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公开(公告)号：CN116463308A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310706040.7
申请日：2023-06-15
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体地涉及提高锰过氧化物酶的酶活力及过氧化氢耐受性的方法及突变体、编码基因和应用。本发明以来源于Moniliophthora roreri的锰过氧化物酶MrMnP作为母本，获得催化效率和H2O2耐受性提高的锰过氧化物酶MrMnP1。涉及到的氨基酸突变点为Glu148Gly。改造后的锰过氧化物酶MrMnP1酶活由10.43 U/mg提高到了13.83 U/mg，提高幅度为32.7%；在1.5 mM H2O2下，MrMnP1酶活由4.3 U/mg提高到了8.3 U/mg，提高幅度为92.7%；在1.5 mM H2O2下处理30 min后，MrMnP1剩余酶活由0.13 U/mg提高到了1.53 U/mg，提高幅度为1067%。
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公开(公告)号：CN116334042A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310378038.1
申请日：2023-04-11
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及改良中性甘露聚糖酶PLM5A稳定性的方法及突变体。本申请对中性甘露聚糖酶PLM5A进行K52V、T266D、W291S、A93LK205R、F63Y、D66Y、S283L、G288S和/或L292I突变。突变体的最适温度提高，热稳定性增加，具有更强的耐酸性。
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公开(公告)号：CN116064490A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202310199722.3
申请日：2023-03-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M3、ThAPT3‑M4和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，通过定点突变，从而获得了热稳定性显著提高的蛋白酶突变体。亲本PA3在60℃条件下处理10min和20min后，剩余酶活分别为1.9％和1.6％。突变体ThAPT3‑M3和ThAPT3‑M4在60℃下处理10min后，剩余酶活分别为58％和68％；突变体ThAPT3‑M3和ThAPT3‑M4在60℃下处理20min后，剩余酶活分别为31％和45％。此外，突变体ThAPT3‑M4的比活力提高了25％。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN114807093B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210713248.7
申请日：2022-06-22
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请涉及基因工程领域，具体涉及一种通过C端添加融合肽段提高木聚糖酶和植酸酶热稳定性的方法。本发明首次发现，通过在GH11家族木聚糖酶和植酸酶C端添加特定融合肽段的方法，可显著提高木聚糖酶和植酸酶的热稳定性，对于其他类型木聚糖酶、植酸酶及其他工业酶类的热稳定性分子改造具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN114807088B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210739858.4
申请日：2022-06-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高植酸酶热稳定性的方法及突变体和应用。本发明对植酸酶进行了系列突变，这些突变通过降低解折叠自由能，从而显著提高了酶的热稳定性。本发明对植酸酶APPAmut4进行突变，植酸酶突变体与亲本相比，植酸酶热稳定性增强，突变体APPAmut6的t1/2值增长到35.5 min，提高约10倍。本发明克服了现有技术的不足，提供了具有高热稳定性的适合于在能源、食品和饲料等领域中应用的植酸酶突变体。因此，本发明提供的植酸酶突变体可以很好的应用于能源、食品和饲料行业中，有广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114807089A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210744530.1
申请日：2022-06-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高植酸酶热稳定性的方法及突变体APPAmut7和应用。本发明对植酸酶进行了系列突变，这些突变涉及优化共进化过程中的关键残基，从而显著提高了酶的热稳定性。本发明对植酸酶APPAmut4进行突变，植酸酶突变体与亲本相比，植酸酶热稳定性增强，其中APPAmut7在65°C下的t1/2达到38.7 min，为亲本APPAmut4的11.4倍。本发明克服了现有技术的不足，提供了具有高热稳定性的适合于在能源、食品和饲料等领域中应用的植酸酶突变体。因此，本发明提供的植酸酶突变体可以很好的应用于能源、食品和饲料行业中，有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114350642A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202210266754.6
申请日：2022-03-18
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种提高木聚糖酶的木二糖产量的方法及突变体和应用。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。以山毛榉木木聚糖为底物，在pH6.5，37℃条件下反应2h，突变体木二糖终产量为6869nm，比野生型（5990nM）高出15%，同时该突变体的木糖产量也比野生型高12%（4355nm vs.3894nm）。
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公开(公告)号：CN114107360B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202210104206.3
申请日：2022-01-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/80 , C12N15/113 , C12N9/42 , C12R1/885
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种通过干扰磷酸酶基因提高里氏木霉纤维素酶表达的方法。本发明对里氏木霉参与细胞内蛋白降解相关的磷酸酶基因ymr1进行了RNAi介导的基因沉默，此操作提高了里氏木霉的蛋白表达量和纤维素酶酶活。
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公开(公告)号：CN113980940B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111585620.2
申请日：2021-12-23
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高双功能纤维素酶的催化效率的方法及突变体、基因和应用。本发明以GH5‑5家族Bispora sp.MEY‑1来源的具有纤维素酶与甘露聚糖酶活性的双功能纤维素酶BsCel5B作为母本，发现位点Thr100对酶的双功能特性有着重要的影响。突变为Thr100Asn与Thr100Cys后，可获得纤维素酶活性提高突变体；突变为Thr100Ile、Thr100Leu、Thr100Val和Thr100Ser后，可获得的甘露聚糖酶活性提高的突变体。在此改造条件下，纤维素酶突变体对纤维素底物的比活力最高比突变前提高了150%，甘露聚糖酶比活力最多提高了81%。突变体更为优越的双功能的特性比野生型有着更为广阔的应用空间，也奠定了其在工业生产领域的应用前景。
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公开(公告)号：CN113774045B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111316632.5
申请日：2021-11-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及分泌表达量提高的葡萄糖淀粉酶突变体M3及其基因和应用。葡萄糖淀粉酶突变体GA2经定点突变后得到分泌表达量提高的突变体。本发明的葡萄糖淀粉酶突变体具有良好的酶学性质，可以应用于饲料、食品、医药、纺织等行业。
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