公开(公告)号：CN115418342B

公开(公告)日：2025-04-22

申请号：CN202211236230.9

申请日：2022-10-10

Applicant: 海南大学

Inventor： 张冬冬 ,  周永灿 ,  王培博 ,  许莹萱 ,  王世锋 ,  郭伟良 ,  李建龙 ,  蔡岩

IPC: C12N5/071

Abstract: 本公开提供了一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法，所述方法包括：将鱼体的目的组织预处理为组织碎片，并置于装有缓冲液的离心管内；将离心管离心，除去上清液，加入BSA‑DPBS溶液，吹打以重悬组织碎片；除去离心管内上层清液，加入酶解离试剂消化组织碎片；除去离心管内上层清液，加入BSA‑DPBS溶液，吹打以重悬消化后的组织碎片，得到细胞混合物；将细胞混合物通过细胞过滤筛过滤，收集滤液；滤液中加入DNase I，室温孵育；孵育后的混合物离心，除去上清液，重悬于DPBS中，吹打分散细胞，得到目的组织单细胞悬液。通过本发明的制备方法，能够实现快速、高效获得鱼类组织单细胞悬液，并保证解离的细胞活力，单细胞悬液质量满足单细胞测序要求。

公开(公告)号：CN115418342A

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202211236230.9

申请日：2022-10-10

Applicant: 海南大学

Inventor： 张冬冬 ,  周永灿 ,  王培博 ,  许莹萱 ,  王世锋 ,  郭伟良 ,  李建龙 ,  蔡岩

IPC: C12N5/071

Abstract: 本公开提供了一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法，所述方法包括：将鱼体的目的组织预处理为组织碎片，并置于装有缓冲液的离心管内；将离心管离心，除去上清液，加入BSA‑DPBS溶液，吹打以重悬组织碎片；除去离心管内上层清液，加入酶解离试剂消化组织碎片；除去离心管内上层清液，加入BSA‑DPBS溶液，吹打以重悬消化后的组织碎片，得到细胞混合物；将细胞混合物通过细胞过滤筛过滤，收集滤液；滤液中加入DNase I，室温孵育；孵育后的混合物离心，除去上清液，重悬于DPBS中，吹打分散细胞，得到目的组织单细胞悬液。通过本发明的制备方法，能够实现快速、高效获得鱼类组织单细胞悬液，并保证解离的细胞活力，单细胞悬液质量满足单细胞测序要求。