公开(公告)号：CN109260462B

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN201810974329.6

申请日：2018-08-24

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 ,  王学锋 ,  武文漫 ,  丁秋兰

Inventor： 王学锋 ,  武文漫 ,  丁秋兰

IPC: A61K38/48 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明涉及一种凝血酶原突变体蛋白及其编码核酸的应用，用于制备基因治疗药物，包括将其与启动子和/或终止序列连接并构建表达质粒。本发明突变体蛋白及其编码核酸具有很高的凝血活性，可以高效地促进血液凝血，提升机体整体凝血功能，具有很好的基因治疗、基因编辑与重组蛋白替代治疗前景。

公开(公告)号：CN112126636A

公开(公告)日：2020-12-25

申请号：CN202010941171.X

申请日：2020-09-09

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 ,  武文漫 ,  王学锋 ,  丁秋兰

Inventor： 武文漫 ,  王学锋 ,  丁秋兰

IPC: C12N9/64 ,  C12N15/57 ,  A61K38/48 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明涉及一种高活性凝血因子XI突变体Ala570Thr(A570T)，核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑4，氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。本发明在由酶原状态活化成为具有活性的酶后对其生理抑制物产生抵抗，因此具有很高的凝血活性，对非生理性底物具有更强的催化能力，应用于出血性疾病的治疗，具有很好的基因治疗、基因编辑与重组蛋白替代治疗前景。

公开(公告)号：CN107326064A

公开(公告)日：2017-11-07

申请号：CN201610278323.6

申请日：2016-04-29

Applicant: 天昊生物医药科技(苏州)有限公司 ,  上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 姜正文 ,  王学锋 ,  张希 ,  沈蕾 ,  丁秋兰 ,  武文漫

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2537/16 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/107

Abstract: 本发明公开了一种基因倒位突变检测方法，利用常规LD-PCR(长距离PCR)体系在较低PCR循环数下获得预扩增产物，然后采用多重荧光竞争性PCR拷贝数定量技术对预扩增产物进行野生型特异扩增片段以及突变型特异扩增片段同时进行拷贝数定量，根据预扩增片段的扩增谱来确定样本的基因型。本发明通过不要求野生型和突变型特异扩增产物片段大小有区别，减少PCR扩增循环数，去除琼脂糖电泳以及对扩增产物量进行准确定量等操作，有效克服了传统等位基因特异性PCR检测方法的缺点，具备了检测更快速、操作更简单以及检测更准确的优点。

公开(公告)号：CN107012238A

公开(公告)日：2017-08-04

申请号：CN201710309444.7

申请日：2017-05-04

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 ,  天昊生物医药科技(苏州)有限公司

Inventor： 王学锋 ,  丁秋兰 ,  武文漫 ,  吴希 ,  姜正文 ,  刘波 ,  杨锋 ,  田彦

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种易栓相关基因突变检测试剂盒，包括：ddH2O；10×buffer(Takara)；2×GC buffer I；dNTP；MgCl2；HSTaq；多重PCR引物混合液；Illumina I5/I7引物一系列试剂。本发明采用多重PCR富集二代测序技术全面系统的检测PROC、PROS1、THBD、PROCR、F5、AT3、HCF2、F2、F7、F8、F9、F10、F11、F12、PLG、ADAMTSl3、HRG及TFPI 18个基因的全部外显子及调控区的点突变，还针对PLAT、FGG和HABP2三个基因特定的多态性位点进行检测。本试剂盒旨在应用于生物学研究和分子诊断由上述基因缺陷导致的易栓症。具有检测范围广、通量高、检测方法快速准确、检测准确性高、成本低廉等优点。

公开(公告)号：CN106497949A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610898732.6

申请日：2016-10-14

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 ,  四川大学

Inventor： 王学锋 ,  武文漫 ,  丁秋兰 ,  董飚

IPC: C12N15/57 ,  C12N9/64 ,  C12N15/864 ,  A61K38/48 ,  A61K48/00 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明涉及一种高活性凝血因子IX突变体、重组蛋白与融合蛋白的制备与应用，突变体核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。制备方法包括如下步骤：(1)将凝血因子IX基因连入载体中，得到重组载体；(2)将上述重组载体转化宿主细胞，得到表达突变凝血因子IX蛋白细胞克隆；(3)于无血清培养基中连续灌流培养上述细胞克隆，诱导重组高活性凝血因子IX突变蛋白的表达；(4)分离纯化、过滤，最后灌装、冻干，即得。本发明证实了IX突变Arg384Gln确实导致凝血因子IX活性升高，而且没有导致除凝血机制异常之外的其他危害，对人体是安全的，打破了现有研究的技术偏见，具有很好的基因治疗和替代治疗前景。

公开(公告)号：CN104046699B

公开(公告)日：2016-03-02

申请号：CN201410322475.2

申请日：2014-07-08

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 ,  天昊生物医药科技(苏州)有限公司

Inventor： 王学锋 ,  姜正文 ,  丁秋兰 ,  张希 ,  戴菁 ,  姚忻岑 ,  陆晔玲 ,  林琳

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种F9基因拷贝数变异检测试剂盒，包括2×PCR缓冲液；竞争性DNA；PCR引物混合液；Taq DNA聚合酶。AccuCopy技术的精确度高，变异系数小于5%，并且结果的准确性也高。因此，本项发明采用了AccuCopy技术开发F9基因拷贝数变异检测试剂盒，并检测发现了约15例有大缺失突变的血友病B患者，临床应用效果良好。