公开(公告)号：CN103045598A

公开(公告)日：2013-04-17

申请号：CN201310022086.3

申请日：2013-01-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 鞠辉明 ,  杨跃飞 ,  白立景 ,  姜星

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种生产猪microRNA-378的方法及其专用DNA片段。该DNA片段如SEQIDNO.1所示。含有上述DNA片段的重组载体pSingle-tTS-microRNA-378也属于本发明的保护范围之内。具体地，上述重组载体是将pSingle-tTS载体的多克隆位点插入有SEQ ID NO.1所示片段上述的猪microRNA-378前体DNA片段插入pSingle-tTS的XhoΙ位点构成的重组表达载体。将重组载体转化到细胞系中，用强力霉素诱导表达生产猪microRNA-378；和正常组细胞内microRNA-378表达相比，经诱导底物诱导后microRNA-378表达效率显著提高，各组间相差极显著（p＜0.01）。

公开(公告)号：CN102978202A

公开(公告)日：2013-03-20

申请号：CN201210383179.4

申请日：2012-10-10

Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 ,  扬州大学

Inventor： 李奎 ,  宋成义 ,  吴晗 ,  鞠辉明 ,  白立景

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明为一种猪骨骼肌中特异过表达猪内源IGF1(C1：Ea)基因的安全型表达载体。该载体包含猪内源性序列sk-α-actinPromoter/IGF1(C1:Ea)/sk-α-actin3’UTR/SV40增强子串联组成的表达盒。本发明的表达载体在细胞水平上验证了骨骼肌特异sk-α-actin启动子在成肌细胞中能高效表达，在具有成肌分化潜能的PEF细胞中仅低水平表达而在其他类型细胞中不表达。本发明中构建的载体制备转基因小鼠，通过定量PCR和WesternBlot检测出转基因小鼠骨骼肌中IGF1基因的mRNA和蛋白表达水平分别为野生型小鼠的15倍和3.5倍，并且仅在骨骼肌中高效表达。