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公开(公告)号：CN104403003A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410499305.1
申请日：2011-09-26
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸基因编码荧光探针及其制备方法和应用。一方面，本发明涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的检测探针，具体涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的重组荧光融合蛋白检测探针。在一个具体方面，本发明涉及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的重组荧光融合蛋白检测探针；在另一个具体方面，本发明涉及氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的重组荧光融合蛋白检测探针；在又一方面，本发明涉及还原型和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸比率的重组荧光融合蛋白检测探针。本发明也涉及上述检测探针的制备方法及其分别在检测NADH、NAD+和NADH/NAD+比率中的应用。
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公开(公告)号：CN102344494B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201110288807.6
申请日：2011-09-26
Applicant: 华东理工大学
IPC: C07K19/00
CPC classification number: G01N33/5735 , C07K14/195 , C07K14/32 , C07K2319/00 , C07K2319/60 , G01N33/5011 , G01N33/582 , G01N2500/02 , G01N2800/7028
Abstract: 本发明涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸基因编码荧光探针及其制备方法和应用。一方面，本发明涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的检测探针，具体涉及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的重组荧光融合蛋白检测探针。在一个具体方面，本发明涉及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的重组荧光融合蛋白检测探针；在另一个具体方面，本发明涉及氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的重组荧光融合蛋白检测探针；在又一方面，本发明涉及还原型和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸比率的重组荧光融合蛋白检测探针。本发明也涉及上述检测探针的制备方法及其分别在检测NADH、NAD+和NADH/NAD+比率中的应用。
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公开(公告)号：CN104211811A
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201310216584.1
申请日：2013-06-03
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 提供一种遗传编码的Cu/Ag离子荧光探针，由对Cu/Ag离子敏感的蛋白和通过光谱性质的改变对Cu/Ag离子进行表现的部分组成，其中对Cu/Ag离子进行表现的部分是荧光蛋白序列或其衍生物，对Cu/Ag离子敏感的蛋白是具有如下特征的多肽或其功能片段：(1)具有Cu/Ag离子结合特性的结构域B；和/或(2)来源于对Cu/Ag离子敏感的转录调控因子CueR蛋白。还提供包含所述荧光探针的融合蛋白、编码该荧光探针或融合蛋白的核苷酸序列及表达载体，制备该荧光探针或融合蛋白的方法，及用于检测Cu/Ag离子或筛选药物的试剂盒。本发明的荧光探针利用CueR蛋白感受环境内Cu/Ag离子浓度和状态变化，通过荧光蛋白产生荧光与否及荧光强弱对Cu/Ag离子进行直观、实时的描述，可在生理水平和亚细胞水平上检测Cu/Ag离子。
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公开(公告)号：CN102618548A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201110029564.4
申请日：2011-01-27
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供一种对次氯酸具有高选择性的绿色荧光突变蛋白cpSFGFP的编码基因、包含该编码基因的重组质粒载体、用该重组质粒载体转化的宿主细胞，以及该宿主细胞表达的由所述编码基因编码的对次氯酸具有高选择性的绿色荧光cpSFGFP突变蛋白。这种重组cpSFGFP突变蛋白可用作次氯酸检测探针。本发明所提供的cpSFGFP突变蛋白探针对次氯酸浓度变化的反应比野生型GFP或其变体蛋白如SFGFP更灵敏，更稳定，选择性更好。
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公开(公告)号：CN101503679A
公开(公告)日：2009-08-12
申请号：CN200810202083.7
申请日：2008-10-31
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明通过RT－PCR方法获得QSOX蛋白的全长编码区cDNA序列，并进行定点突变，然后将野生型和突变体基因分别构建入原核表达载体的pET系列、pGEX系列和pTYB系列载体和酵母表达的系列载体中，转化大肠杆菌和酵母进行诱导表达，并对表达产物的进行纯化和功能研究。
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