检测松材线虫的方法、检测引物及其LAMP检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103555840B

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201310538469.6

    申请日:2013-11-04

    Abstract: 本发明公开了一种检测松材线虫的方法、检测引物及其LAMP检测试剂盒。本发明提供一种检测松材线虫的方法,包括:(1)提取松树木材样品中松材线虫DNA;(2)建立LAMP反应体系,进行环介导等温扩增;(3)根据扩增产物荧光或浊度的变化,判定松树木材样品中是否存在松材线虫。本发明还提供了一种操作简便、成本低、稳定性强的从松树木材中提取松材线虫DNA的方法。本发明进一步提供了检测松材线虫的特异性强、灵敏度高的LAMP引物组。本发明还提供了松材线虫LAMP检测试剂盒,包括:LAMP引物组,反应缓冲液,DNA链置换酶和荧光染料/特异探针。本发明检测试剂盒具有特异性强、灵敏度高、检测方便快捷等优点。

    线虫卵寄生真菌和孢子萌发促进剂的复配制剂和应用

    公开(公告)号:CN102986737A

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210424889.7

    申请日:2012-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种线虫卵寄生真菌和孢子萌发促进剂复配菌剂及其制备方法和应用。所述真菌和孢子萌发促进剂复配菌剂包括:淡紫拟青霉孢子粉或发酵液、孢子萌发促进剂。本发明采用正交试验获得能够促进淡紫拟青霉孢子萌发的各种营养物质的最佳组合,并通过室内生测实验验证了其促进淡紫拟青霉孢子萌发及防治根结线虫的生防效果。本发明复配菌剂作用于根结线虫5天,对于根结线虫卵寄生率就可达80%以上,根结线虫卵孵化率几乎为零,明显优于对照组。实验结果证明本发明复配菌剂中所添加的孢子萌发促进剂能够有效促进孢子萌发从而提高了淡紫拟青霉对根结线虫卵的寄生率并缩短了作用时间,最终显著提高了对植物根结线虫的防治效果。

    松材线虫的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法

    公开(公告)号:CN102986648A

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210424884.4

    申请日:2012-10-30

    Abstract: 本发明公开了松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法,该方法包括以下步骤:(1)将松材线虫悬液与冷冻保护剂混合均匀得到混合物;将混合物进行平衡处理;(2)平衡处理后的混合物在液氮中冷冻保存;(3)解冻、复苏;其中,所述的冷冻保护剂是二甲基亚砜和卵黄。本发明对玻璃化冷冻保存方法中的各工艺参数进行了优化,筛选到了最适宜于松材线虫玻璃化冷冻保存的保护剂的种类、浓度以及包括预处理、平衡和解冻复苏在内的最适宜的处理方式。采用本发明方法冷冻保存松材线虫,冷冻后的松材线虫存活率高、冻后繁殖率高,能适用于松材线虫不同株系的冷冻保存。

    松材线虫的冷冻保存及解冻方法

    公开(公告)号:CN102428909A

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN201110282637.0

    申请日:2011-09-22

    Abstract: 本发明公开了一种松材线虫的冷冻保存及解冻方法,属于线虫的冷冻保存领域。本发明方法包括以下步骤:(1)预处理松材线虫悬液;(2)预处理后的松材线虫悬液中加入冷冻保护剂,平衡处理;(3)平衡处理后的松材线虫悬液程序化降温后冷冻保存;(4)解冻复苏;所述的程序化降温的程序如下:以1℃/min的降温速率将松材线虫悬液从4℃降温至-6℃;再以20℃/min的降温速率降温至-40℃;以10℃/min的升温速率升温至-20℃;最后以1-0.5℃/min的速率将松材线虫悬液降温至-45℃后投入液氮中保存。本发明冷冻保存及解冻方法能显著提高松材线虫的存活率和繁殖能力,能适用于不同株系松材线虫的冷冻保存。

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