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公开(公告)号:CN102296116A
公开(公告)日:2011-12-28
申请号:CN201110259113.X
申请日:2011-09-02
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种对DNA目标序列进行信号放大和检测的方法,制备单脱碱基的双标记荧光探针,该探针一端标记荧光基团,另一端标记猝灭基团,除脱碱基位点外,其序列与DNA目标序列完全匹配;在一定检测温度下,该探针与目标序列特异性结合形成双链空位,利用内切酶IV识别并切割该双链空位,切割后的探针碎片从目标序列上解离下来,产生荧光信号,而解离释放出的目标序列可以继续与另一个探针结合,重复上述过程,从而实现目标序列的信号放大和检测。本发明方法可实现高选择性、高灵敏度的低丰度基因突变检测。
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公开(公告)号:CN102154489A
公开(公告)日:2011-08-17
申请号:CN201110049749.1
申请日:2011-03-01
Applicant: 北京大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一类单标记寡聚核苷酸荧光探针及检测核酸酶的方法。该单标记寡聚核苷酸荧光探针具有茎环结构,环部由5-24个核苷酸残基组成,茎部根据待测核酸酶的活性分为水解模式与合成模式两种:水解模式的茎部为双链结构,且末端至少有3个连续G-C碱基对,C碱基端标记荧光基团,G碱基端产生猝灭作用,在核酸酶作用下茎部的一条链水解,释放出荧光信号;合成模式的茎部由一段双链和5’-(dC)4-8侧链组成,5’-端标记荧光基团,3’-端与核酸酶反应,聚合延伸产生4-8个连续的鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸,猝灭5’-端的荧光基团,根据荧光信号的变化情况分析待测核酸酶活性。
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