一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用

    公开(公告)号:CN111117981A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN201911353179.8

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 王睿 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用,属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好,因此,本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。

    一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用

    公开(公告)号:CN110951712A

    公开(公告)日:2020-04-03

    申请号:CN201911352617.9

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 王睿 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用,属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好,因此,本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。

    一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其表达

    公开(公告)号:CN106434512B

    公开(公告)日:2019-10-25

    申请号:CN201610972819.3

    申请日:2016-11-07

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其表达,属于生物工程技术领域。本发明发现了一种新的嗜热酯酶基因,构建3种表达系统,实现高效表达并研究酶学性质。真核表达系统构建:表达载体构建优选载体pPIC9K,并转化毕赤酵母宿主,优选GS115,实现高效表达;原核大肠杆菌表达系统构建:表达载体构建优选载体MBP3,并转化大肠杆菌宿主,优选BL21和Origami2,实现高效表达;原核巨大芽孢杆菌表达系统构建:表达载体构建优选载体pHIS1525,并转化巨大芽孢杆菌宿主,优选YYBm1,实现高效表达。所得重组酶具有酯酶活性以及嗜热性和热稳定性等优点,在高温条件下的工业应用中具有重大潜力。

    一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用

    公开(公告)号:CN110172455A

    公开(公告)日:2019-08-27

    申请号:CN201910468809.X

    申请日:2019-05-31

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 王睿 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用,属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好,因此,本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。

    一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其功能验证

    公开(公告)号:CN106635941B

    公开(公告)日:2019-08-20

    申请号:CN201610972926.6

    申请日:2016-11-07

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其功能验证,属于生物工程技术领域。本发明发现了一种新的嗜热酯酶基因,构建3种表达系统,实现高效表达并研究酶学性质。真核表达系统构建:表达载体构建优选载体pPIC9K,并转化毕赤酵母宿主,优选GS115,实现高效表达;原核大肠杆菌表达系统构建:表达载体构建优选载体MBP3,并转化大肠杆菌宿主,优选BL21和Origami2,实现高效表达;原核巨大芽孢杆菌表达系统构建:表达载体构建优选载体pHIS1525,并转化巨大芽孢杆菌宿主,优选YYBm1,实现高效表达。所得重组酶具有酯酶活性以及嗜热性和热稳定性等优点,在高温条件下的工业应用中具有重大潜力。

    一种长链不饱和脂肪酸特异性脂肪酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN108018273A

    公开(公告)日:2018-05-11

    申请号:CN201810097101.3

    申请日:2018-01-31

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种长链不饱和脂肪酸特异性脂肪酶突变体及其应用,属于基因工程技术领域。本发明根据华根霉脂肪酶(RCL)结构分析,对其进行定点突变,获得了脂肪酸特异性改变的突变酶。比较野生型脂肪酶与突变酶催化水解大豆油的能力,得到了水解率远高于野生型脂肪酶的突变酶HQL,水解率达到98%左右。

    一种最适pH在酸性范围的磷脂酶A2及其应用

    公开(公告)号:CN104328095B

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201410504995.5

    申请日:2014-09-26

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种最适pH在酸性范围的磷脂酶A2及其应用,属于酶工程领域。本发明是将来源于S.violaceoruber的磷脂酶A2序列进行优化,将优化后的序列片段克隆到表达载体pPIC9K得到重组载体,再将重组载体线性化后转化到毕赤酵母中进行表达。本发明得到的磷脂酶A2的最适pH降低到6.0,适于植物油的脱胶,可以应用在酶制剂生产、油脂脱胶以及面制品加工方面等方面。

    糖基化改造提高脂肪酶表达的方法、突变酶及其应用

    公开(公告)号:CN104762277B

    公开(公告)日:2017-07-14

    申请号:CN201510195799.9

    申请日:2015-04-22

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 喻晓蔚 徐岩

    CPC classification number: C12N9/20 C12N15/81 C12R1/84 C12R1/845

    Abstract: 本发明公开了糖基化改造提高脂肪酶表达的方法、突变酶及其应用,属于酶工程领域。本发明是将米根霉脂肪酶的前导肽序列进行N‑糖基化突变,将SAS和/或NT氨基酸分别改造为N‑糖基化位点NGT和/或NLT,得到的突变体酶proROLA、proROLB、proROLAB的胞外蛋白浓度分别比未进行糖基化的proROL提高了211%、188%、233%,发酵罐培养时酶活分别达到8210U·mL‑1、8457U·mL‑1和9366U·mL‑1,而未突变的proROL的胞外酶活几乎为零。本发明的米根霉脂肪酶具有显著提高的脂肪酶酶活,可以应用于食品、化工及生物能源等领域。

    一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其功能验证

    公开(公告)号:CN106635941A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610972926.6

    申请日:2016-11-07

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 喻晓蔚 徐岩

    Abstract: 本发明公开了一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其功能验证,属于生物工程技术领域。本发明发现了一种新的嗜热酯酶基因,构建3种表达系统,实现高效表达并研究酶学性质。真核表达系统构建:表达载体构建优选载体pPIC9K,并转化毕赤酵母宿主,优选GS115,实现高效表达;原核大肠杆菌表达系统构建:表达载体构建优选载体MBP3,并转化大肠杆菌宿主,优选BL21和Origami2,实现高效表达;原核巨大芽孢杆菌表达系统构建:表达载体构建优选载体pHIS1525,并转化巨大芽孢杆菌宿主,优选YYBm1,实现高效表达。所得重组酶具有酯酶活性以及嗜热性和热稳定性等优点,在高温条件下的工业应用中具有重大潜力。

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