公开(公告)号：CN114703189A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210336615.6

申请日：2022-03-31

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 詹亚光 ,  高尚珠 ,  曾凡锁 ,  何利明 ,  刘跃杰 ,  单超然 ,  何碧莹

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/70 ,  C12N15/84 ,  C12Q1/6897 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.3及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.3，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性，为水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列。

公开(公告)号：CN113430194A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202011377672.6

申请日：2020-11-30

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 曾凡锁 ,  高尚珠 ,  麻凯 ,  齐凤慧 ,  陈晓慧 ,  詹亚光

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法，以白桦中高度保守的BpPDS和BpUVR8为靶基因，在其保守结构域上分别选取了1个和4个靶位，共设计了5个靶序列，构造了pU3b‑sgRNA‑UBQ1‑Cas9转化载体。利用瞬时转染初步鉴定了5个靶序列与白桦基因组的适配度，初步说明BpPDS和BpUVR8‑1这两个靶位可以编辑白桦基因组；稳定的农杆菌转化法被用于外源DNA的整合，BpPDS与BpUVR8‑1稳定遗传转化的编辑效率分别为41.67％、100％，纯合单株的百分比分别为37.5％、100％。该方法的建立，一方面可用于初步鉴定载体的活性，筛选活性较大的靶位，提高编辑效率；另一方面可用于获取白桦CRISPR/Cas9突变体植株，缩短育种周期，为深入研究白桦基因功能及其基因资源的开发利用提供宝贵的材料基础。

公开(公告)号：CN119949243A

公开(公告)日：2025-05-09

申请号：CN202510237882.1

申请日：2025-03-03

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 曾凡锁 ,  蒋洪璐 ,  高尚珠 ,  何晓峰 ,  赵海峰 ,  汤莹 ,  田广宇 ,  何利明 ,  辛颖 ,  齐凤慧 ,  詹亚光

IPC: A01H1/06 ,  A01C1/00

Abstract: 本发明属于植物育种技术领域，具体涉及一种高效水曲柳诱变育种方法及应用。该方法结合物理诱变(60Co‑γ射线辐射)和化学诱变(EMS、秋水仙素、叠氮化钠、5‑氮胞苷)两大类诱变方式，并通过单一诱变、物理‑化学叠加诱变、化学‑化学叠加诱变的组合策略，优化诱变剂量、浓度和时间参数，显著提高了水曲柳遗传变异频率。本发明通过对不同诱变方式下的水曲柳苗期性状(株高、地径、复叶长、复叶宽、复叶面积等)进行全面统计分析，筛选出最佳诱变组合，并构建数据库。本发明提高了水曲柳的诱变效率和遗传多样性，为水曲柳优良新品种的选育提供了科学依据和技术支持。

公开(公告)号：CN118600078A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410752576.7

申请日：2024-06-12

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 辛颖 ,  马荟 ,  李士杰 ,  高尚珠 ,  高丹 ,  隋君 ,  王丽 ,  杜英军 ,  陈满菊 ,  张晨晨 ,  刘烨 ,  沃熹雅 ,  仁青草 ,  杨丽英

IPC: C12Q1/6895

Abstract: 本发明涉及一种基于径向生长的水曲柳耐寒基因型选择方法及其应用。该方法通过确定研究区历史上的极端低温事件，获取极端低温事件发生时、发生前及发生后3年的年轮宽度，计算出水曲柳在极端低温事件下的生态弹性(恢复力、抵抗力、恢复弹力)，结合径向生长和生态弹性指数确定出径向生长好耐寒性优良的水曲柳基因型。对水曲柳耐寒良种选育和定向培育具有重要的研究意义及应用价值，可实现高效、定向和精准的育种。

公开(公告)号：CN118516406A

公开(公告)日：2024-08-20

申请号：CN202410735270.0

申请日：2024-06-07

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 曾凡锁 ,  高尚珠 ,  景秋菊

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种水曲柳基因编辑系统及其应用，包括以下步骤：①根据水曲柳FmPDS2核苷酸序列，选择外显子区域设计一条靶序列sgRNA4；②构建水曲柳基因编辑载体；③将步骤②所获重组载体转入农杆菌，瞬时转化水曲柳；④检测靶序列活性及效率；⑤将步骤③所获农杆菌对水曲柳下胚轴进行稳定遗传转化；⑥获得转基因植株。本发明首次获得了水曲柳稳定基因编辑植株，为水曲柳功能基因研究、基因资源开发利用、突变体构建及新种质创制提供了有力的技术支持。

公开(公告)号：CN114703188A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210336613.7

申请日：2022-03-31

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 曾凡锁 ,  高尚珠 ,  齐凤慧 ,  詹亚光 ,  辛颖 ,  关欣 ,  张桂芹 ,  卢晗

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.6及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.6，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色及gus基因转录表达验证，证明该启动子具有高效转录活性。实验证明四种水曲柳U6基因截短启动子proFmU6.6.1、proFmU6.6.2、proFmU6.6.3、proFmU6.6.4均有启动活性，并成功在CRISPR/Cas9系统中应用。水曲柳U6基因启动子proFmU6.6克隆及启动子活性的表达分析，为研究水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列，也可以实现对水曲柳高效精准的种质创新与品种遗传改良。