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公开(公告)号：CN114517175A
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202011311016.6
申请日：2020-11-20
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种基因工程菌及其应用。所述基因工程菌为过表达聚酮合成延长单位及修饰相关的基因的那波链霉菌交沙霉素变种(Streptomyces narbonensis subsp.josamyceticus)；所述聚酮合成延长单位及修饰相关的基因包括：如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第9474‑10607位和/或如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第65176‑66387位。本发明还公开了所述基因工程菌的应用。本发明通过导入与交沙霉素生物合成途径中与聚酮合成延长单位及修饰相关的基因的表达载体，实现了交沙霉素产量的提高(可达23％)，并获得了提高交沙霉素产量的基因工程菌。
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公开(公告)号：CN108147976A
公开(公告)日：2018-06-12
申请号：CN201611110609.X
申请日：2016-12-06
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
IPC: C07C231/24 , C07C237/26
Abstract: 本发明提供一种去甲基金霉素的提取方法，其包括如下步骤：调发酵液的pH值至酸性，发酵液与菌体固液分离，得液体1；所得液体1与3-4％的阳离子表面活性剂，在pH值为8.0-8.5，发生络合反应，固液分离，得络合物1；阳离子表面活性剂为十四烷基三甲基氯化铵和/或十六烷基三甲基氯化铵；所述百分比为阳离子表面活性剂的质量占液体1的质量的百分比；调所得络合物1的pH值，与尿素发生络合反应，固液分离，得络合物2；调所得络合物2的pH值，使之溶解，固液分离，得液体2；用盐酸调节所得液体2的pH值，降温、结晶，得DMCTC盐酸盐。该甲基金霉素的提取方法，可获得纯度≥94％的DMCTC盐酸盐。
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公开(公告)号：CN119432782A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411557919.0
申请日：2024-11-04
Applicant: 上海医药工业研究院有限公司 , 中国医药工业研究总院有限公司
Abstract: 本发明属于生物催化剂技术领域，公开了一种烯还原酶突变体及其催化制备布瓦西坦合成中间体的用途。本发明烯还原酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，该突变体与羰基还原酶K1、葡萄糖脱氢酶组成的复合酶，能够以化合物5‑羟基‑4‑正丙基‑2‑呋喃酮为底物，还原双键与脱除羟基，得到化合物(R)‑4‑丙基二氢呋喃‑2(3H)‑酮，催化所得(R)‑4‑丙基二氢呋喃‑2(3H)‑酮的ee值达93.0％，并能进一步通过非对映异构体结晶得到ee值＞99.8％的(R)‑4‑丙基二氢呋喃‑2(3H)‑酮，可用于布瓦西坦关键中间体(R)‑4‑丙基二氢呋喃‑2(3H)‑酮的高效、绿色制备。
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公开(公告)号：CN113046251B
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN201911379415.3
申请日：2019-12-27
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种基因工程菌、质粒组合、利用质粒组合制备所述基因工程菌及所述基因工程菌的用途。其中所述基因工程菌可过表达异源脯氨酸羟化酶基因，其中所述基因工程菌的出发菌株为丝状真菌Glarea lozoyensis，且所述异源脯氨酸羟化酶基因定点整合于所述基因工程菌的基因组上。所述质粒组合包括cas9表达质粒和包含异源脯氨酸羟化酶基因的sgRNA表达质粒，可用于制备本发明的基因工程菌。使用本发明的基因工程菌，不需添加脯氨酸，且无需纯化即能制备高纯度的PB0、且无PC0副产物产生，在工业上具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN113046251A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201911379415.3
申请日：2019-12-27
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种基因工程菌、质粒组合、利用质粒组合制备所述基因工程菌及所述基因工程菌的用途。其中所述基因工程菌可过表达异源脯氨酸羟化酶基因，其中所述基因工程菌的出发菌株为丝状真菌Glarea lozoyensis，且所述异源脯氨酸羟化酶基因定点整合于所述基因工程菌的基因组上。所述质粒组合包括cas9表达质粒和包含异源脯氨酸羟化酶基因的sgRNA表达质粒，可用于制备本发明的基因工程菌。使用本发明的基因工程菌，不需添加脯氨酸，且无需纯化即能制备高纯度的PB0、且无PC0副产物产生，在工业上具有广泛的用途。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108728390B
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN201710258568.7
申请日：2017-04-19
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种生产A82846B的基因工程菌，即在出发菌东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)的基因组中整合了内源卤化酶基因chaA，或者与内源卤化酶基因chaA同源性不小于84％的外源卤化酶基因的工程菌。本发明还公开了上述基因工程菌的制备方法，及将上述基因工程菌发酵且从发酵液中获得A82846B的方法。本发明基因工程菌过表达导入的卤化酶基因并生产A82846B，其A82846B的产量(mg/L)或目的产物在总产物中的占比有显著地提高，本发明提高了生产效率及降低生产成本的同时，还减少了环境污染。
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公开(公告)号：CN107557415B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201610505436.5
申请日：2016-06-30
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种发酵培养基及生产奥利万星前体A82846B的生产工艺。该发酵培养基用于生产奥利万星前体A82846B，其包含有机碳源、有机氮源、矿物质和水；有机碳源包括葡萄糖5～10％；有机氮源包括酵母粉0.3～1.0％；百分比为相对于发酵培养基的质量百分比。本发明的发酵培养基使A82846B的产量大幅度提高，且两种杂质A82846A和A82846C比例显著降低。本发明的生产奥利万星前体A82846B的生产工艺，能够有效地提高A82846B的产量，并且杂质含量低，适用于发酵罐生产，能够高效生产奥利万星前体A82846B。
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公开(公告)号：CN107557415A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201610505436.5
申请日：2016-06-30
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种发酵培养基及生产奥利万星前体A82846B的生产工艺。该发酵培养基用于生产奥利万星前体A82846B，其包含有机碳源、有机氮源、矿物质和水；有机碳源包括葡萄糖5～10％；有机氮源包括酵母粉0.3～1.0％；百分比为相对于发酵培养基的质量百分比。本发明的发酵培养基使A82846B的产量大幅度提高，且两种杂质A82846A和A82846C比例显著降低。本发明的生产奥利万星前体A82846B的生产工艺，能够有效地提高A82846B的产量，并且杂质含量低，适用于发酵罐生产，能够高效生产奥利万星前体A82846B。
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公开(公告)号：CN119193345A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202310773781.7
申请日：2023-06-27
Applicant: 上海医药工业研究院有限公司 , 中国医药工业研究总院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生产纽莫康定B0的基因工程菌及其构建与应用，所述基因工程菌过表达细胞色素P450酶基因，其中所述基因工程菌的出发菌株为丝状真菌Glarea lozoyensis。通过在丝状真菌中表达细胞色素P450酶基因，来降低发酵产物中的PB5/PB0比例。PB5/PB0的比值可由2.9％至少下降至1％。
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公开(公告)号：CN114517175B
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202011311016.6
申请日：2020-11-20
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种基因工程菌及其应用。所述基因工程菌为过表达聚酮合成延长单位及修饰相关的基因的那波链霉菌交沙霉素变种(Streptomyces narbonensis subsp.josamyceticus)；所述聚酮合成延长单位及修饰相关的基因包括：如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第9474‑10607位和/或如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第65176‑66387位。本发明还公开了所述基因工程菌的应用。本发明通过导入与交沙霉素生物合成途径中与聚酮合成延长单位及修饰相关的基因的表达载体，实现了交沙霉素产量的提高(可达23％)，并获得了提高交沙霉素产量的基因工程菌。
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