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公开(公告)号：CN111187781A
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN201910863646.5
申请日：2019-09-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N15/34 , C07K14/01 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/12 , A61P31/20 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因及其在制备病毒样颗粒中的应用。本发明经优化后的猪圆环病毒3型衣壳蛋白全长基因如SEQ ID NO.1所示，该序列是针对大肠杆菌表达系统进行的部分优化。与密码子全部优化或不优化相比，该序列能够高水平表达重组蛋白，并能够组装成完整的病毒样颗粒。本发明还公开了制备病毒样颗粒的方法，涉及猪圆环病毒3型衣壳蛋白基因的优化、基因的克隆及其在大肠杆菌中表达，以及重组蛋白的纯化及病毒样颗粒的制备。本发明简单易行，成本较低，实现了猪圆环病毒3型衣壳蛋白在大肠杆菌中稳定表达，表达的重组衣壳蛋白可自组装形成病毒样颗粒，为猪圆环病毒3型的抗体检测及亚单位疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN109517797A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811201822.0
申请日：2018-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种表达猪繁殖障碍与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)受体CD163的猪永生化的肺泡巨噬细胞细胞系，所述的细胞系命名为PAM-Tang-20，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.13591。实验证明，本发明建立的细胞系能够高表达CD163受体，是PRRSV的易感细胞，可以广泛应用于PRRSV的增殖、PRRSV临床毒株的分离、疫苗生产以及PRRSV相关基础研究等。本发明的提出为猪繁殖障碍与呼吸综合症病毒的体外培养提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN119607002A
公开(公告)日：2025-03-14
申请号：CN202510034867.7
申请日：2025-01-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: A61K31/704 , A61P31/14
Abstract: 大豆皂苷在制备预防和/或治疗猪繁殖与呼吸道综合征的药物中的应用，属于植物化学物生物学功能研究技术领域。为解决尚无有效治疗PRRSV感染导致的猪繁殖与呼吸综合症的药物的技术问题，本发明研究了大豆皂苷对于PRRSV增殖的抑制作用，通过间接免疫荧光实验和免疫印迹实验发现，分别在PRRSV感染的同时、PRRSV感染前和PRRSV感染后给药大豆皂苷都能起到抑制PRRSV增殖的效果，且大豆皂苷对于PRRSV增殖的抑制作用具有时间依赖效应和剂量依赖效应，因此，大豆皂苷具有开发成抗猪繁殖与呼吸道综合征病毒药物的前景。
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公开(公告)号：CN117427154A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311763141.4
申请日：2023-12-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开一种用于制备猪繁殖与呼吸综合征mRNA疫苗的序列组合及其应用。属于疫苗技术领域。本发明的目的是为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗刺激机体产生更强的体液免疫应答。本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的重组蛋白，所述组合蛋白是将重组蛋白1和重组蛋白2按照质量比1:1混合获得组合蛋白；所述重组蛋白1是利用Linker将GP2蛋白和GP4蛋白融合获得的；所述重组蛋白2是利用GP3蛋白和Nsp9蛋白融合获得重组蛋白2。开发的PRRSV多抗原融合mRNA疫苗对PRRSV具有一定的保护效果，为开发PRRSV安全高效的理想疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN116444682B
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310342828.4
申请日：2023-03-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/867 , C12N5/10 , A61K39/395 , A61K39/385 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种靶向降解PRRSV关键复制酶的生物型蛋白降解靶向嵌合体及其应用。所述的生物型蛋白降解靶向嵌合体由1至多个PRRSVnsp9纳米抗体nsp9nb及/或nsp2纳米抗体nsp2nb串联后再与E3泛素连接酶接头蛋白SPOP中BTB结构域融合后得到。本发明利用筛选出的特异性结合PRRSV关键复制酶Nsp2，Nsp9蛋白的纳米抗体，并用纳米抗体替代E3泛素连接酶复合体(SPOP)底物识别结构域，构建靶向降解PRRSV关键复制酶的生物型蛋白降解靶向嵌合体。本发明的提出为PRRS的治疗以及抗PRRS育种提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN116515769A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310426670.9
