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公开(公告)号：CN108220221A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201711408923.0
申请日：2017-12-22
Applicant: 吉林冠界生物技术有限公司 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Inventor： 李莉 , 赵海源 , 曾显营 , 陈化兰 , 田国彬 , 陈宏 , 冯玉强 , 王玉红 , 朱长动 , 蒋晓梅 , 张天舒 , 杜鑫 , 张丽娜 , 高晓庆 , 刘金伟 , 曾晓敏 , 王仁君 , 王琳雅
Abstract: 本发明涉及禽流感病毒疫苗制备领域，特别涉及一种全悬浮细胞培养重组禽流感亚型病毒的方法，包括以下步骤：重组禽流感亚型病毒鸡胚种毒接种于MDCK单层细胞驯化培养，收获的培养物接种，以此重复培养，培养至重组禽流感亚型病毒增殖速度稳定，病毒含量≥107.5EID50；然后接入悬浮细胞；培养至细胞病变达75％以上时收获病毒液，即得。本发明先将鸡胚种毒接种于MDCK单层细胞驯化培养，再接种于悬浮MDCK细胞，有效增加生产得到的悬浮毒的性能稳定性，得到的悬浮毒HA≥1:1024，每0.1ml病毒含量≥108.0EID50，每1ml病毒含量≥108.0TCID50。
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公开(公告)号：CN103667351B
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201210331405.4
申请日：2012-09-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/869 , A61K48/00 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61K39/12 , A61K39/215 , A61P31/16 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种活病毒载体鸭病毒性肠炎病毒(DEV)弱毒疫苗载体在鸡形目禽类中的应用，所述DEV弱毒疫苗载体可以用于表达鸡形目禽类病原的相关基因，并能携带外源基因在鸡形目禽类中表达，在免疫动物体内诱导良好的针对此病原的保护。本发明通过表达禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组鸭病毒性肠炎病毒疫苗株(其保藏编号为CCTCC V201125，命名为rDEVus78Ha-Re6)和表达新城疫病毒F基因的重组鸭病毒性肠炎病毒疫苗株(其保藏编号为CCTCC V201220，命
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公开(公告)号：CN103667197B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201210331133.8
申请日：2012-09-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种表达分泌型鸭坦布苏病毒M/E蛋白的重组鸭病毒性肠炎病毒疫苗CCTCC V201215，命名为rDEV-TME-tPAS，及其构建方法和应用。具体地，本发明利用重组克隆技术，将包含SV40启动子、鸭坦布苏病毒M及E蛋白和tPA(Tissue plasminogen activator)信号肽序列的基因片段SV40-TME-tPA插入到鸭病毒性肠炎病毒的US7和US8基因之间的间隔区中，构建获得在US7和US8基因之间插入SV40-TME-tPA表达框架的粘粒，由其拯救获得表达分泌型鸭坦布苏病毒M/E蛋白的重组鸭病毒性肠炎病毒疫苗CCTCC V201215。本发明还涉及构建该重组鸭病毒性肠炎病毒疫苗株的方法，以及该重组鸭病毒性肠炎病毒疫苗株用于制备预防鸭病毒性肠炎病毒和鸭坦布苏病毒引起的传染病的疫苗的应用。
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公开(公告)号：CN104450956A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410641148.3
申请日：2014-11-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q1/701 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明公开了一种甲型H1N1猪流感病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其应用。本发明通过序列多重比对，针对甲型H1N1(2009)猪流感病毒、欧亚类禽型H1N1猪流感病毒、经典型H1N1猪流感病毒及人源H1N1猪流感病毒的保守基因片段，设计出特异性强的检测甲型H1N1猪流感病毒的引物和探针，用于实时荧光RT-PCR检测。实验结果表明使用本发明所提供的特异性PCR引物对及TaqMan荧光探针用于检测甲型H1N1猪流感病毒特异性高，灵敏度可达2.6×10-5ng/反应，不仅可以对待测猪群的的鼻腔拭子、肺脏，气管等组织样品进行检测，还可检测鸡胚尿囊液，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，可成为甲型H1N1猪流感病毒疫病诊断和流行病学调查的有用检测工具。
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公开(公告)号：CN104450955A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410641147.9
