一种用于检测PRRSV的RT-RAA-LFD引物探针组、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN118086593A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410430459.9

    申请日:2024-04-11

    Abstract: 本发明涉及家畜病毒检测技术领域,具体涉及一种用于检测PRRSV的RT‑RAA‑LFD引物探针组、试剂盒及应用;本发明引物探针组的核苷酸序列为SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:5,其中下游引物的5'端用生物素标记;所述探针的5'端标记FAM基团,中间用四氢呋喃残基THF替换核苷酸,3'末端标记聚合酶延伸阻断基团C3‑spacer;形成的RT‑RAA‑LFD试剂盒仅需一台恒温加热设备在45min之内即可完成可视化判读最终结果,不受实验场地和操作人员技术水平限制,通过对疑似PRRSV病毒感染病料1326份进行检测,本发明的试剂盒与常规荧光定量RT‑PCR试剂盒作对比发现符合率可达100%,且检测更便捷、灵敏、特异及快速,弥补了现有检测技术的不足。

    两株抗新城疫病毒纳米抗体及其表达制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110776564A

    公开(公告)日:2020-02-11

    申请号:CN201911047347.0

    申请日:2019-10-30

    Abstract: 本发明公开了一种抗新城疫病毒的纳米抗体NDV-Nb4和NDV-Nb49,氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。还公开了由纳米抗体NDV-Nb4与铁蛋白融合构建融合蛋白的方法,通过原核表达系统可溶性表达纳米抗体与铁蛋白的融合蛋白;以及由纳米抗体NDV-Nb49与辣根过氧化物酶融合构建融合蛋白的方法,通过真核表达系统表达NDV-Nb49与辣根过氧化物酶融合蛋白。还公开了一种检测新城疫病毒的方法,是以NDV-Fe-Nb4融合蛋白为捕获NDV的蛋白、NDV-Nb49-HRP融合蛋白为检测NDV的蛋白,配合用于检测NDV,该方法简便易操作,且特异性好,准确率高。

    一种PRRSV N蛋白的纳米抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112457397A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011346127.0

    申请日:2020-11-26

    Abstract: 本发明公开一种PRRSV N蛋白的纳米抗体及其制备方法和应用,属于生物技术领域,所述纳米抗体的氨基酸序列为序列表中的SEQ ID No.1。本发明还公开了所述纳米抗体与辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)融合蛋白的表达制备方法,同时评价了所述纳米抗体与HRP融合蛋白在检测猪血清中PRRSV抗体中的应用,本发明将所述抗PRRSV N蛋白纳米抗体与HRP融合蛋白应用于建立检测猪血清中PRRSV抗体的竞争ELISA中,建立的方法操作简单,检测样品耗时短,不需要使用酶标二抗。为后续将所述纳米抗体应用于PRRSV抗体检测的产品的开发提供了关键的材料。

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