申请日：2023-04-20
Applicant: 哈尔滨维科生物技术有限公司 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 一种规模化培养细胞源禽流感病毒的方法，属于流感病毒培养技术领域。为解决细胞源禽流感病毒生产过程中存在细胞密度过大，进而导致抗原纯化及浓缩困难的问题，提供了一种利用PK‑15细胞规模化培养禽流感病毒的方法，具体包括利用无血清培养基快速全悬浮驯化PK‑15细胞；全悬浮PK‑15细胞生物反应器放大培养；利用全悬浮PK‑15细胞培养禽流感病毒。本发明所述方法操作简单，极大降低了病毒培养过程中的细胞密度，为规模化生产细胞源禽流感病毒提供了新方法。
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公开(公告)号：CN113308463A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110516652.0
申请日：2021-05-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了经过反密码子编辑的tRNA作为分子开关在精准控制蛋白表达及病毒复制中的应用。所述的经过反密码子编辑的tRNA携带正常氨基酸，同时能够识别所述的提前终止密码子，并将携带的氨基酸插入到相应的位置，从而使得蛋白以及复制缺陷型病毒能够在该tRNA存在下完成表达及复制。该方法并不依赖特殊的氨酰tRNA合成酶以及UAA。仅对tRNA的反密码子编码序列进行突变改造就可以实现携带正常氨基酸的tRNA识别终止密码子并将携带的氨基酸插入到相应的位置，从而实现对蛋白表达以及复制缺陷型病毒精准调控，提高疫苗的安全性。本发明提供了一种用于蛋白或病毒精准控制的新方法，特别是在新型的复制缺陷型病毒疫苗的生产中将具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112125960A
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN202010878710.X
申请日：2020-08-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/20 , C07K1/14 , C07K1/30 , C07K1/18 , C12N15/70 , C12N15/34 , C12P21/02 , A61K39/295 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种适用于大规模工厂化生产操作的去除内毒素的通用方法。本发明将液相分离去除内毒素法和疏水层析去除内毒素法进行了结合和改进，保留了液相分离法高效去除内毒素的优点和疏水层析法适合大规模工厂化操作的优点，去掉了液相分离法中繁琐的离心和萃取以及疏水层析法中的高盐步骤。本发明可用于重组蛋白中内毒素的去除，也可用于制药业的药液中内毒素的去除，经过本发明的方法处理后，最终蛋白溶液中内毒素的含量为不超过10EU/mL或10EU/mg(目的蛋白)，通过本方法，能够以较低的成本将兽用疫苗中内毒素的含量控制到和人用疫苗相近的标准。本发明的一种去除内毒素的方法，具有高效、高回收率、低成本、易于大规模工厂化生产操作的特点。
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公开(公告)号：CN111849924A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010580477.7
申请日：2020-06-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了类NADC30猪蓝耳病强毒株、弱毒株及其应用。本发明的一种类NADC30猪蓝耳病强毒株，命名为类NADC30猪蓝耳病病毒SD株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.19691。通过对该SD株进行致弱培养，本发明还获得了一株类NADC30猪蓝耳病弱毒株，命名为类NADC30猪蓝耳病病毒SD-R株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.19692。实验证明，本发明的SD株具有毒力强、对仔猪致病力稳定的特征，可用于检验预防或治疗类NADC30猪繁殖与呼吸综合征；本发明的弱毒疫苗株SD-R株具有安全性高、保护效果好的特征，可用于预防类NADC30猪繁殖与呼吸综合征。因此，本发明的SD株及其弱毒疫苗SD-R株可用于制备成防治类NADC30猪繁殖与呼吸综合征的单苗或联苗(活或灭活疫苗)等，也可以制备成诊断类NADC30猪繁殖与呼吸综合征的诊断试剂。
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公开(公告)号：CN111471102A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010325058.9
申请日：2020-04-23
Applicant: 西北农林科技大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明适用于生物技术领域，提供了一种编码基因、载体、抗独特型纳米抗体及其制备方法和应用，该抗独特型纳米抗体的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。该抗独特型纳米抗体是通过噬菌体展示技术成功筛选到所需抗独特型纳米抗体的编码基因，接着，将该编码基因连接到毕赤酵母表达载体中，并电转化至毕赤酵母感受态细胞培养制得的。该抗独特型纳米抗体能够特异性地阻断单抗1E7与PCV2 Cap蛋白的结合，具有模拟PCV2 Cap关键抗原表位的作用，其可用于开发防治PCV2的抗独特性纳米抗体疫苗、诊断试剂及生物试剂等。
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