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公开(公告)号：CN116514999A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310616956.3
申请日：2023-05-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 郝荣增 , 茹毅 , 杨洋 , 李亚军 , 卢炳州 , 刘华南 , 张贵财 , 李丹 , 冯涛 , 田宏 , 曹伟军 , 杨帆 , 张克山 , 朱紫祥 , 党文 , 秦晓东 , 马旭升
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种嵌合表达口蹄疫病毒多抗原表位融合蛋白、自组装纳米颗粒及其制备方法。本发明发现，将口蹄疫病毒抗原B细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的第138‑139位之间，将口蹄疫病毒抗原T细胞表位插入到氨基酸序列改造后的Encapsulin蛋白片段的C末端，能够实现目标蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达，并且能够成功自组装成蛋白笼纳米颗粒；所述蛋白笼纳米颗粒经抗原乳化后免疫豚鼠和小鼠，可刺激机体产生更高水平的病毒中和性抗体和IFN‑γ、IL‑2、IL‑6、IL‑10、TNF‑α等细胞因子，具有较好的免疫保护作用，可用于口蹄疫疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN115948466A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202310019982.8
申请日：2023-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N7/00 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/93 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及Tollip敲除细胞系的构建及作为小RNA病毒科病毒疫苗生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中Tollip基因表达能促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制；其次，本发明提供了一种特异性靶向Tollip的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向Tollip基因，结合CRISPR‑Cas9技术实现了Tollip基因的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒FMDV的复制，提高FMDV疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗尤其是FMDV疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114316036B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202210011206.9
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1，所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性，而不和A型毒株进行反应；而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN114807062A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210240926.2
申请日：2022-03-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒I73R基因条件性缺失毒株的构建及其作为疫苗的应用。本发明在基因Ⅱ型非洲猪瘟(African swine fever，ASF)亲本毒株ASFV CN/GS/2018中条件性敲除I73R基因构建了ASFV I73R基因条件性缺失毒株(vI73Ri)；所述vI73Ri是一株安全性高的减毒ASF候选疫苗株，对猪完全致弱、免疫猪无典型ASF临床症状、免疫后在猪血液内检测到非常低的病毒，且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控ASF疫情的候选疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN114316036A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210011206.9
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1，所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性，而不和A型毒株进行反应；而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114316035A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210010319.7
申请日：2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位，相较于现有抗体，显著提高了检测结果的灵敏度和特异性，适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测，是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号：CN107034309B
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN201610076566.1
申请日：2016-02-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA试剂盒及其用途，还公开了一种快速检测猪伪狂犬病毒的试纸条RPA试剂盒及其用途。该两种试剂盒分别包括SEQ ID NO.1及SEQ ID NO.2所示的引物及各自的探针，虽然针对同一靶标序列，但引物和探针的修饰碱基和检测平台不同。实验证明本发明的两个试剂盒的敏感性均为102拷贝/反应，并均只能特异性检测猪伪狂犬病毒。分别用本发明的两个试剂盒检测猪伪狂犬病毒疑似样品，结果表明这两个试剂盒的检测结果与qPCR的符合度均为100％。因此，本发明的两个试剂盒均能快捷、高效、灵敏的检测猪伪狂犬病毒，为猪伪狂犬病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号：CN116790519B
公开(公告)日：2025-05-06
申请号：CN202310649962.9
申请日：2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白和Y蛋白组成的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合，其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒；所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应；制备的九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株攻毒具有良好的免疫保护力，无生物安全风险；且所述九组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与九组分亚单位疫苗联合具有更好的免疫保护效力。
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公开(公告)号：CN119269792A
公开(公告)日：2025-01-07
申请号：CN202411399260.0
申请日：2024-10-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N21/78 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于检测技术领域，具体涉及一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的通用型试剂盒。本发明以表达的特定重组p122蛋白为基础，以待检血清为检测样本，建立了一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的双抗原夹心ELISA方法，所述方法包括包被抗原、封闭、加入待检样品和酶标抗原、显色和结果判定等步骤；具有特异性好、敏感性高、重复性好、成本低及可批量检测的优点，可为预防和控制牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒奠定一定的检测技术基础。
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公开(公告)号：CN116694583B
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202310649839.7
申请日：2023-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 茹毅 , 刘华南 , 郭建宏 , 郝荣增 , 田宏 , 曹伟军 , 卢炳州 , 杨帆 , 申超超 , 张伟 , 李亚军 , 杨洋 , 朱紫祥 , 石正旺 , 张克山 , 何继军 , 靳野 , 李丹 , 毛箬青 , 张贵财 , 党文 , 马旭升 , 秦晓东 , 刘湘涛
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原蛋白P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合，其中将至少一种抗原或其抗原表位的编码基因插入腺病毒骨架载体构建为表达所述抗原或其抗原表位的重组腺病毒；所述七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒组合能够产生较强的免疫反应；制备的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗对亲本非洲猪瘟强毒株的攻毒具有良好的免疫保护率，无生物安全风险；且所述的七组分抗原非洲猪瘟重组腺病毒疫苗与七组分亚单位疫苗联合，具有更好的免疫保护效力。
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