申请日：2014-11-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12Q1/701 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明公开了一种欧亚类禽型H1N1猪流感病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其应用。本发明通过序列多重比对，针对欧亚类禽型H1N1猪流感病毒、甲型H1N1(2009)猪流感病毒、经典型H1N1猪流感病毒及人源H1N1猪流感病毒的保守基因片段，设计出特异性强的检测欧亚类禽型H1N1猪流感病毒的引物和探针，用于实时荧光RT-PCR检测。实验结果表明使用本发明所提供的试剂盒检测欧亚类禽型H1N1猪流感病毒，特异性高，对病毒RNA检测灵敏度可达4.6×10-7ng/反应，不仅可以对待测猪群的鼻腔拭子、肺脏，气管等组织样品进行检测，还可检测鸡胚尿囊液，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，可成为欧亚类禽型H1N1猪流感病毒疫病诊断和流行病学调查的有用检测工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102277368B
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201010208250.6
申请日：2010-06-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种鸭病毒性肠炎病毒感染性重组克隆系统，其特征在于所述系统包括多个粘粒，每个粘粒中克隆有鸭病毒性肠炎病毒疫苗株基因片段，所述鸭病毒性肠炎病毒疫苗株基因片段含有相互重叠的区域，并拼接覆盖鸭病毒性肠炎病毒疫苗株全基因组，其中至少一个所述粘粒的复制非必须区中插入有外源基因。本发明还涉及鸭病毒性肠炎病毒感染性重组克隆系统的构建方法和应用。
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公开(公告)号：CN102277367B
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201010207207.8
申请日：2010-06-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明涉及一种鸭病毒性肠炎病毒感染性克隆系统，其特征在于所述系统包括多个粘粒，每个粘粒中克隆有鸭病毒性肠炎病毒疫苗株基因片段，所述鸭病毒性肠炎病毒疫苗株基因片段含有相互重叠的区域，并拼接覆盖鸭病毒性肠炎病毒疫苗株全基因组。本发明还涉及该种鸭病毒性肠炎病毒感染性克隆系统的构建方法和应用。
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公开(公告)号：CN102329891B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201110255250.6
申请日：2011-08-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一组用于H9亚型禽流感病毒检测的RT-LAMP引物组、检测方法及应用，所述的引物组由一对外引物，一对内引物和一对环引物组成；所述外引物对序列分别如SEQ ID No.1、2所示，内引物对序列分别如SEQ ID No.3、4所示，环引物对序列分别如SEQ ID No.5、6所示。本发明的引物组可用于制备H9亚型禽流感病毒检测的试剂盒，所述试剂盒包括：Reaction Mix；Enzyme Mix；DistilledWater；荧光检测试剂以及本发明的引物组。本发明检测试剂盒具有用样少、特异性强、敏感性高、快速准确等特点，为H9亚型禽流感的防控预警机制提供了简捷、有效的早期快速诊断途径。
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公开(公告)号：CN101477117B
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN200910001253.X
申请日：2009-01-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: G01N33/531 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感病毒和鸡传染性法氏囊病病毒的血清抗体的可视化蛋白芯片，包括以下方法制备得到：将上述4种病毒全蛋白分别进行纯化，稀释；将阳性对照血清，阴性对照与4种病毒蛋白分别点样于芯片载体上；干燥，固定，封闭，洗涤，即得。本发明以纯化的全病毒蛋白作为捕获抗原检测鸡血清中的病毒特异抗体，简化了制备工艺，降低了生产的成本，有较好的特异性，无交叉，结果可信度高，具有快速、简便、灵敏度高、特异性好等优点。在血清稀释6400倍时仍可检出抗体，灵敏度是传统的AGP检测方法的400倍。对现地血清样品进行检测，本发明蛋白芯片的检出率明显高于传统的AGP方法。
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公开(公告)号：CN102337353A
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201110255246.X
申请日：2011-08-31
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一组用于H5亚型禽流感病毒检测的RT-LAMP引物组、检测方法及应用，所述的引物组由一对外引物，一对内引物和一对环引物组成；所述外引物对序列分别如SEQ ID No.1、2所示，内引物对序列分别如SEQ IDNo.3、4所示，环引物对序列分别如SEQ ID No.5、6所示。本发明的引物组可用于制备H5亚型禽流感病毒检测的试剂盒，所述试剂盒包括：Reaction Mix；Enzyme Mix；Distilled Water；荧光检测试剂以及本发明的引物组。本发明检测试剂盒具有用样少、特异性强、敏感性高、快速准确等特点，为H5亚型禽流感的防控预警机制提供了简捷、有效的早期快速诊断途径。
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