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公开(公告)号：CN106893737A
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201510953701.1
申请日：2015-12-17
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种落叶松胚性细胞的遗传转化方法。本发明提供了一种落叶松胚性细胞的遗传转化方法，依次包括如下步骤：(a1)取落叶松胚性细胞，悬浮于重组农杆菌侵染液进行侵染；(a2)完成步骤(a1)后，收集落叶松胚性细胞，进行恢复培养；(a3)完成步骤(a2)后，取落叶松胚性细胞，采用抽滤脱菌装置进行脱菌。本发明提供的方法，可用于利用基因工程手段对落叶松进行快速定向遗传改良，为研究外源基因在落叶松体内表达调控及其功能验证和胚胎发育研究提供技术平台。
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公开(公告)号：CN100394844C
公开(公告)日：2008-06-18
申请号：CN200610003188.0
申请日：2006-02-22
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种培育转基因杨树的方法。该方法包括以下步骤：1)自地上主茎高50-160cm处截断杨树；2)将杨树断伤面用浓度OD600值为0.3-0.5的携带有外源目的基因的重组农杆菌菌悬液侵染3分钟-24小时；3)自侵染后第三天，每隔1-2天在步骤2)经重组农杆菌侵染的断伤面上涂浸对农杆菌具有致死作用抗生素进行选择培育，得到杨树转基因再生植株。在实际应用方面，该方法将产生以下积极效果：(1)加速优良外源基因向杨树中的转移，有利于杨树的品种改良；(2)为杨树的无性繁殖提供一条新途径，提高了杨树的生产力及集约栽培水平，可用于解决植被恢复等生态问题及并可满足市场对林木的需求。
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公开(公告)号：CN1813524A
公开(公告)日：2006-08-09
申请号：CN200610003188.0
申请日：2006-02-22
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
CPC classification number: C12N15/8205
Abstract: 本发明公开了一种培育转基因杨树的方法。该方法包括以下步骤：1)自地上主茎高50－160cm处截断杨树；2)将杨树断伤面用浓度OD600值为0.3－0.5的携带有外源目的基因的重组农杆菌菌悬液侵染3分钟－24小时；3)自侵染后第三天，每隔1－2天在步骤2)经重组农杆菌侵染的断伤面上涂浸对农杆菌具有致死作用抗生素进行选择培育，得到杨树转基因再生植株。在实际应用方面，该方法将产生以下积极效果：(1)加速优良外源基因向杨树中的转移，有利于杨树的品种改良；(2)为杨树的无性繁殖提供一条新途径，提高了杨树的生产力及集约栽培水平，可用于解决植被恢复等生态问题及并可满足市场对林木的需求。
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公开(公告)号：CN118077578A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410364760.4
申请日：2024-03-28
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及植物组织培养领域，为解决目前日本落叶松组培中存在的胚状体萌发率低、成苗率低、体细胞胚胎发生体系不完善的问题，本发明提供一种加速日本落叶松早期形态建成的方法，包括将日本落叶松的胚状体先在黑暗条件下萌发培养，后换到光照条件下继续萌发培养的步骤。本发明的方法加速了日本落叶松早期形态建成，为日本落叶松商业化育苗、遗传改良提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN104450770B
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201310452485.3
申请日：2013-09-25
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种落叶松miR166a在调控植物发育中的应用。本发明所提供的应用具体为如下（1）‑（4）中任一所示的核酸分子在促进植物生长发育中的应用：（1）序列表中序列1所示的RNA分子；（2）序列表中序列2所示的RNA分子；（3）序列表中序列3所示的DNA分子；（4）序列表中序列3的第27‑539位所示的DNA分子。实验证明，LaMIR166a基因过表达的转基因植株在生根培养基a17上培养4个月时，有大量的侧根发生，且植株生长良好；而非转基因对照植株，只有主根伸长，没有侧根发生，且相比之下植株生长缓慢。这说明过表达miR166a可促进落叶松组培苗的生长速率、促进侧根的发生，从而提高其移栽成活率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104450770A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201310452485.3
申请日：2013-09-25
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种落叶松miR166a在调控植物发育中的应用。本发明所提供的应用具体为如下（1）-（4）中任一所示的核酸分子在促进植物生长发育中的应用：（1）序列表中序列1所示的RNA分子；（2）序列表中序列2所示的RNA分子；（3）序列表中序列3所示的DNA分子；（4）序列表中序列3的第27-539位所示的DNA分子。实验证明，LaMIR166a基因过表达的转基因植株在生根培养基a17上培养4个月时，有大量的侧根发生，且植株生长良好；而非转基因对照植株，只有主根伸长，没有侧根发生，且相比之下植株生长缓慢。这说明过表达miR166a可促进落叶松组培苗的生长速率、促进侧根的发生，从而提高其移栽成活率。
