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公开(公告)号：CN104131092A
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201410349635.2
申请日：2014-07-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6858 , C12Q1/6848 , C12Q2537/143 , C12Q2549/119 , C12Q2527/107 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体公开一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本发明针对目前SNP鉴定的局限性，将多重PCR、巢式PCR、等位特异性PCR相结合，提出基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本方法利用多重PCR实现2~4个基因片段扩增，提高实验效率，降低实验成本；利用巢式PCR提高扩增片段特异性，获得高质量、浓度均一的DNA模板，提高HRM技术稳定性；利用等位特异性PCR，实现SNP位点判别，避免荧光标记的设定或繁琐的电泳及酶切操作；通过上述方法的综合运用，实现多个SNP的批量鉴定、降低实验成本。
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公开(公告)号：CN103436524A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310238655.8
申请日：2013-06-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了一种批量提取水稻胚乳DNA的方法。该方法包括如下步骤：S1.从水稻种子中切取胚乳；S2.将胚乳投入PCR板（T1板）孔中；S3.T1板每孔加入碱液，放入PCR仪中进行加热；S4.取出T1板，每孔投入钨合金珠及1×DNA抽提液；S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热；S6.取出T1板，振动；S7.将T1板放入离心机进行离心；S8.取出T1板，将上清液转移至另一PCR板（T3板）中，T3板每孔中预先加入双蒸水；S9.将T3板置于冰箱中保存。该方法快速、操作简单，可实现水稻胚乳DNA的批量提取。
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公开(公告)号：CN112359134B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202011457155.X
申请日：2020-12-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高水稻单倍体诱导效率的分子标记引物及其应用，属于生物技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9定向编辑水稻Os03g0393900基因第3外显子特定序列，获得该序列缺失若干碱基的突变体，该突变体自交或杂交后代产生较高频率单倍体，针对突变序列开发出功能性分子标记引物并应用于水稻单倍体诱导性状的改良。与传统花药培养获得单倍体相比，本发明在产生单倍体时，不受籼粳花药培养力基因型的影响，操作过程更为简便，提高了单倍体产生效率。
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公开(公告)号：CN112553244A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011457190.1
申请日：2020-12-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于花粉管通道导入的水稻基因定向编辑方法，属于生物技术领域。本发明利用花粉管通道将CRISPR/Cas9载体导入水稻胚囊，实现tms5目的基因的定向编辑。本发明建立的基于花粉管通道的基因定向编辑方法不依赖愈伤组织的遗传转化，并能获得目的基因突变，操作过程简单及可靠。
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公开(公告)号：CN111118005A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201911366075.0
申请日：2019-12-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种与稻瘟病抗性相关的miRNA、相应的前体与应用，属于植物基因工程技术领域。本发明miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明发明人鉴定并证实了miRNA-T21可以通过抑制OsCYS1及OsPAO4的表达以调控半胱氨酸的合成和H2O2的积累，从而负调控稻瘟病抗性。结合利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除miRNA-T21，可以显著提高水稻对稻瘟病的抗性，具有较好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110839522A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911307940.4
申请日：2019-12-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种控制水稻生长发育的方法，属于生物技术领域。该方法的具体步骤如下：(1)浸种催芽；(2)发芽至1-2cm的种子移植至液体营养液中种植，种植密度为1-2株/20cm2；(3)种植的光照条件：光照强度为15000-20000LUX，光照16h+黑暗8h持续处理20d，处理后转入光照10h+黑暗14h进行培养，直到成熟；(4)种植的温度及湿度条件：温度30-31℃，湿度50-60％。通过上述步骤的处理，该方法可以缩短水稻生育期约10％，表明该方法可以通过控制光照加速水稻繁育，在加快水稻新品种选育进程及分子育种效率上具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN107858354B
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201711155567.6
申请日：2017-11-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟病抗性相关的miRNA，具有如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列。该miRNA的表达量与调控水稻抗稻瘟病基因Pik2‑H4的表达量呈负相关，能够通过抑制该miRNA的表达构建抗稻瘟病的水稻高抗新品种。
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公开(公告)号：CN110343781A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201910718870.5
申请日：2019-08-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6848
Abstract: 本发明公开了一种水稻Wx基因突变的鉴定方法，包括：提取待测水稻植株基因组构建DNA混合池，同时提取对照水稻植株的基因组DNA；针对Wx基因设计4对巢式PCR引物；以待测水稻植株基因组构建的DNA混合池和对照水稻植株的基因组DNA为模板分别进行巢式PCR；对PCR产物进行HRM分析，确定疑似突变混合池；分别提取疑似突变混合池对应的单株DNA，将单株DNA与对照植株DNA混合进行巢式PCR，扩增产物进行HRM分析获得疑似突变单株，以其DNA为模板进行PCR并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明将TILLING技术与HRM检测手段相结合应用于水稻Wx基因的突变筛选，为水稻诱变后代高效定向筛选提供了新思路。
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公开(公告)号：CN110029187A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910355843.6
申请日：2019-04-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6895
Abstract: 本发明提供了一种基于竞争性等位PCR构建水稻分子标记图谱的方法及利用图谱进行育种的应用，属农业技术领域。本发明通过对水稻进行全基因重组测序，并对重组测序数据SNP挖掘，寻找SNP位点；基于SNP位点结合现有SNP数据库，获得育种所需的565个SNP位点；利用挑选出的565个SNP位点进行分子标记，构建出水稻分子标记的图谱。本发明构建的水稻分子标记图谱的SNP标记物理位置清晰、检测方法简便，可直接用于部分重要农艺性状的分子鉴定和遗传背景分析，对于提升水稻分子育种效率具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN105154531A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510449502.7
申请日：2015-07-28
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q2600/13
Abstract: 本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记。所述的鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记，与野生型位点检测相关的标记Cas-tgw6-1的核苷酸序列SEQ ID No.1所示。用于鉴定上述水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记的引物为：上游引物TGW6-F：5′-CAACCAAACCAAAGCCTGC-3′；下游引物TGW6-R：5′-CAACTCGCATCAATCCCATG-3′；所述的鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记或引物可以应用于水稻种质资源鉴定或育种辅助选育中。
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