。

公开(公告)号：CN118389717A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410561493.X

申请日：2024-05-08

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  朱越越 ,  罗剑飞

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6876 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种扩增完全氨氧化菌Comammox氨单加氧酶基因的引物及其应用。该引物能同时扩增CladeA、CladeB两个分支的氨单加氧酶A亚基基因。本发明提供的引物扩增的特异性好、准确性高、扩增片段长度合适，为完全氨氧化菌的定性和定量检测以及扩增子的高通量测序分析提供了一种准确、便捷、可靠的方法。

公开(公告)号：CN113736703B

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202111071843.7

申请日：2021-09-14

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 罗剑飞 ,  林炜铁 ,  刘步蟾

IPC: C12N1/20 ,  C12N1/02 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种培养基及其在分离纯化培养氨氧化细菌中的应用，该培养基含有磷酸二氢钾0.1～0.2g/L，硫酸镁0.01～0.05g/L，碳酸钙4～5g/L，碳酸氢钠0.2～0.4g/L，氯化铵0.25～0.55g/L；培养基中钠离子浓度不高于136.23mg/L，钾离子不高于57.35mg/L，镁离子不高于4.93mg/L。本发明提供的培养基成分简单、无机盐浓度低，降低了成本，同时避免了Na、K、Mg金属离子对氨氧化细菌的抑制作用，从而显著缩短氨氧化细菌分离过程中的培养周期和使氨氧化细菌菌落形态更大，向胞外释放大量H+溶解碳酸钙产生透明圈指示菌落位置，解决了固体平板上氨氧化细菌形态微小不易识别的问题。

公开(公告)号：CN109652568A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201811591712.X

申请日：2018-12-25

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 林炜铁 ,  罗剑飞 ,  刘亮霆

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/06 ,  C12N1/20 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开一种从环境中快速富集Nitrosocosmicus属氨氧化古菌的方法。该方法包括定向富集和快速纯化两个步骤。采用石英砂作为氨氧化古菌的附着基质，并且以石英砂作为传代的种子，大大减少了在传代过程中氨氧化古菌的损失，可将大部分培养的氨氧化古菌转移到新鲜的培养基中，明显缩短了培养的周期。联用穿透生物膜能力较强的阿奇霉素与环丙沙星，快速抑制和杀灭生物膜中存在的共生细菌，在一个培养周期内使氨氧化古菌的丰度达到90％以上。本方法可在几个月内获得高纯度的氨氧化古菌富集物，明显缩短了氨氧化古菌富集培养所需的时间和培养难度，为氨氧化古菌的研究与应用奠定了基础。

公开(公告)号：CN109652317A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201910098690.1

申请日：2019-01-31

Applicant: 华南理工大学 ,  广州海金农水产养殖有限公司

Inventor： 罗剑飞 ,  林炜铁 ,  胡骏 ,  陈伟峰

IPC: C12N1/12 ,  C12N1/04 ,  C12R1/89

Abstract: 本发明公开一种琼脂包埋长期室温大量保存活性微藻的方法，属于微藻技术领域。使用本发明的方法保存四个月后，微藻存活率仍高达80％以上。具有如下优点：成本低廉，避免了传统低温保存消耗的大量电费，所用的材料均低价；操作简单，培养好的微藻细胞收集后用琼脂包埋即可，无需复杂的预处理或其它保护措施；运输方便，运输过程中无需特殊的运输设备，包埋后为固体状态也方便运输过程中的各种操作；应用容易，浓缩后的藻细胞浓度高，应用时将琼脂搅碎即可直接投入使用，或作为藻种，搅碎后用营养液激活后使用。因此，本发明方法大大提高了微藻在水产养殖、废水治理、功能食品开发等领域的实用性，具有工业化生产及推广的价值。