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公开(公告)号:CN114921397A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210619983.1
申请日:2022-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/125
Abstract: 本发明属于生物医药领域,涉及一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的枯草芽孢杆菌及应用。本发明将表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的重组质粒转化至枯草芽孢杆菌WB800N,获得了一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的重组枯草芽孢杆菌;所述重组枯草芽孢杆菌在高效表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的同时,具有良好的免疫反应性,能够诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答。还可以作为黏膜疫苗,经口服免疫后,产生较高水平的抗原特异性IgG抗体及黏膜sIgA抗体,升高外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的比例,刺激脾脏淋巴细胞增殖,并促进细胞因子IFN‑γ、IL‑2和IL‑4的表达。
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公开(公告)号:CN114316037A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011223.2
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性,而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN112076314B
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202011020241.4
申请日:2020-09-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 卢炳州 , 田宏 , 朱紫祥 , 张克山 , 曹伟军 , 刘永杰 , 靳野 , 马旭升 , 党文
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种A型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明以我国2013年A型口蹄疫病毒流行株(A/GDMM/2013)的三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计,并借助小泛素样融合蛋白(SUMO),筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白,且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装;最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30%以上,纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。用本发明方法制备的口蹄疫疫苗,对我国A型口蹄疫流行毒具有良好的保护作用,疫苗最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份。
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公开(公告)号:CN112852761A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110248651.2
申请日:2021-03-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株Δ20/40的构建及作为疫苗的应用。本发明采用基因工程手段在非洲猪瘟亲本毒株ASFVCN/GS/2018中联合缺失了MGF‑110‑9L基因和MGF‑360‑9L基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱、免疫猪健康,且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒(100HAD50剂量)提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN111996202A
公开(公告)日:2020-11-27
申请号:CN202010212908.4
申请日:2020-03-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨帆 , 朱紫祥 , 魏婷 , 曹伟军 , 刘华南 , 郑敏 , 张伟 , 田宏 , 张克山 , 刘永杰 , 党文 , 马旭升 , 李丹 , 茹毅 , 何继军 , 郭建宏 , 刘湘涛
IPC: C12N15/41 , C12N15/42 , C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种重组O型口蹄疫病毒VP1基因的塞内卡重组病毒、重组疫苗株及其制备方法和应用,涉及基因工程技术领域。本发明通过对SVV/FJ/001株进行基因缺失突变改造,同时在SVA cDNA中融合进O型口蹄疫病毒的VP1基因,得到塞内卡重组病毒,该重组病毒能够表达融合进的外源FMDV VP1基因,且表达产物具有良好的反应原性;制备得到的疫苗株抗原产能高,致病性显著降低甚至对猪无致病性,灭活疫苗免疫动物后不仅能激发SVA的免疫应答,而且能产生针对融合基因的免疫活性,该疫苗株显著提高了生物安全性,可用于塞内卡病毒及一种或多种非塞内卡病毒的防控。
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公开(公告)号:CN111925417A
公开(公告)日:2020-11-13
申请号:CN202010871941.8
申请日:2020-08-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医学技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.5所示。本发明的多肽能够通过同时促进猪机体中淋巴细胞和单核巨噬细胞增殖,从而促使猪机体产生广谱性免疫应答;并且,本发明的多肽能够促进猪体内ASFV抗原特异性免疫应答,因而能够作为ASFV亚单位疫苗的有效成分,增强猪的免疫应答。
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公开(公告)号:CN111773383A
公开(公告)日:2020-10-16
申请号:CN202010630218.0
申请日:2020-07-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 茹毅 , 刘华南 , 张贵财 , 杨帆 , 李丹 , 郭建宏 , 何继军 , 张娇燕 , 李亚军 , 马坤 , 伍春平 , 郝荣增 , 田宏 , 张克山 , 曹伟军 , 马旭升 , 党文 , 靳野
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种具有交叉保护作用的O型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明首先通过血清交叉中和试验,筛选中意外地发现对我国O型口蹄疫流行毒具有广泛交叉中和作用的毒株;以该毒株三种结构蛋白VP0、VP3和VP1的氨基酸序列为基础进行优化设计,并借助小泛素样融合蛋白(SUMO),筛选出单个质粒在大肠杆菌中同时高效、均一、可溶性表达这三种结构蛋白,且三种病毒结构蛋白成功在体外自组装;最终获得的目标蛋白约占菌体总蛋白30%-35%,纯化后目标蛋白产量最高可达150mg/L。由这三种口蹄疫病毒结构蛋白配制的口蹄疫疫苗,最小全保护免疫剂量可低至20μg/头份,且对我国多株O型口蹄疫流行毒具有广泛交叉保护作用。
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公开(公告)号:CN111748563A
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN202010661680.7
申请日:2020-07-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种可用作疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒株及其构建方法,该病毒株是亲本非洲猪瘟病毒ASFV CN/GS/2018分离株的基因缺失弱毒株。本发明发现了DP71L基因是对猪致病性致弱的新靶标基因,并发现联合丧失MGF360-18R基因、DP71L基因和DP96R基因编码蛋白的功能,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选疫苗株;所述减毒非洲猪瘟候选疫苗株高剂量(104HAD50)免疫猪后,对猪完全致弱,免疫猪健康,不发病,与免疫猪同居猪核酸也呈阴性,不水平传播,具有较好安全性;且能够对ASFV CN/GS/2018强毒株的攻毒提供100%免疫保护,可作为安全和有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN107894508A
公开(公告)日:2018-04-10
申请号:CN201710771982.8
申请日:2017-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/532
CPC classification number: G01N33/6854 , G01N33/532 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种用于塞内卡病毒抗体检测的固相竞争ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括塞内卡病毒灭活抗原包被的酶标板以及HRP标记的塞内卡病毒兔抗IgG。本发明使用HRP标记兔抗IgG,替代传统ELISA中的一抗和二抗,简化了操作步骤。同时通过改变包被稳定工艺将SVV灭活抗原包被到固相载体表面,改变酶标抗体稀释液的配制工艺,可使酶标抗体工作液稳定保存而不改变其活性和效价,建立了特异检测SVV抗体的固相竞争ELISA试剂盒及其检测方法。本发明的提出弥补了SVV ELISA抗体检测的空缺,克服了现有VNT检测SVV抗体检测中重复性和敏感性低、操作程序繁琐的问题,为SVV抗体检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN106483291A
公开(公告)日:2017-03-08
申请号:CN201610778727.1
申请日:2016-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C07K16/10
CPC classification number: G01N33/577 , C07K16/1009 , C07K2317/33 , G01N33/535 , G01N33/56983
Abstract: 本发明公开了一种基于型特异性单抗的Asia1型口蹄疫病毒抗体固相竞争ELISA试剂盒。含有HRP标记的Asia1型口蹄疫特异性单抗。本发明的试剂盒可用于Asia1型口蹄疫病毒抗体水平监测。替代现有ELISA中口蹄疫兔抗、豚鼠抗血清及抗豚鼠酶标抗体,简化ELISA方法步骤,提高稳定性、大幅度缩短检测时间,从24h缩短至1.5小时内,突破了原来ELISA需要一抗和二抗等反应过程。
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