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公开(公告)号：CN115820617A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211327476.7
申请日：2022-10-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性增强的D‑甘露糖异构酶突变体，属于酶工程领域。本发明提供了热稳定性提高的D‑甘露糖异构酶突变体，所述D‑甘露糖异构酶突变体的氨基酸序列相对于SEQ ID NO：1在第241位、第116位、第379位或第253位是不同的。其中，D‑甘露糖异构酶突变体A241P与亲本酶相比，比酶活和稳定性均有提高，50℃条件下半衰期从18.87min提高到了43.35min，比酶活比提高了150％。
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公开(公告)号：CN112852847B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202110201843.8
申请日：2021-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组酿酒酵母菌株及其构建方法与应用，属于生物发酵技术领域。其中，α‑法尼烯合成酶FSCS的氨基酸序列用SEQ ID No.1所示。本发明构建了含有该基因的重组表达载体，建立了生物合成法尼烯的方法。本发明对一种此前未明确报道过的萜类合成酶进行了功能表征，并进行了酶学性质的初步研究，在酶学性质的指导下改变发酵条件，实现了法尼烯在酿酒酵母中的生物合成，相较于已报道的苹果来源法尼烯合成酶有更好的表达效果，有利于指导法尼烯在微生物中的高效生产。
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公开(公告)号：CN113355312B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202110687582.5
申请日：2021-06-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了大肠杆菌L‑谷氨酸脱羧酶突变体的制备及应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供的大肠杆菌L‑谷氨酸脱羧酶突变体G125F、S126G、S273F、S273G、L276A、G125F/S273F、S273F/L276A、L276A/G125F、G125F/S273F/L276A，所述突变体的大肠杆菌L‑谷氨酸脱羧酶活性比野生型分别提高了20％、19％、36％、13％、29％、42％、46％、41％、53％；GABA的产量较野生型提高了29g/L、27g/L、51g/L、15g/L、34g/L、77g/L、95g/L、72g/L、127g/L，最高可达694g/L。GABA产量的提高更有利于扩大其工业化应用范围。
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公开(公告)号：CN112501043B
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202011508479.1
申请日：2020-12-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种生产香叶基香叶醇的酿酒酵母工程菌的构建和应用，属于合成生物学技术领域。本发明筛选获得了在酿酒酵母中转化效率较高的香叶基香叶基焦磷酸合成酶PaGGPPs。表达tHMG1、PaGGPPs‑ERG20和PaGGPPs‑DPP1可促进香叶基香叶醇的积累。表达CHK1和IPK1，同时缺损ROX1基因可进一步促进香叶基香叶醇的积累。本发明构建的基因工程菌摇瓶发酵最高能够积累0.77g/L香叶基香叶醇，5L发酵罐120h能够积累4.3g/L香叶基香叶醇。
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公开(公告)号：CN113817736A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111192261.4
申请日：2021-10-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/10
Abstract: 本发明公开了一种具有群体感应特征的启动子及其应用，具有与SEQ ID NO.1所示的序列同源性≥95％的核酸序列，本发明提供的启动子Ptr1来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis BL2)。本发明所述启动子具有前期(1‑5h)表达极弱，后期(16‑48h)表达脉冲型增长的特性，是响应群体密度的自诱导高效表达系统。本发明提供的启动子确保细菌种群达到一定数量后才产生目标产物，无需添加诱导剂，保证了细胞在“生长”与“生产”两相之间进行适时的转变。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112795569A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110200998.X
申请日：2021-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 发明公开了一种新型组成型启动子、重组地衣芽孢杆菌及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得Bacillus licheniformis来源的强组成型启动子P2以及Thermobifida fusca NTU22来源的麦芽三糖淀粉酶目的基因，构建重组质粒pHY‑P2‑tfa，并转化至地衣芽抱杆菌Bacillus licheniformis，得到重组地衣芽抱杆菌。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主，利用新型高活性启动子P2实现麦芽三糖淀粉酶的重组表达。混合碳源麦芽糊精60g/L，葡萄糖10g/L以及42℃的发酵条件更有利于产酶，重组菌发酵的最高酶活达到578.47U/mL。
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公开(公告)号：CN112708615A
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN202110201901.7
申请日：2021-02-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N11/14
Abstract: 本发明提供了一种硅基化合物固定化酶生物催化剂的制备方法，属于固定化酶生物催化剂制备计技术领域。本发明以硅基化合物为载体，脂肪酶为固定化对象，共价结合法为固定方法，利用硅基化合物表面富含羟基基团，与富含乙氧基基团的交联剂进行共价结合，交联剂的另一端则是可以与脂肪酶上的活性基团进行共价结合以达到固定化酶的效果。本发明制备固定化酶催化剂具有较好的分散性、较高的载酶量和较好的酶活。本发明还可以适用漆酶、辣根过氧化物酶等多种酶的固定化。
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公开(公告)号：CN112094794A
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN202011015129.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产MTSase和MTHase的方法及应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得地衣芽孢杆菌来源的鼠李糖诱导启动子和古细菌嗜热硫化叶菌来源的MTSase、MTHase编码基因，并构建重组质粒pBSL‑Prha‑MTSase和pBSL‑Prha‑MTHase；将两个重组质粒分别转化至地衣芽孢杆菌，得到两种重组地衣芽孢杆菌；以两种重组地衣芽孢杆菌为混合发酵菌种，利用鼠李糖诱导发酵生产MTSase和MTHase。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主，以发酵原料中不常用的鼠李糖作为诱导剂，实现MTSase和MTHase的重组表达，且菌株生长迅速，产酶水平高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN107287144B
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201710591287.3
申请日：2017-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞，所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞的制备方法为：首先经过重组过表达获得一种L‑谷氨酸氧化酶，然后再对枯草芽孢杆菌内源谷氨酸分解途径进行代谢工程改造，最后改造了枯草芽孢杆菌对谷氨酸转运途径，制得所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞，即重组枯草芽孢杆菌。本发明为参与细胞内源代谢的全细胞转化系统的构建及改良提供了实验依据，为利用枯草芽孢杆菌全细胞高效转化L‑谷氨酸生产α‑酮戊二酸提供借鉴。
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公开(公告)号：CN110343628A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201811547621.6
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/16 , C05F11/08 , C12R1/07 , C12R1/01 , C12R1/125 , C12R1/10 , C12R1/25 , C12R1/23 , C12R1/865 , C12R1/38
Abstract: 本发明公开了一种包含乙醇假丝酵母的微生物菌剂，所述微生物菌剂的制备方法包括如下步骤：(1)将预混合固体发酵培养基用水充分溶解；(2)在步骤(1)制得的发酵液中加入0.01～1‰预复配的固体微生物复合菌剂，用氢氧化钠调节pH 5～8，搅拌均匀并用盖子将容器盖好密封；(3)在25～40℃的温度下发酵5～9天，最后添加10～30wt％的玉米生化黄腐酸，即得所述微生物菌剂。本发明微生物菌剂组成稳定、通用性强，在水果、蔬菜、粮食作物的种植方面具有良好的应用效果，便于大规模使用。
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