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公开(公告)号：CN100344755C
公开(公告)日：2007-10-24
申请号：CN200510090285.3
申请日：2005-08-12
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了针叶树种体细胞胚胎发生培养基。本发明所提供的针叶树种体细胞胚胎发生培养基，包括如下组分：KNO31836-2836mg/l，NH4NO3243-360mg/l，KH2PO470-130mg/l，CaCl2.2H2O 300-450mg/l，MgSO4·7H2O 130-250mg/l，H3BO32-11mg/l，ZnSO4·7H2O 3-7mg/l，MnSO4·H2O 6.5-10.5mg/l，Na2MoO4·2H2O 0.11-0.21 mg/l，KI0.28-0.63mg/l，CuSO4·5H2O 0.01-0.035mg/l，CoCl20.01-0.035mg/l，2，4-二氯苯氧乙酸0.1-3.6mg/l，6-苄氨基嘌呤0.02-3.2mg/l，蔗糖5-120g/l。本发明通过调节培养基中2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)、BA(6-苄氨基嘌呤)的浓度比例关系，来优化针叶树种体细胞胚胎发生培养基，有利于胚性细胞的保持和快速增殖，将培养得到的胚性细胞与组织接种于无激素培养基上过渡培养，可以促进产生大量的子叶胚，并能够提高正常子叶胚比例的发生，可以广泛应用于落叶松等针叶树种的培养、发育。
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公开(公告)号：CN100343387C
公开(公告)日：2007-10-17
申请号：CN200510090284.9
申请日：2005-08-12
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了针叶树种胚性愈伤组织培养基。本发明所提供的针叶树种胚性愈伤组织培养基，包括以下组分：KNO31836-2836mg/L，NH4NO3243-360mg/L，KH2PO470-130mg/L，CaCl2·2H2O 300-450mg/L，MgSO4·7H2O 130-250mg/L，H3BO32-11mg/L，ZnSO4·7H2O 3-7mg/L，MnSO4·H2O 6.5-10.5mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.11-0.21mg/L，KI0.28-0.63mg/L，CuSO4·5H2O 0.01-0.035mg/L，CoCl20.01-0.035mg/L，蔗糖30-45g/L。本发明通过优化培养基的各种组分，特别是调节培养基中蔗糖浓度，使培养基更加有利于针叶树种原胚的发育，并可以提高将胚性愈伤组织转入成熟培养基后形成子叶胚的数量和质量，发生率可达到每克胚性愈伤组织320-360个高质量体细胞胚，可以广泛应用于落叶松等针叶树种的培养、发育。
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公开(公告)号：CN1733905A
公开(公告)日：2006-02-15
申请号：CN200510090284.9
申请日：2005-08-12
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了针叶树种胚性愈伤组织培养基。本发明所提供的针叶树种胚性愈伤组织培养基，包括以下组分：KNO31836－2836mg/L，NH4NO3243－360mg/L，KH2PO470－130mg/L，CaCl2·2H2O 300－450mg/L，MgSO4·7H2O 130－250mg/L，H3BO32－11mg/L，ZnSO4·7H2O 3－7mg/L，MnSO4·H2O 6.5－10.5mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.11－0.21mg/L，KI0.28－0.63mg/L，CuSO4·5H2O 0.01－0.035mg/L，CoCl20.01－0.035mg/L，蔗糖5－120g/L。本发明通过优化培养基的各种组分，特别是调节培养基中蔗糖浓度，使培养基更加有利于针叶树种原胚的发育，并可以提高将胚性愈伤组织转入成熟培养基后形成子叶胚的数量和质量，发生率可达到每克胚性愈伤组织320－360个高质量体细胞胚，可以广泛应用于落叶松等针叶树种的培养、发育。
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公开(公告)号：CN1733904A
公开(公告)日：2006-02-15
申请号：CN200510090283.4
申请日：2005-08-12
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种液体培养获得针叶树种胚状体及其培养基。本发明所提供的针叶树种胚状体液体培养基，包括诱导培养基、增殖培养基和成熟培养基。应用上述液体培养基，液体培养获得针叶树种胚状体的方法，包括如下步骤：诱导培养、增殖培养和成熟培养，得到所述胚状体。本发明通过对各个阶段培养基组分的优化，提高了胚性愈伤组织诱导频率，早期原胚质量大大改善，本方法比现有培养系统中每克胚性愈伤组织上发生5～25个子叶胚，畸形胚占到70％以上，且体细胞胚生根率0～7％等状况提高了几十倍，真正突破了针叶树体细胞胚规模化发生难关。
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