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公开(公告)号:CN118389370A
公开(公告)日:2024-07-26
申请号:CN202410815874.6
申请日:2024-06-24
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及微生物领域,具体涉及诺卡氏菌YB‑2及其降解呕吐毒素的应用。该菌株的保藏编号为CGMCC No.26563。该菌株对能够将有毒化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇完全降解,反应过程不可逆,反应条件温和,最终将其完全转化后,被自身利用,不会引起二次污染。本发明提供的菌株可用于制备DON的生物脱毒制剂。本发明能够有效解决谷物原料、饲料及加工副产物中的呕吐毒素污染问题。本发明提供的菌株可应用于被DON污染的土壤或水体等各种生态系统,达到生态体修复的目的。
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公开(公告)号:CN117683802B
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410145497.X
申请日:2024-02-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种通过甲基苹果酸途径生产异亮氨酸的罗尔斯通氏菌工程菌株及其构建与生产方法。本发明通过表达甲基苹果酸合酶基因建立甲基苹果酸途径合成异亮氨酸;通过改造内源N‑乙酰葡糖胺转运系统实现菌株对葡萄糖的转运代谢;通过表达支链氨基酸外泌蛋白基因实现异亮氨酸在发酵液中的累积。通过调节辅酶平衡、解除反馈抑制、敲除代谢旁路、采用补料上罐发酵显著提升工程菌株通过甲基苹果酸途径合成异亮氨酸的生产能力。工程菌株以葡萄糖作为唯一碳源,发酵36小时的异亮氨酸产量为857 mg/L,以CO2作为唯一碳源,发酵25天的异亮氨酸产量为105 mg/L。
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公开(公告)号:CN117683802A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202410145497.X
申请日:2024-02-02
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种通过甲基苹果酸途径生产异亮氨酸的罗尔斯通氏菌工程菌株及其构建与生产方法。本发明通过表达甲基苹果酸合酶基因建立甲基苹果酸途径合成异亮氨酸;通过改造内源N‑乙酰葡糖胺转运系统实现菌株对葡萄糖的转运代谢;通过表达支链氨基酸外泌蛋白基因实现异亮氨酸在发酵液中的累积。通过调节辅酶平衡、解除反馈抑制、敲除代谢旁路、采用补料上罐发酵显著提升工程菌株通过甲基苹果酸途径合成异亮氨酸的生产能力。工程菌株以葡萄糖作为唯一碳源,发酵36小时的异亮氨酸产量为857 mg/L,以CO2作为唯一碳源,发酵25天的异亮氨酸产量为105 mg/L。
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公开(公告)号:CN116837016B
公开(公告)日:2024-01-02
申请号:CN202311091014.4
申请日:2023-08-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种构建生产辣椒素香草壬酰胺的重组大肠杆菌工程菌株的方法及重组菌株和应用。本发明通过阻断脂肪酸β‑氧化分解途径及提高菌株对脂肪酸耐受能力,提高了壬酸的利用效率;进一步利用游离的低拷贝质粒在底盘细胞内表达了合成香草壬酰胺的N‑酰基转移酶和CoA链接酶编码基因并对不同来源基因进行了筛选,构建了可合成香草壬酰胺的大肠杆菌工程菌株。以壬酸和香兰素胺为底物利用细胞转化合成香草壬酰胺,并对生物转化条件进行了优化,香草壬酰胺摇瓶转化产量达到(56)对比文件Yongjoo Lee等.Enhanced production ofnonanedioic acid from nonanoic acid byengineered Escherichia coli.BiotechnologyJournal.2022,第17卷摘要、第3页第3段、第4页左栏第1段、第5页左栏第4段-右栏第2段、第6页右栏第3段-第7页右栏第1段、第9页左栏第3段、图1-2、表2.
