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公开(公告)号：CN116218822A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310199724.2
申请日：2023-03-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程和蛋白质工程领域。具体地，涉及到一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M5和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，获得了热稳定性显著提高的蛋白酶突变体ThAPT3‑M5。亲本PA3的Tm值为68.2±0.3℃，而突变体的Tm值提高到了69.5±0.2℃。突变体在55℃和60℃下的t1/2分别提高到亲本的2.3倍和2.8倍。在60℃下处理10min后，亲本剩余酶活为1.9％，而突变体M5的剩余酶活为34.9％。此外，突变体的比活力从最初的3078.3±82.5U/mg提高到了3701.9±42.5U/mg。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116121227A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202310031125.X
申请日：2023-01-10
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及β‑1,3‑葡聚糖酶突变体N54W及其基因和应用。所述β‑1,3‑葡聚糖酶N54W突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的β‑1,3‑葡聚糖酶突变体与野生型β‑1,3‑葡聚糖酶相比，β‑1,3‑葡聚糖酶的比活提高3.6倍，达到902.1U/mg，催化活性大幅提高，kcat/Km达到888.9ml·mg‑1·min‑1，达到野生型5.5倍。本发明提供了上述具有高比活性的β‑1,3‑葡聚糖酶突变体的应用，具体可以应用于酿造、食品和饲料领域中，有着非常广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN113699127B
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202110898384.3
申请日：2021-08-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种提高染料脱色过氧化物酶降解霉菌毒素效率的方法。本发明提供了两种可用于霉菌毒素玉米赤霉烯酮降解的高效染料脱色过氧化酶介体。本发明的介体能够协助链霉菌来源染料脱色过氧化物酶有效地降解霉菌毒素玉米赤霉烯酮，广泛用于食品和饲料霉菌毒素脱毒领域。
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公开(公告)号：CN115627279A
公开(公告)日：2023-01-20
申请号：CN202211594542.7
申请日：2022-12-13
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12P7/58
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及绿原酸作为裂解性多糖单加氧酶降解纤维素的电子供体的应用。木质纤维素类生物质中天然存在的化合物能作为裂解性多糖单加氧酶电子供体，显著降低裂解性多糖单加氧酶的使用成本，促进其大规模地推广应用。
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公开(公告)号：CN115612704A
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202211632025.4
申请日：2022-12-19
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12P19/00
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及原儿茶酸作为裂解性多糖单加氧酶降解纤维素的电子供体的应用。木质纤维素类生物质中天然存在的化合物能作为裂解性多糖单加氧酶电子供体，显著降低裂解性多糖单加氧酶的使用成本，促进其大规模地推广应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114685632B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN202210563760.8
申请日：2022-05-23
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及转录抑制因子121121的应用及提高里氏木霉纤维素酶表达量和酶活的方法。本发明的纤维素酶表达相关的转录抑制因子121121对于纤维素酶活性表达具有调节作用，通过构建该基因的敲除质粒，并用其转化宿主菌，在宿主菌中敲除转录抑制因子121121的表达可提高宿主菌的蛋白表达量和纤维素酶酶活。本发明丰富了里氏木霉纤维素酶的转录调控网络，为提高纤维素酶产量，降低纤维素酶成本，实现纤维素有效利用提高了新途径。
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公开(公告)号：CN114806998B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210733647.X
申请日：2022-06-27
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请涉及基因工程领域，具体涉及产葡萄糖的罗尔斯通氏菌工程菌及发酵生产方法。本发明通过敲除罗尔斯通氏菌H16中的葡萄糖激酶基因（glk）实现了以果糖、甘油、二氧化碳（CO2）为唯一碳源时产物葡萄糖的积累。而后通过阻断Entner‑Doudoroff（ED）途径和磷酸戊糖聚([R]‑3羟基丁酸)（PHB）合成途径对碳流量的分流，提高了突变型罗尔斯通氏菌细胞中的产物前体葡萄糖‑6‑磷酸和葡萄糖‑1‑磷酸的供应。利用以果糖、甘油和CO2为唯一碳源进行发酵，葡萄糖的最高产量分别达到140.8、73.9和253.3 mg/L。
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公开(公告)号：CN114736880B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210648724.1
申请日：2022-06-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于饲料生物技术领域，具体涉及酸稳定性提高葡萄糖氧化酶GoxM10的突变体D497N及其衍生突变体和应用。本发明以高热稳定性葡萄糖氧化酶GoxM10为研究材料，采用蛋白质工程改造技术对其进行酸稳定性的改良研究。最后获得酸稳定性提升的突变体，从而促进了Gox在饲料工业中的应用。
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公开(公告)号：CN114806998A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210733647.X
申请日：2022-06-27
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请涉及基因工程领域，具体涉及产葡萄糖的罗尔斯通氏菌工程菌及发酵生产方法。本发明通过敲除罗尔斯通氏菌H16中的葡萄糖激酶基因（glk）实现了以果糖、甘油、二氧化碳（CO2）为唯一碳源时产物葡萄糖的积累。而后通过阻断Entner‑Doudoroff（ED）途径和磷酸戊糖聚([R]‑3羟基丁酸)（PHB）合成途径对碳流量的分流，提高了突变型罗尔斯通氏菌细胞中的产物前体葡萄糖‑6‑磷酸和葡萄糖‑1‑磷酸的供应。利用以果糖、甘油和CO2为唯一碳源进行发酵，葡萄糖的最高产量分别达到140.8、73.9和253.3 mg/L。
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公开(公告)号：CN114591849A
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202210501195.2
申请日：2022-05-10
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N1/15 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种构建具有高同源重组效率的嗜热毁丝霉菌株的方法及其应用。本发明获得的突变株ΔKu80可将嗜热毁丝霉CRISPR‑Cas9基因编辑系统的同源重组效率由野生型的57%，提高至86%，减少嗜热毁丝霉遗传转化的工作量提高同源重组效率。
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