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公开(公告)号：CN102640745A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210135123.7
申请日：2012-05-04
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种胚性材料的超低温冷冻保存复苏方法，包括：取待保存的胚性材料接种入高渗液体培养基，25℃培养3~10d；过滤胚性材料装入冷冻管，加入复合玻璃化保护剂，0℃脱水0～70min，然后装入冷冻盒直接投入液氮速冻，液氮中长期保存；取保存的材料依次经过洗涤、高渗培养、低渗培养、常规培养即可复苏。本发明的胚性材料的超低温冷冻保存方法，操作简单，方便可行，解决了林木体胚产业化的重要瓶颈问题，可实现胚性材料长期保存到1年以上，并能使其保持高频增殖能力，具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效应。
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公开(公告)号：CN102037896B
公开(公告)日：2012-04-11
申请号：CN201010298850.6
申请日：2010-09-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚发生同步化调控方法。该方法利用生长激素调节机理，逐步降低2，4-D浓度，附加0.5mg·L-1KT诱导出较为均一的胚性细胞团，然后采用机械过筛的方法将胚性细胞团分级培养，并根据细胞团大小和体胚发生方式的不同，选用不同的后续同步化控制方法。经上述同步化调控后，在球形胚阶段的经分级筛选的杂交鹅掌楸体胚发育同步率达90％左右；而在心形及鱼雷形胚阶段的分级处理同步化率在室温条件下为40％左右，经过适当时间的冷藏会使同步化的比率有所提高；由球形胚阶段的材料发育而来的成熟体胚向再生植株转化率可达70％～80％。
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公开(公告)号：CN102217534A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110097798.2
申请日：2011-04-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法，该方法包括：在诱导培养基上诱导未成熟胚的胚性愈伤组织、采用增殖培养基进行胚性愈伤组织增殖、采用培育培养基和生长培养基分别进行胚状体的发育和成熟，直至长成完整小苗。本发明的福建山樱花体细胞胚胎发生技术为福建山樱花的大规模无性繁殖育苗提供一种周期短、繁殖率高、成本低廉的方法，有效解决了福建山樱花现存林分极为稀少、种子成熟时极易爆裂、种子的采收贮存与发芽极为困难、传统育种方法困难、且育种效率低，无法满足园林绿化及生产需要问题。
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公开(公告)号：CN102037896A
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN201010298850.6
申请日：2010-09-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚发生同步化调控方法。该方法利用生长激素调节机理，逐步降低2，4-D浓度，附加0.5mg·L-1KT诱导出较为均一的胚性细胞团，然后采用机械过筛的方法将胚性细胞团分级培养，并根据细胞团大小和体胚发生方式的不同，选用不同的后续同步化控制方法。经上述同步化调控后，在球形胚阶段的经分级筛选的杂交鹅掌楸体胚发育同步率达90％左右；而在心形及鱼雷形胚阶段的分级处理同步化率在室温条件下为40％左右，经过适当时间的冷藏会使同步化的比率有所提高；由球形胚阶段的材料发育而来的成熟体胚向再生植株转化率可达70％～80％。
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公开(公告)号：CN101112178B
公开(公告)日：2011-03-09
申请号：CN200710131251.3
申请日：2007-09-07
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种杂交鹅掌楸无性系营养体悬浮细胞系诱导体细胞胚胎发生和植株再生的方法，采用母树不同部位的芽、茎尖、叶、花器官及新枝为体细胞胚胎发生诱导材料，经历愈伤组织诱导，悬浮细胞系建立和增殖，悬浮细胞胚胎发育诱导，胚胎发育成熟、体胚萌发和植株再生阶段获得幼苗。本方法突破了无法直接用杂交鹅掌楸成年树营养体诱导体细胞胚胎发生和植株再生技术的难关，为工厂化育苗提供了一种周期短、繁殖率高、成本低廉的新方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119242689A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411403440.1
申请日：2024-10-09
Applicant: 南京林业大学 , 福建金硕生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhDof6基因及其表达蛋白和应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明公开的杂交鹅掌楸LhDof6基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建杂交鹅掌楸LhDof6基因的表达载体后，将表达载体转化到杂交鹅掌楸中；培育筛选并获得抗非生物胁迫能力显著提高的转基因杂交鹅掌楸植株。本发明公开的LhDof6基因促进了体胚苗下胚轴伸长、使植株叶片颜色更加深绿、促进植株叶片叶绿素的合成；提高了杂交鹅掌楸植株的耐寒性，提高了杂交鹅掌楸在极端环境的存活率；提高了植株的抗冻能力，降低了杂交鹅掌楸植株在经历冻害后的死亡率。
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公开(公告)号：CN117604018B
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202311501796.4
申请日：2023-11-10
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的杂交鹅掌楸转基因方法，属于遗传转化技术领域。本发明的发根农杆菌介导的杂交鹅掌楸转基因方法，将杂交鹅掌楸顶芽接种于发根农杆菌平板菌中，共培养并且筛选得到根部转化的嵌合体杂交鹅掌楸转基因植株。本发明构建的转基因植株根系的根尖处具有较强绿色荧光，而未转化根尖无绿色荧光；诱导获得的杂交鹅掌楸荧光毛状根中，rolB、NeoR、TIP和SBP基因均能扩增出条带，表明这些荧光毛状根均为发根农杆菌诱导的转基因毛状根，使用该体系将目的基因转入杂交鹅掌楸根系中是快速可行的。
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公开(公告)号：CN117770132B
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202311821621.1
申请日：2023-12-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H1/08
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导四倍体杂交鹅掌楸C136的方法，属于植物快繁技术领域。本发明将杂交鹅掌楸C136组培苗接种在继代培养基中进行继代培养；获得杂交鹅掌楸C136顶芽后接种到含有秋水仙素的液体诱导培养基中进行加倍诱导处理；将加倍诱导处理后的顶芽接种到生根培养基进行植株再生培养，筛选出染色体数为4n的生根苗；将生根苗再生植株的茎段接种到不定芽诱导培养基上，最终纯化培养筛选得到四倍体杂交鹅掌楸C136。结果表明，在含0.3％(w/v)秋水仙素的液体诱导培养基中处理72h，四倍体诱导率最高。该方法简单高效，为杂交鹅掌楸的四倍体育种提供了一种创新的技术手段。
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公开(公告)号：CN117551655A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311306968.2
申请日：2023-10-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了杂交鹅掌楸耐低温基因CBFs及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明杂交鹅掌楸耐低温基因CBFs，包括LhCBF6基因和/或LhCBF7基因和/或LhCBF9基因，其核苷酸序列分别对应SEQ ID NO.1‑3。本发明以杂交鹅掌楸的叶片组织为材料，通过克隆得到杂交鹅LhCBF6、LhCBF7、LhCBF9基因，在此基础上构建其过表达载体，转入拟南芥中，得到抗性转基因植株。结果表明转入鹅掌楸LhCBF6、LhCBF7、LhCBF9基因可以显著增强拟南芥对低温胁迫的耐性。
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