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公开(公告)号:CN112852845A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110156059.X
申请日:2021-02-04
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/56 , C12N9/42 , C12N15/85 , A23K20/189 , A23K50/75 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用,该酶来源于中华竹鼠肠道微生物,能够兼容真核生物细胞表达系统,表达高生物活性的纤维素酶,其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用,以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题,减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序,序列拼接,与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比,筛选高表达的、同源性高于50%的疑似纤维素酶的基因,预测其信号肽,并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽,按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上,通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达,收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。
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公开(公告)号:CN110846337A
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201911170226.5
申请日:2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用,该多功能融合酶XABT基因,可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶,并具有高效的酶活,该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性,对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物,消除饲料中主要抗营养因子,达到提高饲料消化率,减少污染排放的目的。
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公开(公告)号:CN110564774A
公开(公告)日:2019-12-13
申请号:CN201910782035.8
申请日:2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为,CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段,可以定点识别目的基因,并使目的基因发生双链断裂,而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对,高效的完成基因组定点修饰,而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
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公开(公告)号:CN110846336B
公开(公告)日:2022-12-20
申请号:CN201911170220.8
申请日:2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶XAET和多功能融合酶定点整合真核特异表达载体及其构建方法,该多功能融合酶可以表达木聚糖酶,植酸酶,双葡聚糖酶和双纤维素酶活性,将其用于后期制备相应的转基因动物,该动物将自身分泌这些酶,起到消化饲料中木聚糖、植酸、葡聚糖,纤维素等抗营养因子,达到提高饲料利用率,减少污染排放的功效。同时,解决刚性肽介导两个以上融合蛋白共表达时相互干扰问题;解决2A连接肽多基因共表达效率低,基因位置确定困难问题,及多基因共表达中2A多肽残基对上游酶蛋白干扰的问题,达到增强多基因高效共表达效率的目的。此外,还可以解决单个来源的纤维素酶基因表达和水解纤维素效果差的问题。
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公开(公告)号:CN113088529B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN202110638095.X
申请日:2021-06-08
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/56 , C12N9/42 , C12N15/85 , A23L33/00 , A23K20/189 , A01K67/027
Abstract: 本发明通过高膳食纤维饲料诱导,取竹鼠盲肠、结肠食糜,分离其微生物总RNA,通过宏转录组学分析筛选糖苷水解酶基因,获得有表达β‑葡聚糖酶功能的新型β‑葡聚糖酶基因HG278,该基因编码的β‑葡聚糖酶在pH3.0~8.0酶活力呈锯齿形变化,对胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶具有较高的耐受力,非常适合在猪胃肠道中发挥功能,是一种良好的饲料和食品,亦可用于制备用于改善胃肠道内环境、药品、食品、保健品等用途的酶制剂,具有较广泛的用途。
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公开(公告)号:CN112852845B
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202110156059.X
申请日:2021-02-04
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/56 , C12N9/42 , C12N15/85 , A23K20/189 , A23K50/75 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用,该酶来源于中华竹鼠肠道微生物,能够兼容真核生物细胞表达系统,表达高生物活性的纤维素酶,其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用,以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题,减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序,序列拼接,与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比,筛选高表达的、同源性高于50%的疑似纤维素酶的基因,预测其信号肽,并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽,按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上,通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达,收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。
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