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公开(公告)号:CN104894161A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510329462.2
申请日:2015-06-15
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 双基因表达载体及其构建和应用方法。本发明是以根据两个目的基因MtDREB1C和RcXET同时表达设计引物对,对目的基因及中间插入的终止子启动子序列-nos-35S-进行PCR扩增,仅用一个PCR快速将两个目的基因、中间插入的终止子启动子序列连接成一个整体MtDREB1C-nos-35S-RcXET结构序列。将该序列插入pBin438表达载体并转化农杆菌GV3101,进一步转化中国月季,获得了再生植株。有6株再生植株获得PCR验证,其中5株获Southern杂交的验证。生理检测结果表明,部分转化植株的耐寒性、耐旱性优于非转化植株(MtDREB1C表达结果),生长速率也明显增强(RcXET表达结果)。该方法可用于需要两个以上基因同时表达的表达载体快速构建。