公开(公告)号：CN109666624A

公开(公告)日：2019-04-23

申请号：CN201811594179.2

申请日：2018-12-25

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 吴文铭 ,  彭俊雅 ,  陈澔 ,  黄丹 ,  刘路路 ,  洪夏飞 ,  丛林 ,  李冬晶 ,  赵玉沛

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明涉及酶工程领域，公开了含有胶原酶的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为100-312.5:1-5:5000-25000:1。本发明还公开了如上所述的试剂盒在从胰腺样品中分离单细胞中的应用。本发明能够实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。

公开(公告)号：CN109609439B

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN201811594140.0

申请日：2018-12-25

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 吴文铭 ,  彭俊雅 ,  陈澔 ,  黄丹 ,  刘路路 ,  洪夏飞 ,  丛林 ,  李冬晶 ,  赵玉沛

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明涉及单细胞分离领域，公开了从非正常组织中分离单细胞的方法。所述方法包括：将非正常组织样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为100‑312.5:1‑5:5000‑25000:1。本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。

公开(公告)号：CN109666644A

公开(公告)日：2019-04-23

申请号：CN201811594160.8

申请日：2018-12-25

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 吴文铭 ,  彭俊雅 ,  陈澔 ,  黄丹 ,  刘路路 ,  洪夏飞 ,  丛林 ,  李冬晶 ,  赵玉沛

IPC: C12N5/09

Abstract: 本发明涉及单细胞分离领域，公开了从肿瘤样品中分离单细胞的方法。所述方法包括：将肿瘤样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为10-1250:0.1-20:500-100000:1。本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。

公开(公告)号：CN109666626A

公开(公告)日：2019-04-23

申请号：CN201811595504.7

申请日：2018-12-25

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 吴文铭 ,  彭俊雅 ,  陈澔 ,  黄丹 ,  刘路路 ,  洪夏飞 ,  丛林 ,  李冬晶 ,  赵玉沛

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/09

Abstract: 本发明涉及单细胞分离领域，公开了从样品中分离单细胞的方法。所述方法包括：将正常组织样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为100-312.5:1-5:5000-25000:1。本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。

公开(公告)号：CN109536449A

公开(公告)日：2019-03-29

申请号：CN201811594148.7

申请日：2018-12-25

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 吴文铭 ,  彭俊雅 ,  陈澔 ,  黄丹 ,  刘路路 ,  洪夏飞 ,  丛林 ,  李冬晶 ,  赵玉沛

IPC: C12N5/09 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及单细胞分离领域，公开了从异常组织中分离单细胞的方法。所述方法包括：将异常组织样品与消化液混合进行消化，所述消化液含有VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶，其中，所述VIII型胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶抑制剂和脱氧核糖核酸酶的酶活力单位之间的比值为50-90:0.5-1:2000-5000:1。本发明能够在总消化时间较短的情况下实现单细胞的高收率和高活率提取，特别是胰腺组织，攻克了现有胰腺组织单细胞收率和活率较低的难题。

公开(公告)号：CN209852831U

公开(公告)日：2019-12-27

申请号：CN201822198586.3

申请日：2018-12-25

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 吴文铭 ,  彭俊雅 ,  陈澔 ,  黄丹 ,  刘路路 ,  洪夏飞 ,  丛林 ,  李冬晶 ,  赵玉沛

IPC: B65D25/10 ,  B65D85/20 ,  B65D25/02

Abstract: 本实用新型涉及试剂盒领域，具体涉及一种用于从组织中分离单细胞的试剂盒。该试剂盒包括盒体，盒体内部设置有试管固定架和置于所述试管固定架上的VIII型胶原酶试管、中性蛋白酶试管、胰蛋白酶抑制剂试管和脱氧核糖核酸酶试管；所述试管固定架包括分体设置的第一固定部和第二固定部。盒体内在所述试管固定架与盒体之间设置有用于调节试管固定架高度的调高构件。该试剂盒内的试管固定架设置为分体形式，方便对需要在不同温度下存放的试剂进行储存，且试剂固定架具有升降功能，方便取放试剂管。