一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101880726A

    公开(公告)日:2010-11-10

    申请号:CN201010236983.0

    申请日:2010-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法。本发明用于检测日本血吸虫地域株的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明引物用于检测日本血吸虫地域株时,是用上述引物对待测模板DNA进行CAPS-PCR扩增,并对扩增产物进行CAPS酶切反应,将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,紫外光下观察,阳性结果呈现未被酶切的单带,阴性结果呈现完全酶切的双带。本发明建立了用于日本血吸虫地域株鉴别的快速、特异、敏感的CAPS方法,可准确鉴定日本血吸虫地域株。含有本发明引物的试剂盒操作简单程序化,方法特异性强,敏感度高,结果判定客观,适合推广应用。

    弓形虫慢性感染雄性小鼠生殖系统靶标基因的鉴定及其在临床上的应用

    公开(公告)号:CN108060220A

    公开(公告)日:2018-05-22

    申请号:CN201711418352.9

    申请日:2017-12-25

    Abstract: 本发明提供了一种应用RNA‑seq技术研究弓形虫慢性感染小鼠附睾组织差异表达基因的方法,包含以下步骤:(1)小鼠附睾组织的RNA提取;(2)对步骤(1)所得的RNA进行文库构建和测序;(3)对步骤(2)测序结果进行生物信息学分析,获取弓形虫慢性感染小鼠附睾组织的差异表达基因,筛选并鉴定与生殖相关的基因。本发明提供的弓形虫慢性感染附睾组织差异表达基因的方法能快速有效地进行基因表达差异的研究,用qPCR方法检测筛选的靶标基因来鉴定附睾是否感染弓形虫,对于提高公畜的生殖潜力及动物繁殖率均有重要理论价值和应用前景,将它们作为衡量公畜生殖系统感染弓形虫的分子标记,有利于快速定位到具有研究价值或商业应用价值的检测靶标、防治药物靶点。

    一种日本血吸虫性别特异性检测引物、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN101597645A

    公开(公告)日:2009-12-09

    申请号:CN200910040613.7

    申请日:2009-06-26

    Abstract: 本发明公开一种日本血吸虫性别特异性检测引物、检测试剂盒和检测方法,该特异性引物的上游引物Tsexu2核苷酸序列:5′-ACGTTAGATACTGCTGTTCA-3′,下游引物Tsexd2核苷酸序列:5′-ATATTGTTCCAAGTACGCAT-3′。本发明用上述特异性检测引物对待测模板DNA进行PCR扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,紫外光下观察,阳性结果会出现特异性扩增条带,阴性结果则不会出现。本发明根据日本血吸虫的雌虫特异序列数据设计特异性检测引物,建立了用于日本血吸虫流行病学和性别鉴别的快速、特异、敏感的PCR方法,可准确地鉴定日本血吸虫性别。本发明的试剂盒操作简单程序化,方法特异性强,敏感性高,结果判定客观,可用于人和动物日本血吸虫性别特异性诊断。

    一种弓形虫棒状体蛋白16蛋白的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN117210482A

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202310455539.5

    申请日:2023-04-25

    Abstract: 本发明属于生物技术技术,具体涉及一种弓形虫棒状体蛋白16蛋白的制备方法,包括如下步骤:扩增弓形虫ROP16基因CDS序列,构建原核表达质粒,转化至BL21感受态细胞,通过大量表达、His亲和层析柱纯化和透析复性得到重组蛋白,所述蛋白经HepG2和H22移植瘤的活性试验表现出良好的抗肿瘤活性,本发明提供的ROP16蛋白在原核表达系统中的能够快速高效的获取弓形虫ROP16可溶性重组蛋白,保持反应原性的同时降低制备成本和减轻工艺难度,可用于开发为具有抗肝癌作用的候选药物,具有重要的应用前景。

    一种可溶性GRA7蛋白的杆状病毒制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN116656741A

    公开(公告)日:2023-08-29

    申请号:CN202310455540.8

    申请日:2023-04-25

    Abstract: 本发明属于生物技术技术领域,具体涉及一种可溶性GRA7蛋白的杆状病毒制备方法及其应用,包括如下步骤:(1)对弓形虫GRA7的cDNA序列进行合成;(2)双酶切后连接至pFastBacHT‑A载体,制得连接产物;(3)步骤(2)构建的载体转入DH10Bac感受态细胞,经抗性蓝白斑筛选、分离,得重组杆状病毒穿梭载体reBacmid‑GRA7;(4)步骤(3)构建的载体转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒并进行传代扩增培养;本发明提供了昆虫细胞‑杆状病毒表达系统高效表达弓形虫GRA7蛋白的方法。本发明所获得的外源蛋白具有蛋白生物学功能所需的蛋白质折叠和适当翻译后修饰,获得具有生物活性的GRA7蛋白以及其在恶性肿瘤治疗方面的作用,可以开发为新型的抗肺癌药物。

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