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公开(公告)号:CN105264070A
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201480000483.3
申请日:2014-02-26
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/20 , A21D8/042 , A23L7/109 , A23L29/06 , A23V2002/00 , C12N15/815 , C12Y301/01003
Abstract: 本发明公开了一种新型双功能脂肪酶突变体及其在面制品加工中的应用,其氨基酸序列发生1)或2)形式的突变,1)P298T;P298T/H317P;P298T/H317P/V326S;P298T/T218S/S234F;P298T/H317P/P168L/A129S;P298T/S234F/K161R/V326S;2)在1)限定的核苷酸序列基础上经碱基的缺失、取代、插入或突变,同源性达到80%以上的核苷酸序列;该突变体在面制品加工中具有很好的应用效果,在馒头等面制品加工中起到显著增白,在面包烘焙加工中起到显著增大比容的效果,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN102911888B
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201210232950.8
申请日:2012-07-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种分泌脂肪酶的毕赤酵母共表达伴侣蛋白基因工程菌及其应用,本发明运用了分子生物学技术在表达华根霉脂肪酶的毕赤酵母基因工程菌中插入两种伴侣蛋白ERO1和PDI基因。通过在两种伴侣蛋白的协同作用下,加速了外源蛋白的合成速度,从而增加了外源蛋白脂肪酶的分泌速率,其胞外酶活力达到32000U/mL;该酶在面包烘焙、造纸工业中树脂障碍控制、皮革脱脂中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN104087571A
公开(公告)日:2014-10-08
申请号:CN201410263491.9
申请日:2014-06-14
IPC: C12N11/14
Abstract: 本发明公开了一种以含氢硅油疏水改性的二氧化硅为载体的固定化脂肪酶及其制备方法。所述固定化脂肪酶包括以含氢硅油改性的SiO2为载体,以及固定在所述SiO2上的脂肪酶。本发明所述的含氢硅油改性的SiO2载体制备的固定化脂肪酶,与其他方式改性的SiO2载体所制备的固定化脂肪酶相比,在具有较高催化活力及良好稳定性的条件下,其重复使用性得到有效提高,重复使用12次以后,酶活力仍能保持最初的80%以上,具有良好的重复使用性。同时本发明所述的制备方法具有工艺简单,操作成本低。
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公开(公告)号:CN102653741B
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201210145501.X
申请日:2010-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 高热稳定性华根霉脂肪酶,属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了由华根霉(Rhizopus chinensis)CCTCC M201021脂肪酶作为亲本,经分子生物学技术而获得的热稳定性提高的脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中,涉及到的氨基酸突变为Met101Thr、Glu107Gly、Ala129Ser、Ser151Asn、Cys160Leu、Lys161Arg、Pro168Leu、Pro168His、Leu180His、Asp182Tyr、Thr183Ala、Thr218Ser、Lys219Asp、Ala230Phe、Ser234Phe、Val261Gly、His317Pro、Val329Ala、Glu363Arg、Asn366Asp、Ser373Cys中的一种或几种。以在65℃下半衰期t50来表示,这些突变体的热稳定性较亲本华根霉脂肪酶得到了提高。本发明也公开了编码脂肪酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。
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公开(公告)号:CN102911888A
公开(公告)日:2013-02-06
申请号:CN201210232950.8
申请日:2012-07-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种分泌脂肪酶的毕赤酵母共表达伴侣蛋白基因工程菌及其应用,本发明运用了分子生物学技术在表达华根霉脂肪酶的毕赤酵母基因工程菌中插入两种伴侣蛋白ERO1和PDI基因。通过在两种伴侣蛋白的协同作用下,加速了外源蛋白的合成速度,从而增加了外源蛋白脂肪酶的分泌速率,其胞外酶活力达到32000U/mL;该酶在面包烘焙、造纸工业中树脂障碍控制、皮革脱脂中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN102653741A
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN201210145501.X
申请日:2010-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 高热稳定性华根霉脂肪酶,属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了由华根霉(Rhizopuschinensis)CCTCCM201021脂肪酶作为亲本,经分子生物学技术而获得的热稳定性提高的脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中,涉及到的氨基酸突变为Met101Thr、Glu107Gly、Ala129Ser、Ser151Asn、Cys160Leu、Lys161Arg、Pro168Leu、Pro168His、Leu180His、Asp182Tyr、Thr183Ala、Thr218Ser、Lys219Asp、Ala230Phe、Ser234Phe、Val261Gly、His317Pro、Val329Ala、Glu363Arg、Asn366Asp、Ser373Cys中的一种或几种。以在65℃下半衰期t50来表示,这些突变体的热稳定性较亲本华根霉脂肪酶得到了提高。本发明也公开了编码脂肪酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。
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公开(公告)号:CN102604911A
公开(公告)日:2012-07-25
申请号:CN201210083913.5
申请日:2009-11-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 高活力华根霉脂肪酶突变体,属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了一种由华根霉(Rhizopuschinensis)CCTCCM201021脂肪酶基因经定向进化而获得的一系列脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中,涉及到的氨基酸突变为Ala129Ser、Lys161Arg、Thr195Tyr、Ala230Thr、Val261Gly、Lys322Arg、Ser373Asn以及上述氨基酸两个、三个或四个突变的组合。以转换数Kcat表示,这些突变体的酶活较出发菌株得到了提高。
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公开(公告)号:CN101974499B
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201010254620.X
申请日:2010-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 热稳定性提高的脂肪酶突变体,属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了由华根霉(Rhizopus chinensis)CCTCC M201021脂肪酶作为亲本,经分子生物学技术而获得的热稳定性提高的脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中,涉及到的氨基酸突变为Met101Thr、Glu107Gly、Ala129Ser、Ser151Asn、Cys160Leu、Lys161Arg、Pro168Leu、Pro168His、Leu180His、Asp182Tyr、Thr183Ala、Thr218Ser、Lys219Asp、Ala230Phe、Ser234Phe、Val261Gly、His317Pro、Val329Ala、Glu363Arg、Asn366Asp、Ser373Cys中的一种或几种。以在65℃下半衰期t50来表示,这些突变体的热稳定性较亲本华根霉脂肪酶得到了提高。本发明也公开了编码脂肪酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。
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