一种高效表达重组鸡α干扰素的工程菌

    公开(公告)号:CN108220214A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201711444595.X

    申请日:2017-12-27

    CPC classification number: C07K14/56 C12N15/70 C12N2800/22

    Abstract: 本发明公开了一种高效表达重组鸡α干扰素的工程菌,其获得包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化合成;S2、根据优化后的鸡α干扰素基因,设计特异性引物;S3、将鸡α干扰素基因PCR扩增;PCR产物经EcoRI、HindIII双酶切克隆到原核表达载体pET‑41a;S4、将测序正确的pET‑41a‑ChIFN‑α重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞;S5、重组鸡α干扰素的原核表达及抗病毒活性测定。本发明公开的工程菌可以实现鸡α干扰素的高效表达,获得的鸡α干扰素抗病毒活性达到1.71×107UI/mg。

    一种K亚群禽白血病病毒检测试剂盒

    公开(公告)号:CN108048603A

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201810074475.3

    申请日:2018-01-25

    Abstract: 本发明公开了一种K亚群禽白血病病毒检测试剂盒,涉及病毒荧光定量PCR检测技术领域。本发明的试剂盒含有1对特异性引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID No.2‑3所示。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,灵敏度高、特异性强,可快速地检测K亚群禽白血病病毒,非常适用于疾病监测、现场应急以及临床标本的检测,适合大范围推广应用。

    一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用

    公开(公告)号:CN105331601A

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:CN201510790960.7

    申请日:2015-11-17

    Abstract: 本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用,属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG,使的PCR产物含有这个USS序列,副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重组,无需构建突变常用的自杀质粒,本方法把抗性基因直接引入到PCR产物中,直接用PCR产物就能实现筛选,同时在引物中引入USS,细菌就会直接吞噬这个重组模版用于同源重组。本发明的基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法在构建副猪嗜血杆菌双组分系统突变体中应用。

    检测禽流感病毒H7N9亚型的RT-LAMP试剂盒

    公开(公告)号:CN103740863B

    公开(公告)日:2015-06-17

    申请号:CN201410015168.X

    申请日:2014-01-13

    Abstract: 本发明公开了一种检测禽流感病毒H7N9亚型的RT-LAMP试剂盒,该试剂盒包含6对引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID No.1-12所示。本发明的试剂盒可快速、特异、灵敏地检测禽流感H7N9亚型病毒,利用浊度仪实时判断反应的进行,或在反应结束后弹入SYBR Green I,通过颜色反应来判断检测结果。检测HA基因的引物最低检测限为48fg/μl的H7N9 RNA;检测NA基因的引物最低检测限为4.8pg/μl的H7N9 RNA。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于疾病监测、现场应急以及临床标本的检测,适合大范围推广应用。

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