一种杂交鹅掌楸亲缘关系的鉴定方法

    公开(公告)号:CN108660196A

    公开(公告)日:2018-10-16

    申请号:CN201810543423.6

    申请日:2018-05-29

    Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸亲缘关系的鉴定方法及其专用试剂盒,该方法包括:1)提取杂交鹅掌楸叶片DNA;2)进行PCR检测;3)用引物18.2能特异性扩增出400bp的产物的母本为中国鹅掌楸,能特异性扩增出382bp的产物母本为北美鹅掌楸,再用引物700对中国鹅掌楸的进行PCR扩增,能特异性扩增出700bp产物的母本为中国鹅掌楸西部种源,能特异扩增出242bp产物的母本则为中国鹅掌楸东部种源;对北美鹅掌楸的用引物700进行PCR扩增,均特异获得700bp的产物。本发明可对幼苗阶段的杂交鹅掌楸天然林进行有效鉴定,具有速度快,效率高,结果准确,重复性与稳定性好等优点。

    一种杂交鹅掌楸LhMKK2基因及其表达蛋白和应用

    公开(公告)号:CN104293808B

    公开(公告)日:2017-06-30

    申请号:CN201410587281.5

    申请日:2014-10-29

    Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhMKK2基因及其表达蛋白和应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明在已建立完善的杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生体系﹑且已获得部分转录组数据的基础上,同源克隆获得杂交鹅掌楸LhMKK2基因全长,命名为LhMKK2,通过基因表达分析,证明了杂交鹅掌楸LhMKK2基因在植物中的广泛表达,参与植株的生长发育,以及逆境胁迫响应过程,通过对其功能分析发现,过表达LhMKK2基因增强植株对盐胁迫响应的抗性,影响植株的生长发育,可为开展杂交鹅掌楸抗逆性分子育种提供理论依据,并进一步在植物抗逆境胁迫中有较广泛的应用。

    一种利用双向电泳体系获取北美鹅掌楸花蜜蛋白质二维电泳图谱的方法

    公开(公告)号:CN106198691A

    公开(公告)日:2016-12-07

    申请号:CN201610760994.6

    申请日:2016-08-30

    CPC classification number: G01N27/44778 G01N1/34

    Abstract: 本发明公开了一种利用双向电泳体系获取北美鹅掌楸花蜜蛋白质电泳图谱的方法,将花蜜样品采用超微滤膜过滤后,并利用蛋白质超滤浓缩纯化柱浓缩纯化花蜜蛋白质,然后利用Bradford法检测纯化浓缩后花蜜蛋白浓度,然后一维十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳预检测北美鹅掌楸花蜜蛋白质分子量分布范围,最后根据一维电泳结果选取适宜标准蛋白和适宜长度、pH范围的胶条采用双向电泳体系分离北美鹅掌楸花蜜蛋白质,获得二维电泳图谱。本发明方法具有操作简单、蛋白提取效率高、干扰物质少的特点,适合于液体样品此类特殊材料,并可获得分辨率高、蛋白点清晰、数目较多、分布均匀、背景清楚的高质量双向电泳凝胶图谱,且实验重复性和稳定性好。

    一种杉木遗传转化方法
    155.
    发明授权

    公开(公告)号:CN103088058B

    公开(公告)日:2014-10-22

    申请号:CN201310035666.6

    申请日:2013-01-30

    Abstract: 本发明公开了一种杉木遗传转化方法,包括:转化受体的建立,农杆菌菌液制备,侵染,脱菌培养和筛选培养。该杉木遗传转化方法,以杉木悬浮细胞系为受体,以GUS基因为报告基因通过农杆菌介导的方法进行遗传转化,通过体细胞胚胎发生方式实现植株再生,建立起稳定高效的杉木遗传转化体系。利用本技术体系,可以以较低成本对杉木进行遗传改良,将基础理论研究中获得的抗病、抗逆、木材形成等相关的基因进行遗传转化,获得具有速生、抗病、抗逆性强等特点的优质杉木品种。

