公开(公告)号：CN111690067A

公开(公告)日：2020-09-22

申请号：CN201910188847.X

申请日：2019-03-13

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邓宁 ,  张利刚

IPC: C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18

Abstract: 本发明提供了Peptibody多表位疫苗的分离纯化方法及其应用，对菌液进行均质和超声的前处理后，先利用阳离子交换层析进行粗纯，然后采用疏水层析进一步纯化，纯化后的产物再进行Protein A亲和层析，即得纯化后的Peptibody多表位疫苗的终产物。所述的分离纯化方法简单稳定，可有效、快速地处理大量样品，各纯化环节有机配合，纯化效率得到显著提高，操作简单，易于放大生产。通过所述的分离纯化方法，产物纯度达86％以上，Peptibody多表位疫苗的免疫原性好，能够有效引起机体产生特异性免疫应答，实现了抑制肿瘤血管新生的Peptibody多表位疫苗的规模纯化，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN107987172A

公开(公告)日：2018-05-04

申请号：CN201711202680.5

申请日：2017-11-27

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邓宁 ,  邓艳瑞 ,  张利刚

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  A61K39/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种抑制肿瘤血管新生的peptibody多表位疫苗及其应用。该peptibody多表位疫苗的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其含人IgG1Fc段的融合多表位疫苗，其中包含三个人VEGF表位、三个bFGF表位和完整的人IgG1的Fc段；其具有同时诱导机体产生高滴度抗VEGF和抗bFGF抗体的作用，能同时抑制肿瘤高表达的VEGF和bFGF细胞生长因子。通过实验表明，该多表位疫苗可以诱导BABL/C小鼠获得针对VEGF/bFGF的特异性免疫应答，并能有效抑制C57BL/6LL-2荷瘤小鼠肿瘤的生长，肿瘤生长抑制率达到60～70％。因此，其可用于制备抗肿瘤药物。

公开(公告)号：CN111850072B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN201910355952.8

申请日：2019-04-29

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邓宁 ,  张利刚

IPC: C12P21/02 ,  C07K19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了Peptibody多表位疫苗发酵生产工艺与应用。所述的Peptibody多表位疫苗发酵生产工艺采用了M9培养基作为发酵培养基，通过IPTG或乳糖诱导发酵，各个环节有机配合实现了Peptibody多表位疫苗的规模生产。其中，所述的乳糖诱导发酵生产工艺能够实现高效稳定的诱导表达，进一步提高湿重和目的蛋白的产量；并可将接种量从2％提高至8％，有效缩短整个发酵时间。本发明成功实现了Peptibody工程菌的高密度发酵和Peptibody多表位疫苗的高效表达，简单稳定、易于放大，100L罐单次发酵生产目的蛋白的产量可达105.64g，具有良好的应用前景和工业生产价值。

公开(公告)号：CN115785271A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211576619.8

申请日：2022-12-09

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邓宁 ,  郭娆晴 ,  黄嘉雯 ,  张利刚

IPC: C07K16/28 ,  C12N15/13 ,  C12N15/81 ,  A61K39/395 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开一种高亲和力的抗PD‑L1人源抗体及其应用。该抗体包括轻链可变区和重链可变区；其中，轻链可变区含有氨基酸序列分别如SLRSYY、GKN和NSRDVRLKWV所示的LCDR1～LCDR3；重链可变区含有氨基酸序列如GGSISSYY、IKQDESTK和ARVWWHAEIASNDY所示的HCDR1～HCDR3。本发明通过分析人源抗体的突变热点，进行筛选，得到高亲和力的抗PD‑L1人源抗体。本发明接着该抗体为基础，定点突变引入2个半胱氨酸从而引入二硫键，构建成如SEQ ID NO.7所示的ds‑Diabody，两条肽链以共价键结合，大大提高了稳定性，在临床诊断和治疗方面具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN111850072A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN201910355952.8

申请日：2019-04-29

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邓宁 ,  张利刚

IPC: C12P21/02 ,  C07K19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了Peptibody多表位疫苗发酵生产工艺与应用。所述的Peptibody多表位疫苗发酵生产工艺采用了M9培养基作为发酵培养基，通过IPTG或乳糖诱导发酵，各个环节有机配合实现了Peptibody多表位疫苗的规模生产。其中，所述的乳糖诱导发酵生产工艺能够实现高效稳定的诱导表达，进一步提高湿重和目的蛋白的产量；并可将接种量从2％提高至8％，有效缩短整个发酵时间。本发明成功实现了Peptibody工程菌的高密度发酵和Peptibody多表位疫苗的高效表达，简单稳定、易于放大，100L罐单次发酵生产目的蛋白的产量可达105.64g，具有良好的应用前景和工业生产价值。