公开(公告)号：CN114839280A

公开(公告)日：2022-08-02

申请号：CN202210291094.7

申请日：2022-03-23

Applicant: 苏州大学

Inventor： 杨霜 ,  蒋军红 ,  高子媛 ,  徐明明 ,  葛威

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/08

Abstract: 本发明公开了一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法，包括步骤：提取得到蛋白质，然后将蛋白水解得到多肽和糖肽，接着用糖苷内切酶处理，包括①将肽段用糖苷内切酶处理，然后将糖肽氧化结合到酰肼树脂上，通过岩藻糖糖苷酶水解后获取岩藻糖糖基化位点或去岩藻糖糖肽；②将糖肽用糖苷内切酶处理，再使用亲水相互作用色谱得到完整岩藻糖糖肽。也可将糖蛋白或者酶切糖肽，经氧化和与酰肼结合，酶切得到支链α1,3‑岩藻糖糖肽。最后用质谱对岩藻糖肽和含有岩藻糖基化位点的肽段进行分析。本方法对发现疾病细胞、临床组织和人体体液标本中具有岩藻糖基化的疾病标志物，以及疾病早期诊断和预后标志物的研究等方面有着重要意义。

公开(公告)号：CN114720543A

公开(公告)日：2022-07-08

申请号：CN202210357748.1

申请日：2022-04-06

Applicant: 苏州大学

Inventor： 杨霜 ,  徐明明 ,  岳爽

IPC: G01N27/62 ,  G01N30/02 ,  G01N30/72 ,  C12P21/06

Abstract: 本发明公开了一种基于固相糖蛋白T抗原糖肽富集和酶切分析的方法，包括步骤：从样本中提取蛋白；蛋白酶解获得多肽；半乳糖和N‑乙酰半乳糖氧化；酰肼树脂固定与PNGase F酶切；半乳糖苷酶处理与质谱分析。该方法获得三种结构，核心1的T抗原糖肽、核心2糖肽、核心8糖肽。T抗原糖肽和核心2糖肽通过质谱分析区别，而T抗原糖肽与核心8通过不同糖苷酶区别。本方法可以富集并区分含T抗原、核心2和核心8的糖肽，对发现肿瘤组织和体液中具有T抗原修饰的特异性标志物，以及疾病早期诊断和预后标志物的研究等方面有着重要意义。