    一种杂交鹅掌楸LhPIN3基因及其应用

    公开(公告)号:CN104004772A

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201410259910.1

    申请日:2014-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhPIN3基因及其应用,该杂交鹅掌楸LhPIN3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明在建立成熟的杂交鹅掌楸体胚发生体系的基础上,克隆生长素运输蛋白基因LhPIN3,通过表达分析,证明了杂交鹅掌楸的LhPIN3基因在杂交鹅掌楸体胚发生过程中对胚性细胞发育和体胚苗生长有较大的影响,其过表达试验发现LhPIN3的过表达会影响植株的生长发育,另外LhPIN3的表达还可以部分拯救拟南芥LhPIN3基因功能完全丧失的pin1突变体,使其恢复表型,开花并结出荚果,因此可应用于植物体胚发生、不定根诱导、不定芽的诱导和分化等,具有很好的应用前景。

    一种胚性材料的超低温冷冻保存方法

    公开(公告)号:CN102657152B

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:CN201210135145.3

    申请日:2012-05-04

    Abstract: 本发明公开了一种胚性材料的超低温冷冻保存方法,包括以下步骤:取待保存的胚性材料接种入高渗液体培养基,25℃培养3~10d;过滤胚性材料装入冷冻管,加入复合玻璃化保护剂,0℃放置脱水0~70min,然后装入冷冻盒直接投入液氮速冻,液氮中长期保存即可。本发明的胚性材料的超低温冷冻保存方法,操作简单,方便可行,解决了林木体胚产业化的重要瓶颈问题,可实现胚性材料长期保存到1年以上,并能使其保持高频增殖能力,具有很好的实用性,能够产生很好的经济效益和社会效应。

    一种鹅掌楸的多酚类提取物及其提取方法和应用

    公开(公告)号:CN102335233B

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201110225372.0

    申请日:2011-08-08

    Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸的多酚类提取物及其提取方法和应用,鹅掌楸的多酚类提取物由如下方法得到:取鹅掌楸植物材料,35℃烘干,粉碎;用95%乙醇提取,蒸发去除溶剂,得残渣;用氯仿溶解残渣,过滤,得滤液和第一残渣,减压蒸馏滤液,得多酚类提取物;甲醇溶解第一残渣,减压蒸馏溶剂,得多酚类提取物。该鹅掌楸的多酚类提取物,提取方便,多酚类提取物含量高,可工业化规模化生产,具有明显的清除动物氧自由基、抑制动物肿瘤细胞的产生、增殖与转移作用,在治疗癌症细胞上很有实用性,能够产生很好的经济效益和社会效益。

    一种杉木体细胞胚胎发生方法

    公开(公告)号:CN103070074A

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201310035599.8

    申请日:2013-01-30

    Abstract: 本发明公开了一种杉木体细胞胚胎发生方法,包括:胚性胚柄细胞团的起始诱导,EMS的维持与增殖和体胚发育与成熟;其中,体胚发育与成熟可采用间接体胚发生方式或直接体胚发生方式该杉木体细胞胚胎发生方法,能有效改善常规液体悬浮系建立过程中的褐化现象,启动低密度条件下的细胞分裂,维持胚柄细胞的稳定性,从而建立稳定增殖的液体悬浮细胞系;通过直接和间接的体胚发生方式,可以将杉木体胚发生的频率最多提高20倍左右,很好地解决了因杉木体胚发生体系不完善而引起的体胚发生频率低的问题,节约了成本,为实现杉木工厂化生产准备了条件,加速其实现产业化生产的步伐。

    一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法

    公开(公告)号:CN102217534B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201110097798.2

    申请日:2011-04-19

    Abstract: 本发明公开了一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法,该方法包括:在诱导培养基上诱导未成熟胚的胚性愈伤组织、采用增殖培养基进行胚性愈伤组织增殖、采用培育培养基和生长培养基分别进行胚状体的发育和成熟,直至长成完整小苗。本发明的福建山樱花体细胞胚胎发生技术为福建山樱花的大规模无性繁殖育苗提供一种周期短、繁殖率高、成本低廉的方法,有效解决了福建山樱花现存林分极为稀少、种子成熟时极易爆裂、种子的采收贮存与发芽极为困难、传统育种方法困难、且育种效率低,无法满足园林绿化及生产需要问题。

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