大肠杆菌L-谷氨酸脱羧酶突变体的制备及应用

    公开(公告)号:CN113355312B

    公开(公告)日:2022-10-11

    申请号:CN202110687582.5

    申请日:2021-06-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了大肠杆菌L‑谷氨酸脱羧酶突变体的制备及应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供的大肠杆菌L‑谷氨酸脱羧酶突变体G125F、S126G、S273F、S273G、L276A、G125F/S273F、S273F/L276A、L276A/G125F、G125F/S273F/L276A,所述突变体的大肠杆菌L‑谷氨酸脱羧酶活性比野生型分别提高了20%、19%、36%、13%、29%、42%、46%、41%、53%;GABA的产量较野生型提高了29g/L、27g/L、51g/L、15g/L、34g/L、77g/L、95g/L、72g/L、127g/L,最高可达694g/L。GABA产量的提高更有利于扩大其工业化应用范围。

    一种具有群体感应特征的启动子及其应用

    公开(公告)号:CN113817736A

    公开(公告)日:2021-12-21

    申请号:CN202111192261.4

    申请日:2021-10-13

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有群体感应特征的启动子及其应用,具有与SEQ ID NO.1所示的序列同源性≥95%的核酸序列,本发明提供的启动子Ptr1来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis BL2)。本发明所述启动子具有前期(1‑5h)表达极弱,后期(16‑48h)表达脉冲型增长的特性,是响应群体密度的自诱导高效表达系统。本发明提供的启动子确保细菌种群达到一定数量后才产生目标产物,无需添加诱导剂,保证了细胞在“生长”与“生产”两相之间进行适时的转变。

    一种新型组成型启动子、重组地衣芽孢杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN112795569A

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN202110200998.X

    申请日:2021-02-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 发明公开了一种新型组成型启动子、重组地衣芽孢杆菌及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得Bacillus licheniformis来源的强组成型启动子P2以及Thermobifida fusca NTU22来源的麦芽三糖淀粉酶目的基因,构建重组质粒pHY‑P2‑tfa,并转化至地衣芽抱杆菌Bacillus licheniformis,得到重组地衣芽抱杆菌。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主,利用新型高活性启动子P2实现麦芽三糖淀粉酶的重组表达。混合碳源麦芽糊精60g/L,葡萄糖10g/L以及42℃的发酵条件更有利于产酶,重组菌发酵的最高酶活达到578.47U/mL。

    一种硅基化合物固定化酶生物催化剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN112708615A

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN202110201901.7

    申请日:2021-02-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种硅基化合物固定化酶生物催化剂的制备方法,属于固定化酶生物催化剂制备计技术领域。本发明以硅基化合物为载体,脂肪酶为固定化对象,共价结合法为固定方法,利用硅基化合物表面富含羟基基团,与富含乙氧基基团的交联剂进行共价结合,交联剂的另一端则是可以与脂肪酶上的活性基团进行共价结合以达到固定化酶的效果。本发明制备固定化酶催化剂具有较好的分散性、较高的载酶量和较好的酶活。本发明还可以适用漆酶、辣根过氧化物酶等多种酶的固定化。

    一种产MTSase和MTHase的方法及应用

    公开(公告)号:CN112094794A

    公开(公告)日:2020-12-18

    申请号:CN202011015129.1

    申请日:2020-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产MTSase和MTHase的方法及应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过PCR获得地衣芽孢杆菌来源的鼠李糖诱导启动子和古细菌嗜热硫化叶菌来源的MTSase、MTHase编码基因,并构建重组质粒pBSL‑Prha‑MTSase和pBSL‑Prha‑MTHase;将两个重组质粒分别转化至地衣芽孢杆菌,得到两种重组地衣芽孢杆菌;以两种重组地衣芽孢杆菌为混合发酵菌种,利用鼠李糖诱导发酵生产MTSase和MTHase。本发明以食品安全的地衣芽孢杆菌为表达宿主,以发酵原料中不常用的鼠李糖作为诱导剂,实现MTSase和MTHase的重组表达,且菌株生长迅速,产酶水平高,生产成本低。

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