公开(公告)号：CN101368167A

公开(公告)日：2009-02-18

申请号：CN200810137276.9

申请日：2008-10-09

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  唐丽杰 ,  徐义刚 ,  葛俊伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C12N15/74 ,  A61K39/295 ,  A61K39/187 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12R1/245

Abstract: 共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌及其制备方法，它涉及一种共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组菌及其制备方法。共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌为重组载体质粒pPG－2－VP2－E290转化的干酪乳杆菌。制备方法：一、PCR扩增VP2－E290基因；二、得到重组载体质粒；三、电转化干酪乳杆菌；四、诱导。本发明共表达猪瘟病毒T细胞表位与猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌可作为多价、多联，同时防治猪细小病毒和猪瘟的口服疫苗。本发明针对病毒经黏膜感染的特点，能有效的刺激黏膜免疫系统产生局部免疫应答，进而引起全身性系统免疫反应的疫苗。

公开(公告)号：CN101058798A

公开(公告)日：2007-10-24

申请号：CN200710089251.1

申请日：2007-03-16

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 唐丽杰 ,  李一经 ,  葛俊伟 ,  欧笛

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/33 ,  C12N15/09 ,  C07H21/04 ,  C12N15/74 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明提供的是一种表达猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteristisvirus，TGEV)纤突S蛋白的重组乳酸乳球菌的方法。根据猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的2007bp目的片段，将其与分泌表达的载体质粒pNZ8112进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内，在乳链菌肽的诱导下进行表达。本发明中构建了冠状病毒TGEV S蛋白乳酸乳球菌表达载体系统，表达了含有TGEV S蛋白A、B、C、D四个主要抗原位点的约66KDa的目的蛋白，免疫印迹实验和间接免疫荧光试验均表明，所表达的外源蛋白能够与TGEV免疫血清发生反应，表明重组S蛋白与TGEV天然抗原一样具有相同的抗原性。