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公开(公告)号:CN116463308B
公开(公告)日:2023-10-17
申请号:CN202310706040.7
申请日:2023-06-15
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域,具体地涉及提高锰过氧化物酶的酶活力及过氧化氢耐受性的方法及突变体、编码基因和应用。本发明以来源于Moniliophthora roreri的锰过氧化物酶MrMnP作为母本,获得催化效率和H2O2耐受性提高的锰过氧化物酶MrMnP1。涉及到的氨基酸突变点为Glu148Gly。改造后的锰过氧化物酶MrMnP1酶活由10.43 U/mg提高到了13.83 U/mg,提高幅度为32.7%;在1.5 mM H2O2下,MrMnP1酶活由4.3 U/mg提高到了8.3 U/mg,提高幅度为92.7%;在1.5 mM H2O2下处理30 min后,MrMnP1剩余酶活由0.13 U/mg提高到了1.53 U/mg,提高幅度为1067%。
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公开(公告)号:CN116814628A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310855398.6
申请日:2023-07-13
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/80 , C12N15/63 , C12N15/53 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域,具体涉及嗜热毁丝霉小分子热休克蛋白组成型强启动子Phsp、及其应用。本发明的组成型强启动子Phsp能够在嗜热毁丝霉中无需诱导物即可启动基因的高效表达。本发明提供的含有组成型强启动子Phsp的嗜热毁丝霉过表达载体能够用于内源或外源基因的高效表达,为嗜热毁丝霉的工程化改造提供了有利工具。
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公开(公告)号:CN116536341A
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202310337105.5
申请日:2023-03-31
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域,具体涉及一种构建高产γ‑氨基丁酸重组大肠杆菌的方法及生产γ‑氨基丁酸的方法。本发明通过在大肠杆菌中异源表达芽孢杆菌Z11来源的谷氨酸脱羧酶编码基因构建了一株能够进行γ‑氨基丁酸生产的大肠杆菌工程菌株。为消除大肠杆菌工程菌在转化底物生产γ‑氨基丁酸的过程中对外源昂贵辅因子吡哆醛5’‑磷酸的依赖,通过对基因来源、基因组合及表达调控方式进行筛选,在上述大肠杆菌工程菌株中构建了内源吡哆醛5’‑磷酸的合成途径。该途径的构建不但能够完全供给谷氨酸脱羧酶的辅酶需求,而且大幅提升了产物的转化效率。
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公开(公告)号:CN116463308A
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202310706040.7
申请日:2023-06-15
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域,具体地涉及提高锰过氧化物酶的酶活力及过氧化氢耐受性的方法及突变体、编码基因和应用。本发明以来源于Moniliophthora roreri的锰过氧化物酶MrMnP作为母本,获得催化效率和H2O2耐受性提高的锰过氧化物酶MrMnP1。涉及到的氨基酸突变点为Glu148Gly。改造后的锰过氧化物酶MrMnP1酶活由10.43 U/mg提高到了13.83 U/mg,提高幅度为32.7%;在1.5 mM H2O2下,MrMnP1酶活由4.3 U/mg提高到了8.3 U/mg,提高幅度为92.7%;在1.5 mM H2O2下处理30 min后,MrMnP1剩余酶活由0.13 U/mg提高到了1.53 U/mg,提高幅度为1067%。
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公开(公告)号:CN116064490A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202310199722.3
申请日:2023-03-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M3、ThAPT3‑M4和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本,通过定点突变,从而获得了热稳定性显著提高的蛋白酶突变体。亲本PA3在60℃条件下处理10min和20min后,剩余酶活分别为1.9%和1.6%。突变体ThAPT3‑M3和ThAPT3‑M4在60℃下处理10min后,剩余酶活分别为58%和68%;突变体ThAPT3‑M3和ThAPT3‑M4在60℃下处理20min后,剩余酶活分别为31%和45%。此外,突变体ThAPT3‑M4的比活力提高了25%。因此,本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性,具有更好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN114807088B
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202210739858.4
申请日:2022-06-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种提高植酸酶热稳定性的方法及突变体和应用。本发明对植酸酶进行了系列突变,这些突变通过降低解折叠自由能,从而显著提高了酶的热稳定性。本发明对植酸酶APPAmut4进行突变,植酸酶突变体与亲本相比,植酸酶热稳定性增强,突变体APPAmut6的t1/2值增长到35.5 min,提高约10倍。本发明克服了现有技术的不足,提供了具有高热稳定性的适合于在能源、食品和饲料等领域中应用的植酸酶突变体。因此,本发明提供的植酸酶突变体可以很好的应用于能源、食品和饲料行业中,有广阔的应用前景。
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