公开(公告)号：CN110438169B

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN201910772216.2

申请日：2019-08-21

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 张燎原 ,  谢伟杰 ,  杨斌 ,  高慧芳 ,  王奇 ,  杨天行 ,  孙文莲 ,  孟婷 ,  胡武佳

IPC: C12P7/26 ,  C12N1/21 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种全细胞催化合成1‑羟基‑2‑丁酮的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过对甲醛裂合482氨基酸的定点饱和突变，构建突变库，筛选获得一株含甲醛裂合酶FLS的工程菌株。以该菌株为全细胞，以甲醛、正丙醛为原料，全细胞催化合成1‑羟基‑2‑丁酮。该菌株能够将1分子的甲醛和1分子的丙醛在甲醛裂合酶的作用下生成1‑羟基‑2‑丁酮。该方法只需一步即能完成1‑羟基‑2‑丁酮的合成，且反应条件温和原料广泛易得，成本低廉。

公开(公告)号：CN115838714B

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202211560186.7

申请日：2022-12-07

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 张燎原 ,  胡捷 ,  杨斌 ,  梁妙 ,  吴天欣 ,  石明玉

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12P7/26

Abstract: 本发明公开了一种乙醛裂合酶、乙醛裂合酶融合蛋白及其制备方法和应用，乙醛裂合酶的氨基酸序列为：将如SEQ ID No.1所示的野生型甲醛裂合酶第28位异亮氨酸突变为缬氨酸，第482位亮氨酸突变为谷氨酸。本发明提供的乙醛裂合酶可转化两分子乙醛生成乙偶姻，在生物法合成乙偶姻中具有工业应用潜力。本发明还通过将编码乙醛裂合酶的基因和类弹性蛋白多肽(ELPs)融合，在E.coli中诱导表达有效地提高了融合蛋白的可溶性表达，且通过利用ELPs标签进行两次ITC循环可获得纯度较高的重组酶，重组酶在催化过程中展现出更好的底物乙醛耐受性和催化效率。

公开(公告)号：CN115838714A

公开(公告)日：2023-03-24

申请号：CN202211560186.7

申请日：2022-12-07

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 张燎原 ,  胡捷 ,  杨斌 ,  梁妙 ,  吴天欣 ,  石明玉

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12P7/26

Abstract: 本发明公开了一种乙醛裂合酶、乙醛裂合酶融合蛋白及其制备方法和应用，乙醛裂合酶的氨基酸序列为：将如SEQ ID No.1所示的野生型甲醛裂合酶第28位异亮氨酸突变为缬氨酸，第482位亮氨酸突变为谷氨酸。本发明提供的乙醛裂合酶可转化两分子乙醛生成乙偶姻，在生物法合成乙偶姻中具有工业应用潜力。本发明还通过将编码乙醛裂合酶的基因和类弹性蛋白多肽(ELPs)融合，在E.coli中诱导表达有效地提高了融合蛋白的可溶性表达，且通过利用ELPs标签进行两次ITC循环可获得纯度较高的重组酶，重组酶在催化过程中展现出更好的底物乙醛耐受性和催化效率。

公开(公告)号：CN110438169A

公开(公告)日：2019-11-12

申请号：CN201910772216.2

申请日：2019-08-21

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 张燎原 ,  谢伟杰 ,  杨斌 ,  高慧芳 ,  王奇 ,  杨天行 ,  孙文莲 ,  孟婷 ,  胡武佳

IPC: C12P7/26 ,  C12N1/21 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种全细胞催化合成1-羟基-2-丁酮的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过对甲醛裂合482氨基酸的定点饱和突变，构建突变库，筛选获得一株含甲醛裂合酶FLS的工程菌株。以该菌株为全细胞，以甲醛、正丙醛为原料，全细胞催化合成1-羟基-2-丁酮。该菌株能够将1分子的甲醛和1分子的丙醛在甲醛裂合酶的作用下生成1-羟基-2-丁酮。该方法只需一步即能完成1-羟基-2-丁酮的合成，且反应条件温和原料广泛易得，成本低廉。