公开(公告)号：CN115873811B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202210975676.7

申请日：2022-08-15

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  张雅茜 ,  李可欣

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/52 ,  C12P19/34

Abstract: 本发明公开了一种PBCV‑1连接酶突变体、表达纯化方法及应用，对野生型PBCV‑1连接酶的第43位苏氨酸、第84位苏氨酸、第178位苏氨酸、第222位苏氨酸、第283位半胱氨酸中的任一或多个氨基酸位点进行突变得到PBCV‑1连接酶突变体，PBCV‑1连接酶突变体通过表达纯化方法得到，能够实现对大片段DNA序列的有效环化。

公开(公告)号：CN117106745B

公开(公告)日：2025-02-14

申请号：CN202310944988.6

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、H126Y、N131M、H204R、T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。

公开(公告)号：CN120060189A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202311620316.6

申请日：2023-11-30

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 杜军 ,  李妍 ,  王文朋 ,  张雅茜 ,  李云仙 ,  严文培 ,  裴文悦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本申请属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种末端脱氧核苷酸转移酶突变体及其应用。本申请通过对野生型鸟类TdT结构进行分析，对影响该酶活性的氨基酸位点第47位谷氨酸(E)、第54位谷氨酸(E)、第158位赖氨酸(K)、第210位精氨酸(R)、第212位赖氨酸(K)、第213位天冬酰胺(N)、第214位异亮氨酸(I)、第273位苯丙氨酸(F)、第332位精氨酸(R)进行特定的设计，通过本申请设计得到的末端脱氧核苷酸转移酶突变体能够有效提升酶的活性。

公开(公告)号：CN119876080A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510065607.6

申请日：2025-01-15

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司 ,  湖北擎科生物科技有限公司

Inventor： 马石金 ,  何树彻 ,  王文朋 ,  严文培 ,  李云仙 ,  裴文悦 ,  宋辉 ,  张雅茜

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种KOD DNA聚合酶突变体及其生产方法和应用，所述KOD DNA聚合酶突变体具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。所述生产方法包括如下步骤：培养能分泌所述KOD DNA聚合酶突变体的重组宿主细胞或者重组菌株，并从所得培养产物中分离KOD DNA聚合酶突变体。本发明的KOD DNA聚合酶突变体具有扩增活性好的特点，尤其是针对大片段的核酸具有良好的扩增活性；且采用本发明的生产方法生产KOD DNA聚合酶突变体，KOD DNA聚合酶突变体具有良好可溶表达性能；本发明的KOD DNA聚合酶突变体在制备用于PCR扩增的试剂和/或试剂盒方面具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN119709687A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202510088442.4

申请日：2022-12-23

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李可欣 ,  孙艳妮

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/6806 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开Tth DNA聚合酶突变体，所述突变体在Tth野生型聚合酶基础上具有如下一组突变：S515K、I640F、S741G和L789F；D734G和M763T；或E617D、D734G和M763T。本发明的Tth DNA聚合酶突变体在不依赖锰离子的条件下，其逆转录活性接近M‑MLV RT野生型的活性。适于将本发明的Tth DNA聚合酶突变体制备成试剂盒，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN118530964A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410789576.4

申请日：2024-06-18

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 杜军 ,  王文朋 ,  张雅茜 ,  李云仙 ,  严文培 ,  裴文悦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种末端脱氧核苷酰转移酶及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368，所述末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。dATP修饰底物的掺入活性较低，是dATP、dTTP、dCTP和dGTP这四种碱基中最难掺入的一种，而研究表明，所述末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368对TT末端起始链掺入修饰底物3’‑ONH2‑dATP的掺入效率为40％。因此，所述末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368在DNA的合成中极具应用前景。

公开(公告)号：CN117106745A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202310944988.6

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。

公开(公告)号：CN116004564B

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202210621426.3

申请日：2022-06-01

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 肖晓文 ,  王文朋 ,  李妍 ,  李可欣 ,  张雪静

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种MMLV逆转录突变体，其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计，其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比，本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。