一种基于水凝胶薄膜化封装的细胞玻璃化保存方法

    公开(公告)号:CN115251044A

    公开(公告)日:2022-11-01

    申请号:CN202210923592.9

    申请日:2022-08-02

    Abstract: 本发明涉及一种基于水凝胶薄膜化封装的细胞玻璃化保存方法,属于低温生物医学工程领域。具体操作步骤如下:(1)将壳聚糖溶液和羟乙基纤维素溶液混合均匀得到基体溶液;(2)将待保存细胞加入基体溶液中,逐滴加入β甘油磷酸钠溶液,冰浴条件下得到悬浮溶液;(3)将悬浮溶液转移至薄膜化模具中,37℃恒温无菌环境下静置至形成水凝胶薄膜,使待保存细胞薄膜化封装在水凝胶薄膜中;(4)转移至冷冻载片上,并将具有水凝胶薄膜的冷冻载片投入液氮中,快速降温至‑150℃以下玻璃化转变;再转移至深低温冰箱或液氮罐中,实现长期保存。需要复温时,取出,在37℃~40℃恒温水浴锅中快速复温并恢复为液体状;玻璃化保存前后的细胞活率无显著性差异。

    一种用于干细胞封装保存的水凝胶的制备方法

    公开(公告)号:CN115299432A

    公开(公告)日:2022-11-08

    申请号:CN202210923595.2

    申请日:2022-08-02

    Abstract: 本发明涉及一种用于干细胞封装保存的水凝胶的制备方法,属于生物低温保存技术领域。操作步骤如下:(1)利用壳聚糖、稀醋酸溶液、羟乙基纤维素和蒸馏水配制基体溶液;(2)将干细胞加入到基体溶液中混合均匀,冰浴条件下,逐滴加入β甘油磷酸钠溶液,冰浴混合得到细胞悬浮液;(3)将细胞悬浮液转移至冻存管或水凝胶成胶模具中,在37℃中静置,观察水凝胶形成,倒置3s不流动,得到封装了干细胞的水凝胶;(4)将封装有细胞的水凝胶转移至冻存管或其他冷冻载体中,直接进行低温保存。本发明选用的水凝胶配方具有生物相容性、可降解性和无菌性,接近生物软组织,输入人体后不会造成严重免疫排斥反应,输入人体后可自动降解对人体无明显伤害。

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