公开(公告)号：CN114317586A

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202111675968.0

申请日：2021-12-31

Applicant: 海南大学

Inventor： 李潇 ,  殷金瑶 ,  董林朋 ,  刘玉涵 ,  刘文波 ,  缪卫国

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12N1/15 ,  G01N21/64 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种标记橡胶树白粉菌的荧光载体，所述荧光载体为基于pJNARG质粒改造的质粒pJNARG‑RP60‑GFP，该质粒在XcmI酶切位点处被插入了一个多菌灵抗性基因，质粒pJNARG‑RP60‑GFP的多克隆位点在启动子RP60和GFP绿色荧光蛋白编码基因之间。本发明提供了用于评价白粉菌转化效率的有力工具，即用电击转化法转化含有荧光基因的质粒，使其在白粉菌细胞中表达荧光基因，并通过荧光标记所转化的白粉菌细胞计算白粉菌转化效率，从而有利于研究其他同时导入白粉菌细胞的外源或自身基因的作用。

公开(公告)号：CN113999859A

公开(公告)日：2022-02-01

申请号：CN202111275789.8

申请日：2021-10-29

Applicant: 海南大学

Inventor： 李潇 ,  刘梦瑶 ,  殷金瑶 ,  刘玉涵 ,  林春花 ,  缪卫国

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12Q1/6895 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种橡胶树白粉菌无毒基因的筛选方法、效应蛋白及应用，该筛选方法，包括：(1)由橡胶树白粉菌基因中选取潜在效应蛋白的编码基因A；(2)构建橡胶树白粉菌效应蛋白表达载体，在胶孢炭疽菌中表达转化该白粉菌的潜在效应蛋白基因A，得炭疽菌转化子；(3)将效应蛋白表达程度高的炭疽菌转化子培养，接种至离体的橡胶叶片，测定其致病能力；若相比野生型，胶孢炭疽菌转化子的致病力下降，则表明该效应蛋白编码基因A为无毒基因。本发明的筛选方法，可直接通过不同效应蛋白基因转化子的致病力筛选出白粉菌无毒基因，实现橡胶树白粉菌无毒基因的更加快速地筛选和鉴定，有利于加强橡胶白粉病的防控以及抗病品种选育。